| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-23页 |
| ·拟南芥花药发育的基本过程 | 第10-12页 |
| ·花药绒毡层发育过程及其功能 | 第12-15页 |
| ·绒毡层分化与发育相关基因及研究进展 | 第15-20页 |
| ·花粉壁及其形成的分子机制 | 第20-22页 |
| ·本研究的研究价值和主要内容 | 第22-23页 |
| 第二章 材料方法 | 第23-41页 |
| ·植株、质粒和菌株 | 第23页 |
| ·植株 | 第23页 |
| ·质粒 | 第23页 |
| ·菌株 | 第23页 |
| ·实验试剂 | 第23-24页 |
| ·实验仪器 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-39页 |
| ·拟南芥的种植培养 | 第24-25页 |
| ·植物总 DNA 提取 | 第25页 |
| ·植物总 RNA 提取 | 第25页 |
| ·植物总 RNA 纯化 | 第25-26页 |
| ·RNA 反转录体系 | 第26页 |
| ·目的基因的 PCR 扩增 | 第26-27页 |
| ·PCR 鉴定阳性克隆 | 第27页 |
| ·Realtime PCR | 第27页 |
| ·碱解法抽提质粒 DNA | 第27-28页 |
| ·双酶切反应体系 | 第28页 |
| ·T4 连接体系 | 第28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第29-30页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第30页 |
| ·农杆菌感受态细胞的转化 | 第30页 |
| ·转基因植株的转化 | 第30-31页 |
| ·转基因植株的筛选 | 第31页 |
| ·亚历山大染色 | 第31-32页 |
| ·半薄切片 | 第32-33页 |
| ·组织化学染色 | 第33页 |
| ·原核表达蛋白及纯化 | 第33-34页 |
| ·SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第34-35页 |
| ·Western Blotting | 第35-36页 |
| ·染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第36-38页 |
| ·凝胶迁移实验(EMSA) | 第38-39页 |
| ·实验涉及引物序列 | 第39-41页 |
| 第三章 实验结果 | 第41-50页 |
| ·构建 DYT1 标签互补植株 | 第41-42页 |
| ·DYT1-GFP 在花药中的时空分布 | 第42-43页 |
| ·ChIP-PCR 表明 DYT1 能结合 TDF1 启动子 | 第43-44页 |
| ·prodyt1:tdf1 转基因植株的构建 | 第44-45页 |
| ·prodyt1:tdf1 转基因植株细胞学表型与 dyt1-2 突变体不一致 | 第45-47页 |
| ·TDF1 下游转录因子在 prodyt1:tdf1 转基因植株中恢复表达 | 第47页 |
| ·孢粉素能够在 prodyt1:tdf1 转基因植株中合成 | 第47-50页 |
| 第四章 讨论 | 第50-54页 |
| ·DYT1 在花药发育过程中的转录水平与翻译水平上存在差异 | 第50-51页 |
| ·DYT1 能通过 TDF1 及其介导的下游转录因子调控孢粉素前体物质的合成 | 第51-53页 |
| ·DYT1 下游存在其他重要通路调控着绒毡层发育 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 硕士期间发表论文 | 第61页 |
