| 目录 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 英文缩写词 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 技术路线 | 第14-15页 |
| 材料与方法 | 第15-52页 |
| 一. 实验材料 | 第15-30页 |
| 1 组织标本 | 第15-16页 |
| 2 细胞系 | 第16页 |
| 3 质粒 | 第16-17页 |
| 4 菌种 | 第17页 |
| 5 实验动物 | 第17页 |
| 6 主要试剂 | 第17-19页 |
| 7 MIR-615-5P基因信息、引物,MICRORNA模拟物及原位杂交探针 | 第19-21页 |
| 8 主要实验设备 | 第21-22页 |
| 9 常用溶液配制 | 第22-27页 |
| 10 网络资源及软件 | 第27-30页 |
| 二. 实验方法 | 第30-52页 |
| 1 细胞培养 | 第30-31页 |
| 2 从细胞或组织中RNA提取和REAL-TIME PCR | 第31-33页 |
| 3 HE染色、免疫组化、免疫荧光染色 | 第33-35页 |
| 4 LNA-ISH(锁核苷酸-原位杂交) | 第35-36页 |
| 5 提取细胞总蛋白和免疫印迹 | 第36-38页 |
| 6. HSA-MIR-615-5P体外对胰腺癌细胞增殖、凋亡能力的影响 | 第38-41页 |
| 7 HSA-MIR-615-5P体外对胰腺癌细胞侵袭、迁移能力的影响 | 第41-42页 |
| 8 HSA-MIR-615过表达稳定细胞株的构建 | 第42-45页 |
| 9 HSA-MIR-615-5P体内对胰腺癌细胞增殖、转移能力的影响 | 第45-47页 |
| 10 靶基因荧光素报告基因3'UTR的构建 | 第47-51页 |
| 11 双荧光素酶报告基因实验 | 第51页 |
| 12 统计方法 | 第51-52页 |
| 实验结果 | 第52-79页 |
| 第一部分 在胰腺癌中初步筛选具有功能的MICRORNA | 第52-54页 |
| 1 CCK-8增殖实验检测候选MIRNA对胰腺癌细胞系生长情况的影响 | 第52-53页 |
| 2 HSA-MIR-615基因背景 | 第53页 |
| 3 CCK-8检测HSA-MIR-615-3P、HSA-MIR-615-5P类似物和抑制剂对胰腺癌细胞系生长情况的影响(生长曲线的检测) | 第53-54页 |
| 第二部分 HSA-MIR-615-5P在胰腺导管腺癌组织中的表达检测 | 第54-57页 |
| 1 HSA-MIR-615-5P在胰腺癌组织中表达的量化分析 | 第54-55页 |
| 2 HSA-MIR-615-5P在胰腺癌组织中表达的定位、定性分析 | 第55-57页 |
| 第三部分 HSA-MIR-615-5P体外功能验证 | 第57-62页 |
| 1 HSA-MIR-615-5P对胰腺癌细胞系增殖表型的影响：增殖,细胞周期,凋亡以及克隆形成能力 | 第57-61页 |
| 2 HSA-MIR-615-5P对胰腺癌细胞系运动表型的影响：侵袭和迁移能力 | 第61-62页 |
| 第四部分 建立稳转细胞系,验证HSA-MIR-615-5P体内功能 | 第62-68页 |
| 1 稳转细胞系建立 | 第62-65页 |
| 2 MIR-615体内功能验证 | 第65-68页 |
| 第五部分 靶基因预测及实验初步验证 | 第68-75页 |
| 1 HSA-MIR-615的靶点预测以及信号通路富集分析 | 第68-70页 |
| 2 胰腺癌组织中HSA-MIR-615-5P和IGF2、AKT2及NFKB2蛋白的表达分析 | 第70-72页 |
| 3 HSA-MIR-615-5P对MAPK信号通路的影响 | 第72页 |
| 4 HSA-MIR-615-5P可以降低胰腺癌细胞系中靶蛋白的表达 | 第72-73页 |
| 5 HSA-MIR-615-5P对靶基因的直接调节作用 | 第73-75页 |
| 第六部分 HSA-MIR-615-5P的临床病理特征分析 | 第75-79页 |
| 1 HSA-MIR-615-5P在胰腺癌中的表达和临床特征分析 | 第75-76页 |
| 2 HSA-MIR-615-5P在胰腺癌中的表达和病理特征分析 | 第76-77页 |
| 3 HSA-MIR-615-5P在胰腺癌组织中的表达与预后 | 第77-79页 |
| 讨论 | 第79-86页 |
| 一. 胰腺癌中MIRNA表达谱研究现状和HSA-MIR-615-5P的表达 | 第79-81页 |
| 二. HSA-MIR-615-5P的体外发挥抑癌基因的作用 | 第81-82页 |
| 三. MIR-615稳转系的建立及体内功能实验证明MIR-615对胰腺癌具有抑制作用 | 第82-83页 |
| 四. HSA-MIR-615-5P通过影响细胞内信号通路对胰腺癌细胞产生影响 | 第83-84页 |
| 五. HSA-MIR-615-5P可直接靶向IGF2、NFKB2和AKT2而影响胰腺癌的进展 | 第84页 |
| 六 HSA-MIR-615-5P与临床病理的联系 | 第84-85页 |
| 七. 本研究需要进一步阐述的问题 | 第85-86页 |
| 小结 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-94页 |
| 文献综述 MALD-TOF-IMS质谱成像技术在肿瘤病理诊断中的研究进展 | 第94-102页 |
| 摘要 | 第94页 |
| ABSTRACT | 第94页 |
| 前言 | 第94-95页 |
| 1. 肿瘤蛋白质组学 | 第95页 |
| 2 MALDI-TOF-IMS技术原理 | 第95-96页 |
| 3 MALDI-TOF-MS研究发展过程 | 第96-97页 |
| 4 MALDI-TOF-IMS在肿瘤诊断中的研究 | 第97-98页 |
| 展望 | 第98页 |
| 参考文献 | 第98-102页 |
| 附录 | 第102-112页 |
| 基金资助 | 第112-113页 |
| 个人简历 | 第113-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
