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枇杷高频再生体系的建立及转单性结实iaaM基因的研究

摘要第1-12页
Abstract第12-15页
第一章 文献综述第15-38页
 引言第15页
 1. 果树遗传转化的受体系统第15-16页
 2. 果树遗传转化的方法第16-19页
   ·农杆菌介导法第16-18页
     ·农杆菌介导法在果树遗传转化中的应用第16-17页
     ·影响农杆菌介导遗传转化的因素第17-18页
   ·基因枪法第18页
   ·花粉管通道法第18-19页
   ·体外活体转化法第19页
 3. 转基因植株的检测第19-20页
 4. 枇杷转基因研究进展第20-21页
 5. 单性结实的概念及利用第21-22页
 6. 基因工程实现枇杷单性结实的途径第22-23页
   ·在子房中表达调节果实发育早期的激素代谢与信号转导的基因诱导单性结实第22页
   ·在控制花器官发育的MADS盒基因中插入转座子诱导单性结实第22-23页
   ·在种子中表达破坏种子发育的基因诱导单性结实第23页
 7. iaaM基因在单性结实基因工程中的应用第23-24页
 8. 本研究的目的及意义第24-25页
 9. 本研究采用的技术路线第25页
 参考文献第25-38页
第二章 枇杷花药胚状体高频再生体系的建立第38-57页
 摘要第38-39页
 1. 材料与方法第39-41页
   ·材料第39页
   ·方法第39-41页
     ·枇杷小孢子单核期的确定第39页
     ·不同低温处理对枇杷花药愈伤组织诱导的影响第39页
     ·花药愈伤组织诱导第39-40页
     ·胚状体的诱导第40页
     ·胚状体的增殖第40页
     ·胚状体的萌发成苗第40-41页
     ·再生植株的炼苗移栽第41页
 2. 结果与分析第41-51页
   ·枇杷小孢子单核期的确定第41-43页
   ·不同低温处理对枇杷花药愈伤组织诱导的影响第43页
   ·花药愈伤组织诱导第43-45页
   ·胚状体的诱导第45-46页
   ·胚状体的增殖第46-47页
   ·胚状体的萌发成苗第47-50页
     ·不同预处理对胚状体萌发的影响第47-49页
     ·基本培养基和蔗糖浓度对胚状体的萌发成苗的影响第49-50页
   ·再生植株的炼苗移栽第50-51页
 3. 讨论第51-53页
   ·低温处理对枇杷花药愈伤组织诱导的影响第51-52页
   ·激素对枇杷花药培养的影响第52页
   ·枇杷花药胚的成苗第52-53页
 参考文献第53-57页
第三章 枇杷叶片再生体系的建立第57-75页
 摘要第57页
 1. 材料与方法第57-60页
   ·材料第57-58页
   ·方法第58-60页
     ·外植体表面灭菌方法的筛选第58页
     ·最佳取材时间的筛选第58页
     ·愈伤组织的诱导第58页
     ·愈伤组织的继代与增殖第58-59页
     ·愈伤组织的分化第59页
     ·芽苗增殖第59页
     ·壮苗与生根培养第59页
     ·炼苗移栽第59-60页
 2. 结果与分析第60-68页
   ·外植体表面灭菌方法的筛选第60页
   ·最佳取材时间的筛选第60-61页
   ·愈伤组织的诱导第61-63页
   ·愈伤组织的增殖第63-64页
   ·愈伤组织的分化第64-65页
   ·芽苗的增殖第65-67页
   ·壮苗与生根培养第67-68页
   ·炼苗移栽第68页
 3. 讨论第68-71页
   ·愈伤组织的诱导第68-69页
   ·愈伤组织的分化第69-70页
     ·外植体的取材部位对不定芽分化的影响第69页
     ·植物生长调节剂对枇杷叶片不定芽分化的影响第69-70页
   ·生根培养第70-71页
 参考文献第71-75页
第四章 根癌农杆菌介导iaaM基因转化枇杷花药胚的研究第75-89页
 摘要第75-76页
 1. 材料与方法第76-80页
   ·材料第76-77页
     ·转化受体材料第76页
     ·供试菌株与基因第76-77页
     ·培养基及培养条件第77页
   ·方法第77-79页
     ·农杆菌的活化及工程菌液的制备第77页
     ·卡那霉素选择压的筛选第77页
     ·农杆菌介导遗传转化条件的筛选第77-78页
     ·iaaM对枇杷花药胚的遗传转化及抗性胚状体的萌发第78-79页
     ·转基因花药胚的分子检测第79-80页
 2. 结果与分析第80-85页
   ·卡那霉素选择压的筛选第80页
   ·预培养时间的筛选第80-81页
   ·农杆菌浸染时间的筛选第81页
   ·共培养时间的确定第81页
   ·乙酰丁香酮浓度的筛选第81-82页
   ·脱菌培养抗菌素的筛选第82-83页
   ·转基因胚状体的分子检测第83-85页
     ·PCR检测第83-84页
     ·PCR-Southern检测第84-85页
   ·转基因胚状体的成苗第85页
 3. 讨论第85-86页
 参考文献第86-89页
第五章 农杆菌介导iaaM基因导入枇杷叶片愈伤组织的研究第89-102页
 摘要第89页
 1. 材料与方法第89-92页
   ·转化受体材料第89-90页
   ·供试菌株与基因第90页
   ·培养基及培养条件第90页
     ·细菌培养基第90页
     ·转化体系培养基第90页
     ·培养条件第90页
   ·方法第90-92页
     ·农杆菌的活化及工程菌液的制备第90页
     ·卡那霉素选择压的筛选第90-91页
     ·农杆菌介导遗传转化条件的筛选第91-92页
     ·叶片愈伤组织的遗传转化第92页
     ·抗性叶片愈伤组织的检测第92页
 2. 结果与分析第92-98页
   ·叶片愈伤组织对卡那霉素的敏感性第92-93页
   ·预培养时间对枇杷叶片愈伤组织遗传转化的影响第93-94页
   ·浸染时间对枇杷叶片愈伤组织遗传转化的影响第94页
   ·共培养时间对枇杷叶片愈伤组织遗传转化的影响第94页
   ·乙酰丁香酮对枇杷叶片愈伤组织遗传转化的影响第94-95页
   ·头孢霉素对枇杷叶片愈伤组织生长的影响第95页
   ·抗性愈伤组织的筛选与获得第95-97页
   ·抗性愈伤组织的检测第97-98页
     ·PCR检测第97-98页
     ·Southern杂交分析第98页
 3. 讨论第98-100页
 参考文献第100-102页
第六章 花粉管通道法介导iaaM基因转化枇杷的初步研究第102-112页
 摘要第102页
 1. 材料与方法第102-104页
   ·材料第102-103页
     ·受体材料第102-103页
     ·供体第103页
   ·方法第103-104页
     ·质粒的提取第103页
     ·枇杷花粉管通道形成时间确定第103页
     ·转化方法的确定第103-104页
     ·DNA浓度的确定第104页
     ·种子的离体培养第104页
     ·GUS标记基因检测第104页
 2. 结果与分析第104-108页
   ·枇杷花粉萌发及花粉管生长观察第104-106页
   ·转化方法的确定第106页
   ·适宜DNA浓度的确定第106-108页
 3. 讨论第108-110页
 参考文献第110-112页
第七章 本文创新点及下一步工作设想第112-114页
 1. 创新点第112页
 2. 下一步工作设想第112-114页
缩略词表第114-115页
致谢第115-116页
攻读博士学位期间发表的论文和参加的主要学术活动第116-118页

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