| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13页 |
| 1 文献综述 | 第13-26页 |
| ·贮精腺的研究概况 | 第13-18页 |
| ·贮精现象和贮精腺的发现 | 第13-15页 |
| ·禽类贮精腺的解剖学和组织化学研究 | 第15-16页 |
| ·精腺内的微环境对精子存的影响 | 第16-18页 |
| ·neurexophilin 1的研究概况 | 第18-20页 |
| ·neurexophilin的发现 | 第18-20页 |
| ·鸡贮精腺内差异表达基因neurexophilin 1的研究 | 第20页 |
| ·RNA干扰技术研究进展 | 第20-26页 |
| ·RNA干扰的定义 | 第20-21页 |
| ·RNA干扰的发现 | 第21-22页 |
| ·RNA干扰的作用机制 | 第22-23页 |
| ·RNA干扰技术的应用 | 第23-26页 |
| ·RNA干扰在功能基因组研究中的应用 | 第23-24页 |
| ·RNA干扰在抗病毒感染方面的应用 | 第24页 |
| ·RNA干扰在基因治疗方面的应用 | 第24-25页 |
| ·RNA干扰在新药研发方面的应用 | 第25-26页 |
| 2 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 3 试验材料和方法 | 第27-48页 |
| ·试验材料 | 第27-31页 |
| ·干扰载体 | 第27页 |
| ·试验细胞 | 第27页 |
| ·主要试剂和配制方法 | 第27-30页 |
| ·主要仪器设备 | 第30-31页 |
| ·试验方法 | 第31-48页 |
| ·鸡neurexophilin 1基因重组干扰载体的构建 | 第31-38页 |
| ·细胞培养 | 第38-40页 |
| ·细胞免疫组化 | 第40-41页 |
| ·Western-blot鉴定neurexophilin在细胞中的表达 | 第41-44页 |
| ·重组质粒转染细胞 | 第44页 |
| ·重组质粒转录水平干扰效果检测 | 第44-46页 |
| ·neurexophilin 1基因干扰对DF-1细胞培养液环境的影响 | 第46-48页 |
| 4 结果与分析 | 第48-63页 |
| ·鸡neurexophilin 1基因干扰载体构建 | 第48-51页 |
| ·RNAi-Ready pSIREN载体的双酶切鉴定 | 第48页 |
| ·干扰载体psiRNA的酶切鉴定 | 第48-49页 |
| ·干扰载体psiRNA的测序鉴定 | 第49-51页 |
| ·鸡生殖道上皮细胞的培养及鉴定 | 第51-53页 |
| ·鸡生殖道上皮细胞的原代培养 | 第51-52页 |
| ·细胞免疫组化鉴定 | 第52-53页 |
| ·neurexophilin 1在鸡成纤维细胞中的表达 | 第53-56页 |
| ·细胞免疫荧光鉴定 | 第53-55页 |
| ·Western-blot鉴定 | 第55-56页 |
| ·重组质粒转染DF-1细胞 | 第56页 |
| ·重组质粒转染DF-1细胞转录水平检测 | 第56-59页 |
| ·细胞总RNA检测 | 第56-57页 |
| ·neurexophilin 1基因在转录水平的表达 | 第57-58页 |
| ·Real Time PCR结果 | 第58-59页 |
| ·neurexophilin 1基因干扰对DF-1细胞培养液环境的影响 | 第59-63页 |
| ·pH值变化 | 第60页 |
| ·Ca~2+浓度变化 | 第60-61页 |
| ·ACP浓度变化 | 第61-62页 |
| ·CA浓度变化 | 第62-63页 |
| 5 讨论 | 第63-66页 |
| ·RNA干扰技术以及RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen载体的选择 | 第63页 |
| ·neurexophilin 1在细胞中的表达 | 第63-64页 |
| ·鸡neurexophilin 1基因多态性对干扰效果的影响 | 第64页 |
| ·neurexophilin 1基因干扰对鸡贮精微环境的影响 | 第64-66页 |
| 6 小结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
