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表达萤火虫荧光素酶报告基因的兔出血症病毒复制子的构建与应用

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-12页
第一章 文献综述第12-24页
   ·RNA 病毒特异性翻译方式第12-18页
     ·真核细胞翻译机制第12-13页
     ·病毒特异性翻译机制存在的意义第13-14页
     ·病毒特异性翻译起始机制第14-17页
     ·特异性翻译的延伸和终止第17页
     ·结语第17-18页
   ·病毒末端结合蛋 VPg 功能研究进展第18-24页
     ·VPg 作为帽子结构类似物参与翻译起始第18-20页
     ·VPg 作为蛋白引物参与病毒复制第20-21页
     ·一些病毒含有多个 VPg第21-22页
     ·VPg 的其他功能第22-23页
     ·结语第23-24页
第二章 兔出血症病毒VPg蛋白的原核表达及抗体制备第24-30页
   ·材料第24页
     ·菌株、质粒第24页
     ·主要试剂第24页
   ·方法第24-26页
     ·VPg 基因的扩增第24-25页
     ·重组表达质粒的构建与鉴定第25页
     ·VPg 基因的诱导表达第25页
     ·VPg 融合蛋白的纯化第25页
     ·抗 VPg 多克隆抗体的制备第25页
     ·多克隆抗体的特异性检测第25-26页
   ·结果第26-28页
     ·重组表达质粒的鉴定结果第26页
     ·VPg 基因表达条件的优化第26-27页
     ·VPg 重组蛋白的纯化第27-28页
     ·重组蛋白VPg多克隆抗体的制备与检测第28页
   ·讨论第28-29页
   ·小结第29-30页
第三章 兔出血症病毒复制子的构建与应用第30-40页
   ·材料第30页
     ·细胞株和菌株第30页
   ·方法第30-33页
     ·质粒构建第30-31页
     ·转染第31-32页
     ·RT-PCR 分析第32页
     ·qRT-PCR 分析第32-33页
     ·生长曲线第33页
     ·间接免疫荧光试验(IFA)第33页
     ·荧光素酶活性检测第33页
   ·结果第33-39页
     ·构建并鉴定RHDV复制子第33-37页
     ·qRT-PCR检测复制子mRNA水平第37页
     ·5'NCR,VPg 和 3D 的缺失突变下调了报告基因 fluc 的表达第37页
     ·VPg和5'NCR影响病毒翻译第37-39页
   ·讨论第39页
   ·小结第39-40页
结论第40-41页
参考文献第41-46页
英文缩略表第46-47页
致谢第47-48页
作者简介第48页

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