中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-24页 |
·植物芽的再生 | 第12-17页 |
·芽再生体系的建立 | 第12-13页 |
·芽再生过程中干细胞的重新形成 | 第13-14页 |
·生长素在芽再生过程中的作用 | 第14-17页 |
·生长素在植物发育中的作用 | 第14-15页 |
·生长素的极性运输 | 第15-16页 |
·生长素在芽再生过程中的作用 | 第16-17页 |
·微丝细胞骨架在植物发育中的作用 | 第17-20页 |
·微丝细胞骨架的组成 | 第17页 |
·微丝骨架的基本功能及研究方法 | 第17-19页 |
·微丝骨架在植物发育中的作用 | 第19页 |
·微丝解聚因子 ADF 在植物发育中的作用 | 第19-20页 |
·微丝骨架与生长素之间的关系 | 第20-23页 |
·本实验的目的意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-40页 |
·实验材料 | 第24-26页 |
·植物材料及生长条件 | 第24页 |
·酶与各种生化试剂 | 第24页 |
·菌株与质粒 | 第24页 |
·PCR 引物 | 第24-26页 |
·实验方法 | 第26-40页 |
·拟南芥的种植与培养 | 第26页 |
·拟南芥离体芽的培养 | 第26页 |
·表达载体的构建及其转化拟南芥 | 第26-33页 |
·PCR 扩增 | 第26-27页 |
·连接反应 | 第27页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第27-28页 |
·碱法小量质粒 DNA 的提取 | 第28-29页 |
·质粒 DNA 的酶切鉴定 | 第29页 |
·DNA 序列测定 | 第29页 |
·诱导型 artificial microRNA 沉默 ADF 基因表达载体的构建 | 第29-32页 |
·农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备与转化 | 第32-33页 |
·拟南芥的转化 | 第33页 |
·植物组织总 RNA 的提取与纯化 | 第33-34页 |
·Trizol 法提取总 RNA | 第33-34页 |
·RNA 中基因组 DNA 的去除 | 第34页 |
·反转录 cDNA 第一链的合成 | 第34-35页 |
·实时定量 PCR | 第35-36页 |
·植物基因组 DNA 的提取 | 第36页 |
·植物基因组 DNA 的纯化 | 第36-37页 |
·转基因植物 GUS 组织化学染色分析 | 第37页 |
·冰冻切片的制备 | 第37-38页 |
·样品固定 | 第37-38页 |
·冰冻包埋 | 第38页 |
·回温处理 | 第38页 |
·切片 | 第38页 |
·展片 | 第38页 |
·封片及观察 | 第38页 |
·共聚焦显微镜观察和图像处理 | 第38-40页 |
3 结果与分析 | 第40-57页 |
·芽再生中干细胞的分化伴随着微丝骨架的动态解聚 | 第40-41页 |
·抑制微丝解聚影响芽的再生及干细胞的分化 | 第41-46页 |
·抑制微丝解聚影响芽的再生 | 第41-43页 |
·抑制微丝解聚影响干细胞的分化 | 第43-45页 |
·抑制微丝解聚影响愈伤组织中生长素的极性运输 | 第45-46页 |
·微丝解聚因子 ADF 在芽再生过程中的作用 | 第46-57页 |
·芽再生过程中 ADF 基因表达水平的变化 | 第46-47页 |
·抑制多个微丝解聚因子表达的转基因植株的获得 | 第47-49页 |
·抑制微丝解聚因子的表达影响芽的再生及干细胞的分化 | 第49-51页 |
·抑制微丝解聚因子的表达影响芽的再生 | 第49-50页 |
·抑制微丝解聚因子的表达影响干细胞的分化 | 第50-51页 |
·抑制微丝解聚因子的表达影响干细胞分化过程中微丝骨架的动态变化 | 第51-53页 |
·抑制微丝解聚因子的表达影响愈伤组织中生长素的极性运输和极性分布 | 第53-57页 |
·抑制微丝解聚因子的表达影响生长素的极性运输 | 第53-55页 |
·抑制微丝解聚因子的表达影响生长素的极性分布 | 第55-57页 |
4 讨论 | 第57-59页 |
5 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-67页 |
附录 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |