摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-38页 |
引言 | 第15页 |
1. 果树遗传转化的受体系统 | 第15-16页 |
2. 果树遗传转化的方法 | 第16-19页 |
·农杆菌介导法 | 第16-18页 |
·农杆菌介导法在果树遗传转化中的应用 | 第16-17页 |
·影响农杆菌介导遗传转化的因素 | 第17-18页 |
·基因枪法 | 第18页 |
·花粉管通道法 | 第18-19页 |
·体外活体转化法 | 第19页 |
3. 转基因植株的检测 | 第19-20页 |
4. 枇杷转基因研究进展 | 第20-21页 |
5. 单性结实的概念及利用 | 第21-22页 |
6. 基因工程实现枇杷单性结实的途径 | 第22-23页 |
·在子房中表达调节果实发育早期的激素代谢与信号转导的基因诱导单性结实 | 第22页 |
·在控制花器官发育的MADS盒基因中插入转座子诱导单性结实 | 第22-23页 |
·在种子中表达破坏种子发育的基因诱导单性结实 | 第23页 |
7. iaaM基因在单性结实基因工程中的应用 | 第23-24页 |
8. 本研究的目的及意义 | 第24-25页 |
9. 本研究采用的技术路线 | 第25页 |
参考文献 | 第25-38页 |
第二章 枇杷花药胚状体高频再生体系的建立 | 第38-57页 |
摘要 | 第38-39页 |
1. 材料与方法 | 第39-41页 |
·材料 | 第39页 |
·方法 | 第39-41页 |
·枇杷小孢子单核期的确定 | 第39页 |
·不同低温处理对枇杷花药愈伤组织诱导的影响 | 第39页 |
·花药愈伤组织诱导 | 第39-40页 |
·胚状体的诱导 | 第40页 |
·胚状体的增殖 | 第40页 |
·胚状体的萌发成苗 | 第40-41页 |
·再生植株的炼苗移栽 | 第41页 |
2. 结果与分析 | 第41-51页 |
·枇杷小孢子单核期的确定 | 第41-43页 |
·不同低温处理对枇杷花药愈伤组织诱导的影响 | 第43页 |
·花药愈伤组织诱导 | 第43-45页 |
·胚状体的诱导 | 第45-46页 |
·胚状体的增殖 | 第46-47页 |
·胚状体的萌发成苗 | 第47-50页 |
·不同预处理对胚状体萌发的影响 | 第47-49页 |
·基本培养基和蔗糖浓度对胚状体的萌发成苗的影响 | 第49-50页 |
·再生植株的炼苗移栽 | 第50-51页 |
3. 讨论 | 第51-53页 |
·低温处理对枇杷花药愈伤组织诱导的影响 | 第51-52页 |
·激素对枇杷花药培养的影响 | 第52页 |
·枇杷花药胚的成苗 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
第三章 枇杷叶片再生体系的建立 | 第57-75页 |
摘要 | 第57页 |
1. 材料与方法 | 第57-60页 |
·材料 | 第57-58页 |
·方法 | 第58-60页 |
·外植体表面灭菌方法的筛选 | 第58页 |
·最佳取材时间的筛选 | 第58页 |
·愈伤组织的诱导 | 第58页 |
·愈伤组织的继代与增殖 | 第58-59页 |
·愈伤组织的分化 | 第59页 |
·芽苗增殖 | 第59页 |
·壮苗与生根培养 | 第59页 |
·炼苗移栽 | 第59-60页 |
2. 结果与分析 | 第60-68页 |
·外植体表面灭菌方法的筛选 | 第60页 |
·最佳取材时间的筛选 | 第60-61页 |
·愈伤组织的诱导 | 第61-63页 |
·愈伤组织的增殖 | 第63-64页 |
·愈伤组织的分化 | 第64-65页 |
·芽苗的增殖 | 第65-67页 |
·壮苗与生根培养 | 第67-68页 |
·炼苗移栽 | 第68页 |
3. 讨论 | 第68-71页 |
·愈伤组织的诱导 | 第68-69页 |
·愈伤组织的分化 | 第69-70页 |
·外植体的取材部位对不定芽分化的影响 | 第69页 |
·植物生长调节剂对枇杷叶片不定芽分化的影响 | 第69-70页 |
·生根培养 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-75页 |
第四章 根癌农杆菌介导iaaM基因转化枇杷花药胚的研究 | 第75-89页 |
摘要 | 第75-76页 |
1. 材料与方法 | 第76-80页 |
·材料 | 第76-77页 |
·转化受体材料 | 第76页 |
·供试菌株与基因 | 第76-77页 |
·培养基及培养条件 | 第77页 |
·方法 | 第77-79页 |
·农杆菌的活化及工程菌液的制备 | 第77页 |
·卡那霉素选择压的筛选 | 第77页 |
·农杆菌介导遗传转化条件的筛选 | 第77-78页 |
·iaaM对枇杷花药胚的遗传转化及抗性胚状体的萌发 | 第78-79页 |
·转基因花药胚的分子检测 | 第79-80页 |
2. 结果与分析 | 第80-85页 |
·卡那霉素选择压的筛选 | 第80页 |
·预培养时间的筛选 | 第80-81页 |
·农杆菌浸染时间的筛选 | 第81页 |
·共培养时间的确定 | 第81页 |
·乙酰丁香酮浓度的筛选 | 第81-82页 |
·脱菌培养抗菌素的筛选 | 第82-83页 |
·转基因胚状体的分子检测 | 第83-85页 |
·PCR检测 | 第83-84页 |
·PCR-Southern检测 | 第84-85页 |
·转基因胚状体的成苗 | 第85页 |
3. 讨论 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-89页 |
第五章 农杆菌介导iaaM基因导入枇杷叶片愈伤组织的研究 | 第89-102页 |
摘要 | 第89页 |
1. 材料与方法 | 第89-92页 |
·转化受体材料 | 第89-90页 |
·供试菌株与基因 | 第90页 |
·培养基及培养条件 | 第90页 |
·细菌培养基 | 第90页 |
·转化体系培养基 | 第90页 |
·培养条件 | 第90页 |
·方法 | 第90-92页 |
·农杆菌的活化及工程菌液的制备 | 第90页 |
·卡那霉素选择压的筛选 | 第90-91页 |
·农杆菌介导遗传转化条件的筛选 | 第91-92页 |
·叶片愈伤组织的遗传转化 | 第92页 |
·抗性叶片愈伤组织的检测 | 第92页 |
2. 结果与分析 | 第92-98页 |
·叶片愈伤组织对卡那霉素的敏感性 | 第92-93页 |
·预培养时间对枇杷叶片愈伤组织遗传转化的影响 | 第93-94页 |
·浸染时间对枇杷叶片愈伤组织遗传转化的影响 | 第94页 |
·共培养时间对枇杷叶片愈伤组织遗传转化的影响 | 第94页 |
·乙酰丁香酮对枇杷叶片愈伤组织遗传转化的影响 | 第94-95页 |
·头孢霉素对枇杷叶片愈伤组织生长的影响 | 第95页 |
·抗性愈伤组织的筛选与获得 | 第95-97页 |
·抗性愈伤组织的检测 | 第97-98页 |
·PCR检测 | 第97-98页 |
·Southern杂交分析 | 第98页 |
3. 讨论 | 第98-100页 |
参考文献 | 第100-102页 |
第六章 花粉管通道法介导iaaM基因转化枇杷的初步研究 | 第102-112页 |
摘要 | 第102页 |
1. 材料与方法 | 第102-104页 |
·材料 | 第102-103页 |
·受体材料 | 第102-103页 |
·供体 | 第103页 |
·方法 | 第103-104页 |
·质粒的提取 | 第103页 |
·枇杷花粉管通道形成时间确定 | 第103页 |
·转化方法的确定 | 第103-104页 |
·DNA浓度的确定 | 第104页 |
·种子的离体培养 | 第104页 |
·GUS标记基因检测 | 第104页 |
2. 结果与分析 | 第104-108页 |
·枇杷花粉萌发及花粉管生长观察 | 第104-106页 |
·转化方法的确定 | 第106页 |
·适宜DNA浓度的确定 | 第106-108页 |
3. 讨论 | 第108-110页 |
参考文献 | 第110-112页 |
第七章 本文创新点及下一步工作设想 | 第112-114页 |
1. 创新点 | 第112页 |
2. 下一步工作设想 | 第112-114页 |
缩略词表 | 第114-115页 |
致谢 | 第115-116页 |
攻读博士学位期间发表的论文和参加的主要学术活动 | 第116-118页 |