| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-14页 |
| 缩略语表 | 第14-16页 |
| 第1章 绪论 | 第16-27页 |
| ·概述 | 第16-17页 |
| ·多糖对巨噬细胞的免疫调节活性 | 第17-18页 |
| ·多糖对淋巴细胞的免疫调节活性 | 第18-20页 |
| ·多糖受体 | 第20-22页 |
| ·Toll 样受体 | 第20页 |
| ·Dectin-1(β-葡聚糖受体) | 第20-21页 |
| ·补体受体 3 (CR3) | 第21页 |
| ·甘露糖受体(MR) | 第21-22页 |
| ·多糖免疫调节活性的信号转导途径 | 第22-24页 |
| ·多糖对 G 蛋白介导的信号转导途径的影响 | 第22页 |
| ·多糖对受体酪氨酸蛋白激酶(Receptor tyrosine protein kinase, RTPK)途径的影响 | 第22-24页 |
| ·多糖对核转录因子κB(Nuclear factor- kappaB，NF-κB)信号转导途径的影响 | 第24页 |
| ·本文研究的目的意义和主要内容 | 第24-27页 |
| ·目的意义 | 第24-26页 |
| ·主要研究内容 | 第26-27页 |
| 第2章 黑灵芝多糖对巨噬细胞的免疫调节活性 | 第27-38页 |
| ·引言 | 第27页 |
| ·实验材料与仪器 | 第27-29页 |
| ·实验材料 | 第27-28页 |
| ·有关溶液配制 | 第28-29页 |
| ·实验仪器 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-31页 |
| ·流式细胞仪检测吞噬活性 | 第29页 |
| ·中性红实验检测吞噬活性 | 第29-30页 |
| ·Griess 法测定 NO | 第30页 |
| ·细胞因子检测 | 第30页 |
| ·RT-PCR | 第30页 |
| ·流式细胞仪检测细胞 ROS 生成 | 第30页 |
| ·数据处理 | 第30-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-36页 |
| ·PSG-1 中内毒素(LPS)的检测 | 第31-32页 |
| ·PSG-1 对小鼠巨噬细胞吞噬 FITC-dextran 的影响 | 第32-33页 |
| ·PSG-1 对小鼠巨噬细胞吞噬中性红的影响 | 第33页 |
| ·PSG-1 对小鼠巨噬细胞一氧化氮释放和一氧化氮合酶 mRNA 表达的影响 | 第33-34页 |
| ·PSG-1 对小鼠巨噬细胞分泌细胞因子的影响 | 第34-35页 |
| ·应用流式细胞仪检测 PSG-1 对细胞活性氧(ROS)释放的影响 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 第3章 黑灵芝多糖对巨噬细胞免疫调节活性的作用机制 | 第38-69页 |
| ·引言 | 第38-39页 |
| ·实验材料与仪器 | 第39-41页 |
| ·实验材料 | 第39-40页 |
| ·有关溶液配制 | 第40页 |
| ·实验仪器 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·制备荧光素标记黑灵芝多糖(f-PSG-1)和葡聚糖(f-Dextran) | 第41页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察 f-PSG-1 与细胞结合 | 第41页 |
| ·流式细胞仪检测 f-PSG-1 与细胞结合 | 第41页 |
| ·细胞因子检测 | 第41页 |
| ·分离小鼠腹腔巨噬细胞 | 第41-42页 |
| ·多功能酶标仪检测细胞 ROS 生成 | 第42页 |
| ·免疫沉淀 | 第42页 |
| ·Western blotting | 第42页 |
| ·凝胶迁移迁移率实验(EMSA) | 第42-43页 |
| ·瞬时转染和萤光报告基因检测 | 第43页 |
| ·数据处理 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-64页 |
| ·PSG-1 激活巨噬细胞的主要细胞受体 | 第43-48页 |
| ·PSG-1 对促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)通路的影响 | 第48-51页 |
| ·PSG-1 对磷酸肌醇-3 激酶/蛋白激酶 B(PI3K/Akt)通路的影响 | 第51-53页 |
| ·PSG-1 对核因子-κB(NF-κB)通路的影响 | 第53-56页 |
| ·PSG-1 对活性氧(ROS)通路的影响 | 第56-59页 |
| ·各条信号通路间的相互关系 | 第59-64页 |
| ·讨论 | 第64-68页 |
| ·本章小结 | 第68-69页 |
| 第4章 黑灵芝多糖对脾淋巴细胞的免疫调节活性 | 第69-78页 |
| ·引言 | 第69页 |
| ·实验材料与仪器 | 第69-71页 |
| ·实验材料 | 第69-70页 |
| ·有关溶液配制 | 第70页 |
| ·实验仪器 | 第70-71页 |
| ·实验方法 | 第71-72页 |
| ·分离脾淋巴细胞 | 第71页 |
| ·流式细胞仪检测细胞亚群 | 第71页 |
| ·纯化 T、B 淋巴细胞 | 第71-72页 |
| ·MTT 法检测细胞增殖 | 第72页 |
| ·ELISA 法检测细胞因子和免疫球蛋白 | 第72页 |
| ·数据处理 | 第72页 |
| ·结果与分析 | 第72-76页 |
| ·PSG-1 对 T、B 淋巴细胞增殖能力的影响 | 第72-74页 |
| ·PSG-1 对脾淋巴细胞亚群的影响 | 第74页 |
| ·PSG-1 对 T 淋巴细胞分泌细胞因子的影响 | 第74-75页 |
| ·PSG-1 对 B 淋巴细胞分泌免疫球蛋白的影响 | 第75-76页 |
| ·讨论 | 第76-77页 |
| ·本章小结 | 第77-78页 |
| 第5章 黑灵芝多糖对脾淋巴细胞免疫调节活性的作用机制 | 第78-98页 |
| ·引言 | 第78-79页 |
| ·实验材料与仪器 | 第79-80页 |
| ·实验材料 | 第79页 |
| ·有关溶液配制 | 第79页 |
| ·实验仪器 | 第79-80页 |
| ·实验方法 | 第80-82页 |
| ·细胞内 Ca~(2+)的含量 | 第80页 |
| ·Griess 法测定 NO | 第80页 |
| ·cAMP 和 cGMP 含量测定 | 第80-81页 |
| ·蛋白激酶 A (PKA) 和蛋白激酶 C (PKC)活性测定 | 第81页 |
| ·钙调神经磷酸酶 Calcineurin 的含量检测 | 第81页 |
| ·瞬时转染和萤光报告基因检测 | 第81页 |
| ·细胞因子检测 | 第81页 |
| ·流式细胞仪检测细胞 TLR4 受体表达 | 第81-82页 |
| ·数据处理 | 第82页 |
| ·结果与分析 | 第82-94页 |
| ·PSG-1 对脾淋巴细胞内 NO 的影响 | 第82页 |
| ·PSG-1 对脾淋巴细胞 cAMP 和 cGMP 含量的影响 | 第82-83页 |
| ·PSG-1 对脾淋巴细胞 PKA 和 PKC 活性的影响 | 第83页 |
| ·PSG-1 对脾淋巴细胞内 Ca~(2+)的影响 | 第83-84页 |
| ·PSG-1 对脾淋巴细胞钙调神经磷酸酶 calcineurin 的影响 | 第84-85页 |
| ·PSG-1 对脾淋巴细胞核转录因子 NFAT 的影响 | 第85-86页 |
| ·Ca~(2+)抑制剂 verapamil 对钙调神经磷酸酶的影响 | 第86-87页 |
| ·Ca~(2+)抑制剂 verapamil 对细胞因子释放的影响 | 第87-88页 |
| ·PKC 抑制剂 CalphostinC 对钙调神经磷酸酶的影响 | 第88-89页 |
| ·PKC 抑制剂 CalphostinC 对细胞因子释放的影响 | 第89-90页 |
| ·PKC 抑制剂 CalphostinC 对 NFAT 的影响 | 第90-91页 |
| ·钙调神经磷酸酶抑制剂 CsA 和 FK506 对 NFAT 的影响 | 第91-92页 |
| ·钙调神经磷酸酶抑制剂 CsA 和 FK506 对细胞因子释放的影响 | 第92-93页 |
| ·PSG-1 对脾淋巴细胞 TLR4 受体表达的影响 | 第93-94页 |
| ·讨论 | 第94-97页 |
| ·本章小结 | 第97-98页 |
| 第6章 黑灵芝多糖对环磷酰胺致免疫抑制小鼠的影响 | 第98-125页 |
| ·引言 | 第98-99页 |
| ·实验材料与仪器 | 第99-100页 |
| ·实验材料 | 第99-100页 |
| ·有关溶液配制 | 第100页 |
| ·实验仪器 | 第100页 |
| ·实验方法 | 第100-103页 |
| ·实验分组及处理方法 | 第100-101页 |
| ·分离腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞 | 第101页 |
| ·中性红吞噬试验及 NO 检测 | 第101页 |
| ·Western blotting | 第101页 |
| ·流式细胞仪检测细胞 TLR4 受体表达 | 第101页 |
| ·小鼠脾淋巴细胞增殖 | 第101页 |
| ·流式细胞仪检测细胞亚群 | 第101-102页 |
| ·细胞因子检测 | 第102页 |
| ·自然杀伤细胞(NK)细胞毒性检测 | 第102页 |
| ·毒性 T 细胞(CTL)细胞毒性检测 | 第102页 |
| ·外周白细胞、红细胞和血小板计数 | 第102页 |
| ·血清免疫球蛋白检测 | 第102页 |
| ·血清溶血素检测 | 第102-103页 |
| ·抗氧化能力检测 | 第103页 |
| ·数据处理 | 第103页 |
| ·结果与分析 | 第103-121页 |
| ·PSG-1 对免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节活性 | 第103-108页 |
| ·PSG-1 对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞的免疫调节活性 | 第108-115页 |
| ·PSG-1 对免疫抑制小鼠骨髓抑制及抗氧化能力的影响 | 第115-121页 |
| ·讨论 | 第121-124页 |
| ·本章小结 | 第124-125页 |
| 第7章 黑灵芝多糖对荷瘤C3H/HeN和C3H/HeJ小鼠的抗肿瘤与免疫调节活性 | 第125-143页 |
| ·引言 | 第125-126页 |
| ·实验材料与仪器 | 第126-127页 |
| ·实验材料 | 第126页 |
| ·有关溶液配制 | 第126页 |
| ·实验仪器 | 第126-127页 |
| ·实验方法 | 第127-129页 |
| ·动物分组与处理 | 第127页 |
| ·体内抑瘤率的测定 | 第127页 |
| ·荷瘤小鼠 S-180 细胞的制备 | 第127页 |
| ·流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第127-128页 |
| ·流式细胞术检测肿瘤细胞 Ca~(2+) | 第128页 |
| ·Caspase 活性的测定 | 第128页 |
| ·巨噬细胞吞噬能力检测 | 第128页 |
| ·巨噬细胞 ROS 生成检测 | 第128页 |
| ·Western blotting | 第128页 |
| ·自然杀伤细胞(NK)细胞毒性检测 | 第128-129页 |
| ·淋巴细胞增殖检测 | 第129页 |
| ·流式细胞仪检测细胞亚群 | 第129页 |
| ·数据处理 | 第129页 |
| ·结果与分析 | 第129-139页 |
| ·PSG-1 对荷瘤 C3H/HeN 和 C3H/HeJ 小鼠 S180 肿瘤的作用 | 第129-132页 |
| ·PSG-1 对荷瘤 C3H/HeN 和 C3H/HeJ 小鼠腹腔巨噬细胞的作用 | 第132-135页 |
| ·PSG-1 对荷瘤 C3H/HeN 和 C3H/HeJ 小鼠脾淋巴细胞的作用 | 第135-139页 |
| ·讨论 | 第139-142页 |
| ·本章小结 | 第142-143页 |
| 第8章 结论与展望 | 第143-145页 |
| ·本研究主要结论 | 第143-144页 |
| ·本研究的主要创新点 | 第144页 |
| ·进一步的研究方向 | 第144-145页 |
| 致谢 | 第145-146页 |
| 参考文献 | 第146-160页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第160-161页 |
