摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
1 引言 | 第11-21页 |
·放线菌分类学的发展和研究意义 | 第11-13页 |
·放线菌分类学的发展 | 第11-12页 |
·放线菌分类学的研究意义 | 第12-13页 |
·放线菌的分类技术 | 第13-18页 |
·经典分类 | 第13-14页 |
·化学分类 | 第14-15页 |
·分子指征分析 | 第15-18页 |
·16S rRNA基因序列分析 | 第15-16页 |
·DNA(G+C)mol%测定 | 第16-17页 |
·DNA同源性分析 | 第17-18页 |
·DNA-DNA杂交技术 | 第18-20页 |
·液相复性速率法 | 第18-19页 |
·S_1核酸酶保护法 | 第19页 |
·羟磷灰石法 | 第19页 |
·微孔板杂交法 | 第19页 |
·尼龙膜杂交法 | 第19-20页 |
·本论文的研究目的及意义 | 第20-21页 |
2 材料和方法 | 第21-40页 |
·实验材料 | 第21-27页 |
·主要仪器 | 第21-22页 |
·主要试剂 | 第22-23页 |
·主要试剂配方 | 第23-24页 |
·杂交试剂 | 第23页 |
·DNA提取试剂 | 第23-24页 |
·培养基 | 第24-25页 |
·实验菌株 | 第25-27页 |
·DNA-DNA杂交示意图 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-40页 |
·DNA-DNA杂交步骤及优化 | 第27-32页 |
·放线菌基因组DNA的提取 | 第27-30页 |
·DNA的固定 | 第30页 |
·DNA的标记 | 第30-31页 |
·DNA的剪切 | 第31页 |
·预杂交 | 第31页 |
·杂交 | 第31页 |
·显色与检测 | 第31-32页 |
·杂交结果计算 | 第32页 |
·7 株放线菌DNA同源性检测 | 第32-33页 |
·DNA(G+C)mol%的测定 | 第32-33页 |
·杂交温度的计算 | 第33页 |
·DNA-DNA杂交 | 第33页 |
·菌株HA11090和HA11110的鉴定 | 第33-40页 |
·形态特征 | 第33页 |
·生理生化特征 | 第33-35页 |
·化学组分特征 | 第35-38页 |
·分子特征 | 第38-40页 |
3 结果 | 第40-59页 |
·DNA-DNA杂交条件优化 | 第40-43页 |
·基因组DNA的提取 | 第40-41页 |
·超声波剪切DNA | 第41-42页 |
·固定DNA的干燥条件 | 第42-43页 |
·标记物浓度的确定 | 第43页 |
·待测菌株DNA同源性分析 | 第43-49页 |
·基因组DNA的检测 | 第43-45页 |
·杂交温度的计算 | 第45-47页 |
·DNA的(G+C)mol%含量 | 第45-46页 |
·杂交温度 | 第46-47页 |
·标记DNA的剪切 | 第47-48页 |
·DNA-DNA微孔板杂交结果 | 第48-49页 |
·菌株HA11090和HA11110的鉴定 | 第49-59页 |
·形态和培养特征 | 第49-50页 |
·生理生化特征 | 第50-52页 |
·化学组分分析 | 第52-54页 |
·脂肪酸分析结果 | 第52-53页 |
·磷酸类脂分析结果 | 第53-54页 |
·分子鉴定结果 | 第54-57页 |
·16S rRNA基因序列测定及系统发育分析 | 第54-56页 |
·(G+C)mol%含量 | 第56页 |
·DNA同源性 | 第56-57页 |
·菌株HA11090的鉴定结果 | 第57页 |
·菌株HA11110的鉴定结果 | 第57-59页 |
4 讨论 | 第59-62页 |
·影响DNA-DNA杂交的因素 | 第59-61页 |
·DNA的纯度 | 第59页 |
·杂交温度 | 第59-60页 |
·预杂交 | 第60页 |
·杂交时间 | 第60页 |
·洗脱强度 | 第60-61页 |
·多相分类研究需注意的细节 | 第61-62页 |
5 结论 | 第62-64页 |
·DNA杂交条件优化 | 第62页 |
·7 株放线菌与其模式菌的DNA同源性 | 第62页 |
·菌株HA11090的鉴定结果 | 第62-63页 |
·菌株HA11110的鉴定结果 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
附录:7株待测菌株的(G+C)mol% HPLC图谱 | 第71-75页 |
致谢 | 第75页 |