| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 综述 | 第10-19页 |
| ·基因治疗 | 第10-12页 |
| ·概念及发展历程 | 第10页 |
| ·基因治疗的分类 | 第10-11页 |
| ·基因载体 | 第11-12页 |
| ·病毒基因载体 | 第12-13页 |
| ·腺病毒 | 第12页 |
| ·腺相关病毒 | 第12-13页 |
| ·慢病毒 | 第13页 |
| ·逆转录病毒 | 第13页 |
| ·非病毒基因载体 | 第13-15页 |
| ·裸DNA | 第13页 |
| ·脂质体 | 第13-14页 |
| ·合成阳离子多聚物 | 第14页 |
| ·天然高分子化合物 | 第14-15页 |
| ·无机纳米粒子 | 第15页 |
| ·修饰的聚乙烯亚胺作为基因载体 | 第15-17页 |
| ·疏水修饰 | 第15-16页 |
| ·靶向修饰 | 第16-17页 |
| ·聚乙二醇(PEG)修饰 | 第17页 |
| ·小分子PEI链接物 | 第17页 |
| ·壳聚糖修饰 | 第17页 |
| ·本课题工作的提出 | 第17-19页 |
| 2 PEI-SA的合成及表征 | 第19-25页 |
| ·实验材料与仪器 | 第19页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·仪器 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-20页 |
| ·PEI-SA的制备 | 第19-20页 |
| ·PEI-SA的鉴定 | 第20页 |
| ·透射电镜观测形态 | 第20页 |
| ·粒径和zeta电位 | 第20页 |
| ·实验结果 | 第20-23页 |
| ·红外光谱分析 | 第20-21页 |
| ·~1H NMR核磁共振波谱分析 | 第21-22页 |
| ·透射电镜观测形态 | 第22页 |
| ·接枝率 | 第22页 |
| ·粒径及zeta电位 | 第22-23页 |
| ·讨论 | 第23-24页 |
| ·小结 | 第24-25页 |
| 3 PEI-SA的体外细胞毒性评价 | 第25-32页 |
| ·实验材料与仪器 | 第25-26页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·仪器 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-29页 |
| ·细胞培养相关试剂配制 | 第26-27页 |
| ·细胞培养 | 第27-28页 |
| ·MTT实验 | 第28页 |
| ·细胞形态观察实验 | 第28页 |
| ·统计分析 | 第28-29页 |
| ·实验结果 | 第29-31页 |
| ·细胞存活率 | 第29-30页 |
| ·细胞形态 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| 4 PEI-SA结合及保护核酸分子性能评价 | 第32-42页 |
| ·实验材料与仪器 | 第32-33页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·仪器 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-35页 |
| ·相关试剂配制 | 第33页 |
| ·热激法转化 | 第33-34页 |
| ·质粒DNA提取 | 第34页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳实验 | 第34-35页 |
| ·PEI-SA保护核酸分子抗酶降解实验 | 第35页 |
| ·PEI-SA结合核酸分子后溶液中核酸浓度的检测 | 第35页 |
| ·透射电镜观测PEI-SA结合核酸分子的形态 | 第35页 |
| ·PEI-SA结合核酸分子后的粒径及zeta电位 | 第35页 |
| ·实验结果 | 第35-40页 |
| ·质粒制备 | 第35-36页 |
| ·PEI-SA结合pDNA及siRNA | 第36-38页 |
| ·PEI-SA保护核酸分子 | 第38-39页 |
| ·PEI-SA结合核酸分子后溶液中核酸浓度的变化 | 第39页 |
| ·PEI-SA/pDNA复合物形态 | 第39-40页 |
| ·PEI-SA/pDNA复合物的粒径及zeta电位 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 5 体外转染 | 第42-55页 |
| ·实验材料与仪器 | 第42页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·仪器 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-45页 |
| ·细胞培养 | 第42页 |
| ·siRNA的溶解 | 第42-43页 |
| ·不同质量比例转染pDNA | 第43页 |
| ·不同时间检测pDNA表达GFP的情况 | 第43页 |
| ·血清对转染pDNA的影响 | 第43页 |
| ·不同pDNA用量转染 | 第43-44页 |
| ·流式细胞仪检测转染pDNA效率 | 第44页 |
| ·不同质量比例转染siRNA | 第44页 |
| ·不同浓度的siRNA转染 | 第44页 |
| ·不同转染时间转染siRNA | 第44-45页 |
| ·统计分析 | 第45页 |
| ·实验结果 | 第45-52页 |
| ·不同质量比例转染pDNA效果 | 第45页 |
| ·转染时间对pDNA转染效果的影响 | 第45-48页 |
| ·血清对转染pDNA的影响 | 第48页 |
| ·pDNA用量对转染效果的影响 | 第48-49页 |
| ·pDNA的转染效率 | 第49页 |
| ·siRNA的转染效率 | 第49-50页 |
| ·siRNA用量的影响 | 第50-51页 |
| ·转染时间对siRNA转染的影响 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 6 总结与展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 硕士期间发表论文 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |