| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 1 绪论 | 第14-32页 |
| ·β-内酰胺类抗生素的作用机理 | 第14-15页 |
| ·β-内酰胺类抗生素 | 第14页 |
| ·β-内酰胺类抗生素的作用机理 | 第14-15页 |
| ·肽聚糖的合成与水解 | 第15-21页 |
| ·肽聚糖的生物合成 | 第16-18页 |
| ·青霉素结合蛋白(PBPs) | 第18-20页 |
| ·肽聚糖的更新与循环 | 第20-21页 |
| ·细菌对抗β-内酰胺类抗生素的方式 | 第21-28页 |
| ·β-内酰胺酶的产生 | 第22-26页 |
| ·外膜通透性的变化 | 第26-27页 |
| ·靶蛋白的修饰和改变 | 第27-28页 |
| ·药物外排泵的表达 | 第28页 |
| ·本研究的背景、主要内容及意义 | 第28-32页 |
| 2 S. oneidensis中blaA的表达水平与氨苄青霉素引发的细胞裂解相关 | 第32-54页 |
| ·材料与方法 | 第33-37页 |
| ·供试菌株、质粒和培养条件 | 第33页 |
| ·框内缺失突变株的构建和回补 | 第33-34页 |
| ·S. oneidensis生长的测定和生物被膜的形成 | 第34-35页 |
| ·抗生素敏感试验 | 第35页 |
| ·细胞形态学观察 | 第35页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性检测 | 第35-36页 |
| ·β-内酰胺酶活性检测 | 第36页 |
| ·qRT-PCR分析 | 第36页 |
| ·化学分析 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-51页 |
| ·小分子天然产物对S. oneidensis生物被膜形成的影响 | 第37-38页 |
| ·抗生素对S. oneidensis生物被膜形成的影响 | 第38-41页 |
| ·低于抑制浓度的氨苄青霉素诱导细胞裂解 | 第41-44页 |
| ·S. oneidensis中的β-内酰胺酶 | 第44-47页 |
| ·高浓度氨苄青霉素诱导BlaA的表达 | 第47-48页 |
| ·S. oneidensis中DacA(PBP5)影响BlaA的表达 | 第48-51页 |
| ·讨论 | 第51-54页 |
| ·BlaA是S. oneidensis中最主要的β-内酰胺酶 | 第51-52页 |
| ·PBP5在S. oneidensis对抗氨苄青霉素时发挥重要作用 | 第52-54页 |
| 3 金属离子对S. oneidensis氨苄青霉素抗性的影响 | 第54-67页 |
| ·材料与方法 | 第55-56页 |
| ·供试菌株、质粒和培养条件 | 第55-56页 |
| ·细菌生长的测定 | 第56页 |
| ·抗生素敏感性实验 | 第56页 |
| ·框内缺失突变株的构建与回补 | 第56页 |
| ·qRT-PCR分析 | 第56页 |
| ·细胞形态学观察 | 第56页 |
| ·β-半乳糖苷酶的测定 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-64页 |
| ·EDTA加剧S. oneidensis在氨苄青霉素中的裂解 | 第56-57页 |
| ·金属离子对EDTA和氨苄青霉素诱导细胞裂解的影响 | 第57-58页 |
| ·金属离子对S. oneidensis在氨苄青霉素中裂解的影响 | 第58-60页 |
| ·金属离子提高S. oneidensis对氨苄青霉素的抗性 | 第60-61页 |
| ·金属离子引起的氨苄青霉素抗性与blaA基因表达量无关 | 第61-62页 |
| ·外膜孔蛋白对金属离子引起的氨苄青霉素抗性的影响 | 第62-64页 |
| ·金属离子影响细菌对不同抗生素的敏感性 | 第64页 |
| ·讨论 | 第64-67页 |
| ·金属离子影响S. oneidensis对多种抗生素的抗性 | 第64-65页 |
| ·Zn~(2+)提高S. oneidensis对氨苄青霉素抗性的分子机制 | 第65-67页 |
| 4 S. oneidensis中blaA基因表达的调控 | 第67-90页 |
| ·材料与方法 | 第68-72页 |
| ·供试菌株、质粒和培养条件 | 第68-71页 |
| ·框内缺失、合成致死突变株的构建与回补 | 第71页 |
| ·WT/P_(blaA)-lacZ菌株的构建 | 第71页 |
| ·pFAC质粒的改造和转座子突变 | 第71-72页 |
| ·随机引物PCR(AP-PCR) | 第72页 |
| ·S. oneidensis生长的测定 | 第72页 |
| ·抗生素敏感性实验 | 第72页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性检测 | 第72页 |
| ·结果与分析 | 第72-85页 |
| ·肽聚糖循环对BlaA表达的影响 | 第72-73页 |
| ·P_(blaA)与lacZ融合菌株的构建 | 第73-75页 |
| ·利用转座子技术筛选P_(blaA)活性提高的突变株 | 第75-76页 |
| ·转座子插入位点的鉴定 | 第76-79页 |
| ·HMW PBPs对氨苄青霉素抗性的影响 | 第79-82页 |
| ·LppC(LpoA)和S01060(LpoB)分别是与PBP1a和PBP1b形成复合体的外膜脂蛋白 | 第82-84页 |
| ·PBP1a缺失引起的BlaA高表达不依赖于AmpG | 第84-85页 |
| ·讨论 | 第85-90页 |
| ·S. oneidensis中BlaA的调控模式与AmpC显著不同 | 第85-87页 |
| ·PBP1a-LpoA和PBP1b-LpoB复合体的功能存在明显的差异 | 第87-88页 |
| ·PBP1a失活导致BlaA组成型高表达的机制 | 第88-90页 |
| 5 论文总结 | 第90-94页 |
| ·主要研究结论 | 第90-91页 |
| ·创新之处 | 第91-92页 |
| ·不足及展望 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-110页 |
| 附录 | 第110-117页 |
| 作者简介 | 第117页 |
