| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-22页 |
| ·生物柴油概述 | 第8-12页 |
| ·生物柴油优势 | 第8页 |
| ·生物柴油生产原理 | 第8-9页 |
| ·生物柴油制备方法 | 第9-11页 |
| ·生物柴油国内外研究现状 | 第11-12页 |
| ·生物柴油发展的限制因素 | 第12页 |
| ·微藻制备生物柴油 | 第12-15页 |
| ·发展历史 | 第13页 |
| ·微藻制备生物柴油的优势 | 第13-15页 |
| ·微藻制备生物柴油的限制因素 | 第15页 |
| ·微藻油脂代谢调控 | 第15-21页 |
| ·油脂合成机制 | 第15-17页 |
| ·微藻的培养方式 | 第17页 |
| ·微藻脂代谢调控研究进展 | 第17-21页 |
| ·本课题研究目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 实验材料与方法 | 第22-35页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·主要实验仪器 | 第22页 |
| ·实验试剂 | 第22-23页 |
| ·藻种与培养 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-35页 |
| ·生物量的测定方法 | 第24页 |
| ·中性脂的测定方法 | 第24-25页 |
| ·细胞提取液的制备方法 | 第25页 |
| ·蛋白含量的测定方法 | 第25页 |
| ·总糖测定方法 | 第25-26页 |
| ·总脂的提取方法 | 第26页 |
| ·叶绿素含量的测定方法 | 第26页 |
| ·酶活测定方法 | 第26-27页 |
| ·ECH-RNAi质粒的构建 | 第27-29页 |
| ·总RNA的提取 | 第29页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第29页 |
| ·莱茵衣藻总DNA的提取 | 第29-30页 |
| ·荧光实时定量PCR的引物设计 | 第30-31页 |
| ·荧光实时定量PCR检测烯酰辅酶A水合酶基因的表达 | 第31页 |
| ·引物的设计和PCR扩增 | 第31-32页 |
| ·PCR产物回收,与T载体的连接 | 第32-33页 |
| ·酶切后目的DNA片段的回收,及与质粒连接 | 第33页 |
| ·大肠杆菌热击转化感受态细胞的制作及转化方法 | 第33-34页 |
| ·莱茵衣藻细胞的玻璃珠转化法 | 第34页 |
| ·脂肪酸的气相色谱分析 | 第34-35页 |
| 3 结果与讨论 | 第35-53页 |
| ·镁饥饿胁迫对莱茵衣藻的影响 | 第35-39页 |
| ·镁饥饿对生物量的影响 | 第35-36页 |
| ·镁饥饿对总糖含量的影响 | 第36-37页 |
| ·镁饥饿对总蛋白含量的影响 | 第37页 |
| ·镁饥饿对中性脂含量的影响 | 第37-38页 |
| ·镁饥饿对总脂含量的影响 | 第38页 |
| ·镁饥饿对叶绿素含量的影响 | 第38-39页 |
| ·氮饥饿胁迫对莱茵衣藻的影响 | 第39-42页 |
| ·中性脂相对含量的测定 | 第39-40页 |
| ·单体脂肪酸分析 | 第40-41页 |
| ·总脂含量的分析 | 第41-42页 |
| ·烯酰辅酶A水合酶(ECH)对莱茵衣藻油脂积累的影响 | 第42-53页 |
| ·ECH-RNAi质粒的构建 | 第42-48页 |
| ·抗生素平板筛选ECH-RNAi的转基因藻株 | 第48页 |
| ·中性脂相对含量的测定 | 第48-49页 |
| ·单体脂肪酸及总脂含量的变化 | 第49-51页 |
| ·荧光定量PCR的结果及分析 | 第51页 |
| ·酶活的测定 | 第51-53页 |
| 4 结论 | 第53-54页 |
| 5 展望 | 第54-55页 |
| 6 参考文献 | 第55-61页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第61-62页 |
| 8 致谢 | 第62-63页 |
| 附录一 烯酰辅酶A水合酶ECH的基因序列 | 第63-64页 |