| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 目录 | 第10-14页 |
| 文献综述 | 第14-24页 |
| 第一章 猪繁殖与呼吸综合征研究进展 | 第14-24页 |
| ·PRRSV 生物学特征 | 第15-19页 |
| ·PRRSV 的分类地位 | 第15页 |
| ·PRRSV 的形态结构 | 第15页 |
| ·PRRSV 的基因组结构 | 第15-16页 |
| ·PRRSV 的非结构蛋白 | 第16-17页 |
| ·PRRSV 的结构蛋白 | 第17-19页 |
| ·GP5 蛋白 | 第17-18页 |
| ·M 蛋白 | 第18页 |
| ·N 蛋白 | 第18页 |
| ·GP2 蛋白 | 第18-19页 |
| ·GP3 蛋白 | 第19页 |
| ·GP4 蛋白 | 第19页 |
| ·PRRSV 免疫学反应 | 第19-20页 |
| ·体液免疫反应 | 第19-20页 |
| ·细胞免疫反应 | 第20页 |
| ·PRRSV 的致病机制 | 第20页 |
| ·PRRSV 的预防和控制 | 第20-21页 |
| ·PRRSV 受体的研究进展 | 第21-23页 |
| ·硫酸乙酰肝素（HS） | 第21页 |
| ·唾液酸粘附素（Sn） | 第21-22页 |
| ·波形蛋白（Vimentin） | 第22页 |
| ·清道夫受体（CD163） | 第22-23页 |
| ·研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 试验研究 | 第24-53页 |
| 第二章 猪 CD163 重组蛋白制备及功能鉴定 | 第24-39页 |
| ·材料 | 第24-27页 |
| ·细胞及 PRRSV 毒株 | 第24-25页 |
| ·实验试剂及耗材 | 第25页 |
| ·载体与感受态 | 第25-26页 |
| ·主要试剂配制 | 第26-27页 |
| ·主要设备及仪器 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-34页 |
| ·PAM 细胞的收集 | 第27-28页 |
| ·PAM 细胞总 RNA 的提取及反转录 | 第28页 |
| ·引物的设计和合成 | 第28页 |
| ·CD163-1 和 CD163-2 PCR 扩增 | 第28-29页 |
| ·PCR 产物的回收及原核表达载体的构建 | 第29页 |
| ·氯化钙法制备感受态细胞(DH5α/BL21) | 第29-30页 |
| ·重组质粒转化感受态细胞 | 第30页 |
| ·重组质粒的提取和双酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第31页 |
| ·SDS-PAGE 蛋白质电泳分析 | 第31页 |
| ·Ni 柱纯化原核表达蛋白 | 第31-32页 |
| ·目的蛋白的 Western blot 鉴定 | 第32页 |
| ·目的蛋白的透析 | 第32页 |
| ·Marc-145 细胞的传代 | 第32-33页 |
| ·PRRSV 的扩繁 | 第33页 |
| ·PRRSV 的 TCID50的测定 | 第33页 |
| ·IFA 检测 CD163-1 和 CD163-2 蛋白结合 Marc-145 细胞 | 第33页 |
| ·IFA 检测 CD163-1 和 CD163-2 蛋白阻断 PRRSV 感染 Marc-145 细胞 | 第33-34页 |
| ·结果 | 第34-37页 |
| ·CD163-1、CD163-2 基因克隆结果 | 第34页 |
| ·CD163-1、CD163-2 重组质粒构建的鉴定 | 第34-35页 |
| ·CD163-1、CD163-2 蛋白原核表达、纯化及鉴定 | 第35页 |
| ·IFA 检测 CD163-1 和 CD163-2 蛋白与 Marc-145 细胞结合 | 第35-36页 |
| ·IFA 检测 CD163-1 和 CD163-2 蛋白阻断 PRRSV 感染 Marc-145 细胞 | 第36-37页 |
| ·讨论与分析 | 第37-38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| 第三章 鼠抗猪 CD163 免疫血清的制备及功能鉴定 | 第39-46页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·小鼠、细胞及 PRRSV 毒株 | 第39-40页 |
| ·实验试剂及耗材 | 第40页 |
| ·主要试剂配制 | 第40页 |
| ·主要设备及仪器 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-42页 |
| ·制备小鼠免疫血清 | 第40-41页 |
| ·间接 ELISA 检测免疫血清的效价 | 第41页 |
| ·IFA 检测 CD163-1、CD163-2 免疫血清结合 Marc-145 细胞 | 第41页 |
| ·IFA 检测 CD163-1、CD163-2 免疫血清阻断 PRRSV 感染 Marc-145 细胞 | 第41-42页 |
| ·结果 | 第42-43页 |
| ·CD163-1、CD163-2 免疫血清效价检测 | 第42页 |
| ·IFA 检测 CD163-1、CD163-2 免疫血清结合 Marc-145 细胞 | 第42-43页 |
| ·IFA 检测 CD163-1、CD163-2 免疫血清阻断 PRRSV 感染 Marc-145 细胞 | 第43页 |
| ·讨论与分析 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-46页 |
| 第四章 鼠抗猪 CD163 单克隆抗体的制备及功能鉴定 | 第46-53页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·细胞及 PRRSV 毒株 | 第46页 |
| ·实验试剂及耗材 | 第46页 |
| ·主要试剂配制 | 第46-47页 |
| ·主要设备及仪器 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-50页 |
| ·骨髓瘤细胞 sp2/0 的培养 | 第47-48页 |
| ·细胞融合 | 第48页 |
| ·阳性细胞亚克隆 | 第48页 |
| ·腹水的制备及纯化 | 第48-49页 |
| ·ELISA 检测 CD163 单克隆抗体的特异性 | 第49页 |
| ·Western-blot 检测 CD163 单克隆抗体的特异性 | 第49页 |
| ·IFA 检测 CD163 单克隆抗体对猪源和猴源 CD163 的识别 | 第49-50页 |
| ·结果 | 第50-51页 |
| ·ELISA 检测 CD163 单克隆抗体特异性 | 第50页 |
| ·Western-blot 检测 CD163 单克隆抗体特异性 | 第50页 |
| ·IFA 检测 CD163 单克隆抗体对猪源和猴源 CD163 的识别 | 第50-51页 |
| ·讨论与分析 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 缩略词 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63-64页 |
