中文摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 前言 | 第13-29页 |
·种子的休眠与萌发 | 第13-20页 |
·外在因素对种子萌发的影响 | 第13-15页 |
·温度对种子萌发的影响 | 第13-14页 |
·光照对种子萌发的影响 | 第14页 |
·水分对种子萌发的影响 | 第14页 |
·氧气对萌发的影响 | 第14-15页 |
·盐浓度对种子萌发的影响 | 第15页 |
·植物激素对种子萌发的影响 | 第15-20页 |
·GA 对种子萌发的影响 | 第15-16页 |
·ABA 对种子萌发的影响 | 第16-19页 |
·其他植物激素对种子萌发的影响 | 第19-20页 |
·转录因子 | 第20-28页 |
·转录因子的 DNA 结合结构域 | 第21页 |
·转录因子的转录调控结构域 | 第21-22页 |
·转录因子的分类 | 第22-28页 |
·SANT/MYB 转录因子的结构特征和功能 | 第23-24页 |
·AP2/ERF 转录因子的鉴定和特征 | 第24页 |
·AP2/ERF 转录因子家族的分类 | 第24页 |
·AP2/ERF 转录因子家族的结构域的特征 | 第24-25页 |
·AP2 亚家族的功能 | 第25-26页 |
·DREB 和 ERF 亚家族的功能 | 第26-27页 |
·RAV 亚家族的功能 | 第27-28页 |
·本课题的目的和意义 | 第28-29页 |
2 材料与方法 | 第29-44页 |
·实验材料 | 第29-30页 |
·植物材料 | 第29页 |
·菌株与质粒 | 第29页 |
·酶与各种生化试剂 | 第29页 |
·引物 | 第29-30页 |
·实验方法 | 第30-44页 |
·RNA 的提取 | 第30-31页 |
·利用 TRIzol 法提取 RNA | 第30-31页 |
·利用通用植物总 RNA 提取试剂盒(离心柱型)提取 RNA | 第31页 |
·RNA 中基因组 DNA 的去除 | 第31-32页 |
·RNA 反转录 | 第32页 |
·植物基因组的提取与纯化 | 第32-33页 |
·拟南芥基因组 DNA 的 CTAB 法提取(小量法) | 第32页 |
·植物基因组的纯化 | 第32-33页 |
·载体构建 | 第33-35页 |
·目的 DNA 片段的获得 | 第33页 |
·DNA 片段的回收(试剂盒法) | 第33-34页 |
·平末端加尾 | 第34页 |
·连接反应 | 第34页 |
·酶切和回收 | 第34-35页 |
·酶切片段连接到 pBI121 表达载体 | 第35页 |
·大肠杆菌(E. Coli)感受态细胞的制备和外源重组质粒的转化 | 第35-36页 |
·大肠杆菌(E. Coli)感受态细胞的制备 | 第35页 |
·大肠杆菌(E. Coli)细胞对外源重组质粒的转化 | 第35-36页 |
·阳性重组质粒的菌液 PCR 方法鉴定 | 第36页 |
·提取环状的质粒 DNA 的分子 | 第36-37页 |
·小量碱法提取环状的质粒 | 第36-37页 |
·大量法提取环状的质粒 | 第37页 |
·植物高效表达载体 pBI121 所介导的遗传转化 | 第37-38页 |
·根癌农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备 | 第37页 |
·冻融法转化农杆菌 GV3101 | 第37-38页 |
·农杆菌的培养 | 第38页 |
·农杆菌介导的拟南芥稳定转化 | 第38页 |
·转化洋葱表皮细胞观察 GFP 定位 | 第38-39页 |
·实时定量反转录 PCR | 第39-40页 |
·定量反转录 PCR 引物的设计 | 第39页 |
·qRT-PCR 反应条件 | 第39-40页 |
·植物蛋白的提取 | 第40页 |
·Western Blot 方法 | 第40-43页 |
·蛋白质浓度检测 | 第40-41页 |
·蛋白质凝胶电泳 | 第41页 |
·半干法蛋白转移 | 第41-42页 |
·免疫发光法检测蛋白含量 | 第42-43页 |
·进化树的获得 | 第43-44页 |
·使用 Clustal 进行序列比对 | 第43页 |
·Mega4 构建系统发生树的方法 | 第43-44页 |
3 结果与分析 | 第44-58页 |
·EST 序列的获得 | 第44页 |
·DW497477 和 TA42288_3635 全长序列的获得 | 第44-45页 |
·GhRAV 的功能分析 | 第45-55页 |
·GhRAV 氨基酸序列分析 | 第45-46页 |
·GhRAV 蛋白的亚细胞定位 | 第46-47页 |
·GhRAV 转基因拟南芥的功能分析 | 第47-53页 |
·GhRAV 超表达拟南芥的获得 | 第47-48页 |
·GhRAV 超表达株系对盐胁迫不敏感 | 第48-50页 |
·GhRAV 超表达株系对渗透胁迫不敏感 | 第50-51页 |
·ABA 介导了 GhRAV 超表达株系对盐胁迫和渗透胁迫的不敏感 | 第51-53页 |
·GhRAV 超表达影响了 ABA 介导的盐和渗透胁迫的 ABA 信号 | 第53-55页 |
·GhMYB 的功能分析 | 第55-58页 |
·GhMYB 超表达拟南芥株系的获得 | 第55-56页 |
·GhMYB 超表达株系对盐和渗透胁迫不敏感 | 第56-58页 |
4 讨论 | 第58-60页 |
5 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
致谢 | 第69页 |