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四种中国源猕猴MHC Ⅰ类分子组成的多态性和进化研究

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
第一章 文献综述第12-23页
   ·主要组织相容性复合体的介绍第12-13页
   ·MHC基因多态性与功能的研究进展第13-15页
   ·猕猴MHC基因研究进展第15-18页
   ·猕猴MHC基因及分子功能的研究方法第18-20页
   ·本试验研究目的和意义第20-23页
第二章 四种猕猴MHC Ⅰ类分子A区B区基因的多态性分析第23-45页
   ·试验材料第23-26页
     ·试验所选取的动物第23页
     ·主要试剂及配方第23-25页
     ·主要仪器及设备第25-26页
   ·试验方法第26-33页
     ·RNA的提取第26-27页
     ·RNA反转录第27-28页
     ·cDNA进行PCR扩增第28-29页
     ·PCR扩增产物的克隆测序第29-33页
   ·结果与分析第33-42页
     ·RNA提取结果第33页
     ·藏酋猴、红面猴、熊猴和平顶猴MHC基因cDNA的克隆结果与分析第33-35页
     ·重组克隆质粒pMD-18T-MHC的构建与鉴定结果分析第35-37页
     ·测序比对结果第37-41页
     ·MHC-Ⅰ等位基因的进化分析第41-42页
   ·讨论第42-45页
     ·四种猕猴MHCⅠ类分子鉴定汇总第42-43页
     ·猕猴MHCⅠ类分子进化分析第43页
     ·猕猴MHCⅠ基因位点的变异性第43-44页
     ·不同猕猴MHCⅠ基因型和等位基因第44-45页
第三章 Mamu-B~*007:03及其剪切异构体Mamu-B~*007:03-sv1基因的表达及细胞内定位研究第45-59页
   ·试验材料第45-49页
     ·试验转染的细胞及载体质粒第45页
     ·主要仪器设备第45-46页
     ·主要试剂及配置第46-49页
   ·试验方法第49-56页
     ·引物设计第49页
     ·基因扩增与纯化回收第49页
     ·连接pMD-18T载体目的片段质粒与pEGFP-N_3载体质粒的双酶切第49-50页
     ·基因片段与载体的连接及转化第50页
     ·单克隆的选择第50-51页
     ·阳性转化子的质粒提取及酶切鉴定第51-52页
     ·细胞培养与质粒的转染第52-53页
     ·检测表达蛋白的亚细胞分布第53页
     ·细胞蛋白的提取第53-54页
     ·Western blot方法检测基因在293T细胞中的表达第54-56页
   ·结果与分析第56-58页
     ·Mamu-B~*007:03-sv1和Mamu-B~*007:03表达载体的构建第56页
     ·Mamu-B~*007:03-sv1和Mamu-B~*007:03基因表达的Western-blot鉴定第56-57页
     ·Mamu-B~*007:03和Mamu-B~*007:03-sv1基因在细胞内的表达定位第57-58页
   ·讨论第58-59页
第四章 猕猴B病毒gB和gC合成基因重组杆状病毒质粒的构建第59-64页
   ·材料与方法第59-61页
     ·材料第59页
     ·引物设计与生物合成第59-60页
     ·pFastBacHTA-gB和pFastBacHTA-gC转座质粒的构建第60页
     ·重组杆状病毒穿梭载体的构建第60-61页
   ·结果与分析第61-63页
     ·转座质粒pFastBacHTA-gB和pFastBacHTA-gC的鉴定第61页
     ·重组杆状病毒穿梭载体鉴定第61-63页
   ·讨论第63-64页
第五章 全文结论第64-65页
参考文献第65-73页
致谢第73-74页
作者简介第74-75页
论文图表统计第75页

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