| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 引言 | 第13-25页 |
| 一、20-HETE在机体内合成途径及调节 | 第13-16页 |
| 二、20-HETE的生理、病理作用及机制 | 第16-20页 |
| 1. 20-HETE在调节血管紧张度中的作用及机制 | 第16-17页 |
| 2. 20-HETE对肾脏功能的调节作用 | 第17页 |
| 3. 20-HETE作为细胞内第二信使及参与促细胞有丝分裂作用 | 第17-18页 |
| 4. 20-HETE与NO之间的交互作用关系 | 第18-19页 |
| 5. 20-HETE其他生理、病理作用 | 第19-20页 |
| 三、20-HETE对心脏功能的影响及我实验室相关研究 | 第20-21页 |
| 1. 20-HETE在心肌缺血再灌注损伤中的作用 | 第20页 |
| 2. 本实验室相关研究 | 第20-21页 |
| 四、本研究的背景、内容及研究目标 | 第21-25页 |
| 1. 研究背景 | 第21-22页 |
| 2 研究内容 | 第22-24页 |
| 3 研究目标 | 第24-25页 |
| 第一章 20-HETE对大鼠心肌细胞L-型钙通道作用机制研究 | 第25-39页 |
| 摘要 | 第25-26页 |
| 一、引言 | 第26-27页 |
| 二、材料与方法 | 第27-28页 |
| 1. 实验动物与药品 | 第27页 |
| 2. 成年大鼠心肌细胞分离 | 第27页 |
| 3. 膜片钳电生理记录 | 第27-28页 |
| 4. 心肌细胞内ROS水平检测 | 第28页 |
| 5. p47phox磷酸化水平检测 | 第28页 |
| 6. PKC活性检测 | 第28页 |
| 三、实验结果 | 第28-35页 |
| 1. 20-HETE通过激活心肌细胞膜L-型钙通道增加ICa,L | 第28-29页 |
| 2. NADPH氧化酶及超氧化物介导 20-HETE增强L-型钙电流作用 | 第29-31页 |
| 3. 20-HETE增加了心肌细胞中ROS的生成 | 第31页 |
| 4. 20-HETE增强了心肌细胞中NADPH氧化酶活性 | 第31-32页 |
| 5. PKC参与 20-HETE 激活NADPH氧化酶引起超氧化物的生成作用 | 第32-33页 |
| 6. 20-HETE增加PKC活性及NADPH氧化酶的磷酸化水平 | 第33-34页 |
| 7. 20-HETE通过PKC依赖性机制增加心肌细胞L-型钙电流作用 | 第34-35页 |
| 四、讨论 | 第35-39页 |
| 第二章 20-HETE在心肌缺血再灌注损伤中的作用及机制研究 | 第39-59页 |
| 摘要 | 第39-40页 |
| 一、引言 | 第40-41页 |
| 二、材料与方法 | 第41-44页 |
| 1. 实验动物与药品 | 第41页 |
| 2. 大鼠离体心肌缺血再灌注模型建立 | 第41-42页 |
| 2. 缺血再灌注实验方案 | 第42页 |
| 3. 心梗面积测定 | 第42页 |
| 4. 心肌细胞凋亡检测 | 第42页 |
| 5. 心肌ROS水平测定 | 第42页 |
| 6. 蛋白质过氧化水平检测 | 第42-43页 |
| 7. qRT-PCR方法检测p22phox和gp91phoxmRNA表达 | 第43页 |
| 8. Western Blot检测p22phox和gp91phox蛋白表达 | 第43页 |
| 9. NADPH氧化酶活性检测 | 第43页 |
| 10. 心肌组织过氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性检测 | 第43-44页 |
| 三、实验结果 | 第44-54页 |
| 1. HET0016 减弱了 20-HETE诱导的加重缺血再灌注后心肌功能的下降 | 第44页 |
| 2. HET0016 抑制了 20-HETE诱导的缺血再灌注后心肌梗死面积增加 | 第44-46页 |
| 3. HET0016 抑制了 20-HETE诱导的缺血再灌注后心肌细胞凋亡作用 | 第46-48页 |
| 4. HET0016 和 20-HETE对缺血再灌注诱发ROS生成及蛋白质过氧化的影响 | 第48-49页 |
| 5. HET0016 和 20-HETE对缺血再灌注后心肌组织SOD和catalase活性的影响 | 第49-50页 |
| 6. 20-HETE增加了再灌注后NADPH氧化酶亚基的表达和活性增强 | 第50-51页 |
| 7. 20-HETE通过PKC依赖机制激活NADPH氧化酶 | 第51页 |
| 8. Apocynin和Tempol减弱了 20-HETE诱导的缺血再灌注后心肌功能的下降 | 第51-54页 |
| 四、讨论 | 第54-59页 |
| 第三章 20-HETE介导血管紧张素II诱导的心肌细胞凋亡研究 | 第59-71页 |
| 摘要 | 第59-60页 |
| 一、引言 | 第60-61页 |
| 二、材料与方法 | 第61-62页 |
| 1. 实验动物与药品 | 第61页 |
| 2. 原代乳鼠心肌细胞分离及培养 | 第61页 |
| 3. FITC-annexin V与PI双染法测定心肌细胞凋亡 | 第61页 |
| 4. 高效液相色谱分析检测 20-HETE含量 | 第61-62页 |
| 5. 心肌细胞线粒体膜电位（ΔΨm）检测 | 第62页 |
| 6. 心肌细胞中ROS含量测定 | 第62页 |
| 7. Real-time RT-PCR方法检测CYP4A1mRNA和蛋白表达 | 第62页 |
| 三、实验结果 | 第62-68页 |
| 1. Ang II促进培养的乳鼠心肌细胞凋亡 | 第62-63页 |
| 2. Ang II增加心肌细胞内 20-HETE生成 | 第63-64页 |
| 3. HTE0016 对Ang II诱导的细胞凋亡的作用 | 第64-65页 |
| 4. HET0016 抑制Ang II和 20-HETE诱导的线粒体膜电位下降 | 第65-66页 |
| 5. HET0016 抑制Ang II和 20-HETE诱导的ROS过量生成 | 第66-67页 |
| 6. Ang II促进心肌细胞内CYP4A1 表达 | 第67-68页 |
| 四、讨论 | 第68-71页 |
| 第四章 20-HETE通过δPKC对大鼠心肌细胞L-型钙通道和全细胞钾通道电流及心肌力学的作用研究 | 第71-81页 |
| 摘要 | 第71-72页 |
| 一、引言 | 第72页 |
| 二、材料与方法 | 第72-73页 |
| 1. 实验动物与药品 | 第72-73页 |
| 2. 大鼠离体心肌力学测定 | 第73页 |
| 3. 成年大鼠心肌细胞分离 | 第73页 |
| 4. 膜片钳电生理记录 | 第73页 |
| 5. 统计方法 | 第73页 |
| 三、实验结果 | 第73-77页 |
| 1. δPKC抑制剂卡马拉素阻断了 20-HETE诱导的L-型钙通道电流增强作用 | 第73-74页 |
| 2. 卡马拉素阻断了 20-HETE对全细胞钾通道电流的抑制作用 | 第74-75页 |
| 3. 卡马拉素阻断了 20-HETE诱导的心肌力学指标的下降 | 第75-77页 |
| 四、讨论 | 第77-81页 |
| 结论 | 第81-82页 |
| 创新点 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-91页 |
| 附录 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第93页 |
