摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-24页 |
·RNA 病毒特异性翻译方式 | 第12-18页 |
·真核细胞翻译机制 | 第12-13页 |
·病毒特异性翻译机制存在的意义 | 第13-14页 |
·病毒特异性翻译起始机制 | 第14-17页 |
·特异性翻译的延伸和终止 | 第17页 |
·结语 | 第17-18页 |
·病毒末端结合蛋 VPg 功能研究进展 | 第18-24页 |
·VPg 作为帽子结构类似物参与翻译起始 | 第18-20页 |
·VPg 作为蛋白引物参与病毒复制 | 第20-21页 |
·一些病毒含有多个 VPg | 第21-22页 |
·VPg 的其他功能 | 第22-23页 |
·结语 | 第23-24页 |
第二章 兔出血症病毒VPg蛋白的原核表达及抗体制备 | 第24-30页 |
·材料 | 第24页 |
·菌株、质粒 | 第24页 |
·主要试剂 | 第24页 |
·方法 | 第24-26页 |
·VPg 基因的扩增 | 第24-25页 |
·重组表达质粒的构建与鉴定 | 第25页 |
·VPg 基因的诱导表达 | 第25页 |
·VPg 融合蛋白的纯化 | 第25页 |
·抗 VPg 多克隆抗体的制备 | 第25页 |
·多克隆抗体的特异性检测 | 第25-26页 |
·结果 | 第26-28页 |
·重组表达质粒的鉴定结果 | 第26页 |
·VPg 基因表达条件的优化 | 第26-27页 |
·VPg 重组蛋白的纯化 | 第27-28页 |
·重组蛋白VPg多克隆抗体的制备与检测 | 第28页 |
·讨论 | 第28-29页 |
·小结 | 第29-30页 |
第三章 兔出血症病毒复制子的构建与应用 | 第30-40页 |
·材料 | 第30页 |
·细胞株和菌株 | 第30页 |
·方法 | 第30-33页 |
·质粒构建 | 第30-31页 |
·转染 | 第31-32页 |
·RT-PCR 分析 | 第32页 |
·qRT-PCR 分析 | 第32-33页 |
·生长曲线 | 第33页 |
·间接免疫荧光试验(IFA) | 第33页 |
·荧光素酶活性检测 | 第33页 |
·结果 | 第33-39页 |
·构建并鉴定RHDV复制子 | 第33-37页 |
·qRT-PCR检测复制子mRNA水平 | 第37页 |
·5'NCR,VPg 和 3D 的缺失突变下调了报告基因 fluc 的表达 | 第37页 |
·VPg和5'NCR影响病毒翻译 | 第37-39页 |
·讨论 | 第39页 |
·小结 | 第39-40页 |
结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-46页 |
英文缩略表 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
作者简介 | 第48页 |