| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 缩略词 | 第12-19页 |
| 第一章 前言与文献综述 | 第19-53页 |
| ·晶状体的发育 | 第19-23页 |
| ·眼的胚胎发育 | 第19-21页 |
| ·晶状体的胚胎发育 | 第21-23页 |
| ·晶状体发育的分子机制 | 第23-43页 |
| ·晶状体诱导的分子机制 | 第25-26页 |
| ·晶状体发育过程中的信号通路 | 第26-33页 |
| ·FGF在晶状体的发育过程中的作用 | 第27-31页 |
| ·BMP/TGF β信号通路与晶状体细胞分化 | 第31-32页 |
| ·Wnt信号通路与晶状体细胞分化 | 第32-33页 |
| ·转录调控 | 第33-36页 |
| ·晶状体发育过程中Pax6基因的转录调控 | 第34页 |
| ·晶状体发育过程中Six3,c-Maf和Foxe3基因的转录调控 | 第34-36页 |
| ·晶状体结构蛋白 | 第36-43页 |
| ·晶状体中α A-crystallin的转录调控 | 第37-38页 |
| ·晶状体中α B-crystallin的转录调控 | 第38-39页 |
| ·α-crystallins蛋白的生物功能 | 第39-40页 |
| ·α-crystallins蛋白在细胞凋亡通路中的作用 | 第40-41页 |
| ·α B-crystallin在泛素化降解中的作用 | 第41-42页 |
| ·晶状体中β-crystallin的转录调控 | 第42页 |
| ·晶状体中整合素,Filensin,CP49的转录调控 | 第42-43页 |
| ·P53与晶状体发育 | 第43-53页 |
| ·p53结构与功能 | 第44-46页 |
| ·p53的生物功能 | 第46-49页 |
| ·p53在晶状体发育过程中的作用 | 第49-53页 |
| 第二章 材料与方法 | 第53-87页 |
| ·实验材料 | 第53页 |
| ·实验试剂和仪器 | 第53-55页 |
| ·实验方法 | 第55-85页 |
| ·组织免疫荧光检测小鼠胚胎晶状体的发育 | 第55-57页 |
| ·冰冻切片的制备 | 第55-56页 |
| ·免疫荧光组织化学操作步骤 | 第56-57页 |
| ·蛋白质印记(Western Blot) | 第57-64页 |
| ·组织总蛋白的提取 | 第57-58页 |
| ·细胞总蛋白的提取 | 第58-59页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第59-60页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第60-62页 |
| ·转膜和封闭 | 第62-63页 |
| ·抗体杂交与显影 | 第63-64页 |
| ·提取小鼠RNA与基因组DNA | 第64-68页 |
| ·总RNA的提取 | 第64-65页 |
| ·提取细胞总RNA | 第65-66页 |
| ·第一条链cDNA反转录 | 第66-67页 |
| ·提取小鼠基因组DNA | 第67-68页 |
| ·细胞培养 | 第68-69页 |
| ·FGF处理细胞 | 第69页 |
| ·MTT法检测细胞活性 | 第69-70页 |
| ·脂质体介导转染α TN4-1细胞并建立稳定细胞系 | 第70-73页 |
| ·构建载体 | 第73-78页 |
| ·质粒的提取 | 第73-75页 |
| ·酶切与胶回收 | 第75-77页 |
| ·酶接与转化 | 第77-78页 |
| ·CaCl_2法制备感受态细胞 | 第78页 |
| ·凝胶迁移滞后方法(Electrophoretic Mobility ShiftAssay,EMSA)分析 | 第78-85页 |
| ·提取核蛋白 | 第80-82页 |
| ·同位素标记 | 第82-83页 |
| ·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第83-85页 |
| ·引物 | 第85-87页 |
| 第三章 实验结果 | 第87-128页 |
| ·P53在晶状体细胞分化过程中的重要作用 | 第87-110页 |
| ·晶状体分化过程中p53磷酸化状态的变化 | 第87-91页 |
| ·p53在小鼠胚胎晶状体中的时空差异性表达 | 第87-88页 |
| ·磷酸化的p53在小鼠不同胚胎发育时期的晶状体不同区域细胞中差异性表达 | 第88-91页 |
| ·抑制p53的功能则减弱小鼠晶状体上皮细胞的分化进程 | 第91-98页 |
| ·透镜状小体的形成是晶状体上皮细胞分化的一种表现形式 | 第91-94页 |
| ·通过抑制小鼠晶状体上皮细胞aTN4-1中p53的表达,aTN4-1细胞的透镜状小体的形成率显著性下降 | 第94-98页 |
| ·抑制小鼠晶状体上皮细胞aTN4-1中p53的表达,细胞的生长速度和迁移率基本上未受到显著性的影响 | 第98页 |
| ·敲降p53抑制bFGF诱导的晶状体上皮细胞aTN4-1的分化 | 第98-109页 |
| ·bFGF体外诱导晶状体上皮细胞的分化,同时伴随着p53Ser15,Ser20位点磷酸化的升高,并伴随着促凋亡因子Bak的升高 | 第98-103页 |
| ·shRNA敲降p53将抑制bFGF诱导的晶状体上皮细胞的分化 | 第103-106页 |
| ·小鼠晶状体上皮细胞aTN4-1的分化水平与p53 Ser15,Ser20位点的磷酸化水平紧密相关 | 第106-109页 |
| ·实验小结 | 第109-110页 |
| ·P53直接调节转录因子C-MAF从而调控晶状体的分化 | 第110-120页 |
| ·p53敲除影响c-Maf在小鼠晶状体上皮细胞中的差异性表达 | 第110-115页 |
| ·p53敲除小鼠的鉴定 | 第110-111页 |
| ·p53调节小鼠胚胎发育过程中晶状体上皮细胞中转录因子c-Mar的表达水平 | 第111-113页 |
| ·p53调节小鼠晶状体上皮细胞aTN4-1透镜状小体形成过程中c-Maf的表达水平 | 第113-115页 |
| ·p53直接调控c-Maf | 第115-116页 |
| ·实验小结 | 第116-120页 |
| ·P53直接调控晶状体标志蛋白AA-CRYSTALLIN基因的转录 | 第120-128页 |
| ·p53调控α A-crystallin基因的表达水平 | 第120-121页 |
| ·p53可以直接与α A-crystallin基因的启动子结合 | 第121-122页 |
| ·实验小结 | 第122-128页 |
| 第四章 总结,讨论与展望 | 第128-136页 |
| ·实验总结 | 第128-130页 |
| ·讨论与展望 | 第130-136页 |
| 参考文献 | 第136-156页 |
| 博士学习期间撰写、发表论文及获奖情况 | 第156-159页 |
| 致谢 | 第159-160页 |
