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芽再生过程中微丝骨架通过调节生长素的极性运输影响干细胞的再生

中文摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-24页
   ·植物芽的再生第12-17页
     ·芽再生体系的建立第12-13页
     ·芽再生过程中干细胞的重新形成第13-14页
     ·生长素在芽再生过程中的作用第14-17页
       ·生长素在植物发育中的作用第14-15页
       ·生长素的极性运输第15-16页
       ·生长素在芽再生过程中的作用第16-17页
   ·微丝细胞骨架在植物发育中的作用第17-20页
     ·微丝细胞骨架的组成第17页
     ·微丝骨架的基本功能及研究方法第17-19页
     ·微丝骨架在植物发育中的作用第19页
     ·微丝解聚因子 ADF 在植物发育中的作用第19-20页
   ·微丝骨架与生长素之间的关系第20-23页
   ·本实验的目的意义第23-24页
2 材料与方法第24-40页
   ·实验材料第24-26页
     ·植物材料及生长条件第24页
     ·酶与各种生化试剂第24页
     ·菌株与质粒第24页
     ·PCR 引物第24-26页
   ·实验方法第26-40页
     ·拟南芥的种植与培养第26页
     ·拟南芥离体芽的培养第26页
     ·表达载体的构建及其转化拟南芥第26-33页
       ·PCR 扩增第26-27页
       ·连接反应第27页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化第27-28页
       ·碱法小量质粒 DNA 的提取第28-29页
       ·质粒 DNA 的酶切鉴定第29页
       ·DNA 序列测定第29页
       ·诱导型 artificial microRNA 沉默 ADF 基因表达载体的构建第29-32页
       ·农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备与转化第32-33页
       ·拟南芥的转化第33页
     ·植物组织总 RNA 的提取与纯化第33-34页
       ·Trizol 法提取总 RNA第33-34页
       ·RNA 中基因组 DNA 的去除第34页
     ·反转录 cDNA 第一链的合成第34-35页
     ·实时定量 PCR第35-36页
     ·植物基因组 DNA 的提取第36页
     ·植物基因组 DNA 的纯化第36-37页
     ·转基因植物 GUS 组织化学染色分析第37页
     ·冰冻切片的制备第37-38页
       ·样品固定第37-38页
       ·冰冻包埋第38页
       ·回温处理第38页
       ·切片第38页
       ·展片第38页
       ·封片及观察第38页
     ·共聚焦显微镜观察和图像处理第38-40页
3 结果与分析第40-57页
   ·芽再生中干细胞的分化伴随着微丝骨架的动态解聚第40-41页
   ·抑制微丝解聚影响芽的再生及干细胞的分化第41-46页
     ·抑制微丝解聚影响芽的再生第41-43页
     ·抑制微丝解聚影响干细胞的分化第43-45页
     ·抑制微丝解聚影响愈伤组织中生长素的极性运输第45-46页
   ·微丝解聚因子 ADF 在芽再生过程中的作用第46-57页
     ·芽再生过程中 ADF 基因表达水平的变化第46-47页
     ·抑制多个微丝解聚因子表达的转基因植株的获得第47-49页
     ·抑制微丝解聚因子的表达影响芽的再生及干细胞的分化第49-51页
       ·抑制微丝解聚因子的表达影响芽的再生第49-50页
       ·抑制微丝解聚因子的表达影响干细胞的分化第50-51页
     ·抑制微丝解聚因子的表达影响干细胞分化过程中微丝骨架的动态变化第51-53页
     ·抑制微丝解聚因子的表达影响愈伤组织中生长素的极性运输和极性分布第53-57页
       ·抑制微丝解聚因子的表达影响生长素的极性运输第53-55页
       ·抑制微丝解聚因子的表达影响生长素的极性分布第55-57页
4 讨论第57-59页
5 结论第59-60页
参考文献第60-67页
附录第67-68页
致谢第68页

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