| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 前言 | 第11-16页 |
| 材料 | 第16-21页 |
| ·牛瑟氏泰勒虫血液和血清样本 | 第16页 |
| ·载体、菌种和主要试剂 | 第16页 |
| ·实验动物 | 第16页 |
| ·试验所需溶液配制 | 第16-19页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳所用试剂 | 第16-17页 |
| ·载体构建所用试剂 | 第17页 |
| ·SDS-PAGE电泳试剂 | 第17-18页 |
| ·Western-blot用试剂 | 第18页 |
| ·间接ELISA用试剂 | 第18-19页 |
| ·分离BALB/c小鼠脾淋巴细胞所需溶液 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·引物的设计与合成 | 第19-21页 |
| 方法 | 第21-30页 |
| ·牛瑟氏泰勒虫p23、p33基因的原核表达 | 第21-25页 |
| ·血液基因组DNA的提取 | 第21页 |
| ·目的基因的扩增 | 第21页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第21-22页 |
| ·p23、p33基因的克隆 | 第22页 |
| ·重组质粒pMD18T-p23、pMD18T-p33的制备 | 第22页 |
| ·重组质粒pMD18T-p23、pMD18T-p33的鉴定 | 第22-23页 |
| ·重组表达质粒pET30a-p23、pET30a-p33的构建 | 第23页 |
| ·重组表达质粒pET30a-p23、pET30a-p33的鉴定 | 第23页 |
| ·重组表达质粒pET30a-p23、pET30a-p33的诱导表达 | 第23-24页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE电泳 | 第24页 |
| ·表达产物的Western blot分析 | 第24-25页 |
| ·重组蛋白纯化 | 第25-26页 |
| ·重组蛋白表达产物存在形式鉴定 | 第25页 |
| ·包涵体的大量纯化 | 第25-26页 |
| ·实验动物免疫 | 第26-28页 |
| ·实验动物最大安全免疫剂量筛选 | 第26-27页 |
| ·实验动物BALB/c小鼠的免疫 | 第27页 |
| ·体液免疫水平的检测 | 第27页 |
| ·应用流式细胞术测定T淋巴细胞亚群 | 第27-28页 |
| ·实验动物BALB/c小鼠联合免疫组的加强免疫 | 第28页 |
| ·免疫小鼠细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4的测定 | 第28页 |
| ·本体动物免疫 | 第28-29页 |
| ·本体动物牛联合免疫组的加强免疫 | 第28-29页 |
| ·体液免疫水平的检测 | 第29页 |
| ·细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4的测定 | 第29页 |
| ·数据分析 | 第29-30页 |
| 结果 | 第30-46页 |
| ·牛瑟氏泰勒虫p23、p33基因的原核表达 | 第30-37页 |
| ·目的基因PCR扩增结果 | 第30页 |
| ·质粒pMD18T-p23、pMD18T-p33的PCR鉴定及双酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·目的基因p23、p33的测序及序列分析 | 第31-32页 |
| ·重组表达质粒pET30a-p23、pET30a-p33的鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组表达质粒pET30a-p23、pET30a-p33诱导条件筛选 | 第33-35页 |
| ·pET30a-p23、pET30a-p33表达产物的Western blot分析 | 第35-36页 |
| ·蛋白存在形式的鉴定 | 第36页 |
| ·重组蛋白表达水平分析 | 第36-37页 |
| ·纯化产物的SDS-PAGE检测 | 第37页 |
| ·实验动物免疫水平的评价 | 第37-42页 |
| ·实验动物最大安全免疫剂量的筛选 | 第37-38页 |
| ·实验动物不同免疫组体液免疫水平的检测 | 第38-39页 |
| ·实验动物不同免疫组细胞因子水平的检测 | 第39-41页 |
| ·免疫BALB/c小鼠T淋巴细胞亚群含量检测 | 第41-42页 |
| ·实验动物BALB/c小鼠联合免疫组的加强免疫效果 | 第42页 |
| ·本体动物免疫水平的评价 | 第42-46页 |
| ·本体动物不同免疫组体液免疫水平的检测 | 第42-43页 |
| ·本体动物不同免疫组细胞因子水平的检测 | 第43-45页 |
| ·实验动物BALB/c小鼠联合免疫组的加强免疫效果 | 第45-46页 |
| 讨论 | 第46-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59-60页 |
| 在读期间发表的论文 | 第60页 |
