| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-34页 |
| ·蛋白质折叠 | 第12-16页 |
| ·蛋白质折叠研究的概况 | 第12-13页 |
| ·蛋白质的体内外折叠 | 第13-14页 |
| ·蛋白质的变性与去折叠 | 第14页 |
| ·蛋白质折叠的研究方法和技术手段 | 第14-16页 |
| ·蛋白质的错误折叠与疾病 | 第16页 |
| ·大分子拥挤体系 | 第16-20页 |
| ·大分子拥挤体系基本原理 | 第16-17页 |
| ·溶质大小与排斥体积效应 | 第17页 |
| ·拥挤体系对反应平衡的影响 | 第17-19页 |
| ·拥挤体系对反应速率的影响 | 第19页 |
| ·拥挤体系的实际应用 | 第19-20页 |
| ·渗透剂与蛋白质折叠 | 第20-27页 |
| ·渗透剂对酶的功能和结构的协同作用 | 第21-22页 |
| ·渗透剂的对抗功能 | 第22-23页 |
| ·渗透剂维持蛋白稳定性的机制 | 第23页 |
| ·蛋白与渗透剂相互作用的理论模型 | 第23-24页 |
| ·不同渗透剂间相互作用的分子动力学模拟 | 第24-25页 |
| ·渗透剂对蛋白折叠中间体和折叠途径的影响 | 第25-27页 |
| ·肌酸激酶的研究概述 | 第27-31页 |
| ·肌酸激酶概述 | 第27-28页 |
| ·肌酸激酶的折叠 | 第28-29页 |
| ·肌酸激酶与疾病 | 第29页 |
| ·人脑型肌酸激酶 | 第29-31页 |
| ·本论文选题依据和研究内容 | 第31-34页 |
| ·选题依据与意义 | 第31-32页 |
| ·研究目的与意义 | 第32-33页 |
| ·研究内容 | 第33-34页 |
| 2 大分子拥挤体系对重组人脑型肌酸激酶去折叠的影响 | 第34-51页 |
| ·引言 | 第34页 |
| ·实验材料与方法 | 第34-37页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第35页 |
| ·人脑型肌酸激酶的分离与纯化 | 第35-36页 |
| ·低浓度盐酸胍诱导的rHBCK去折叠 | 第36页 |
| ·rHBCK酶活力检测 | 第36页 |
| ·rHBCK去折叠的动力学参数测定 | 第36页 |
| ·rHBCK内源荧光光谱的测定 | 第36-37页 |
| ·相图的绘制 | 第37页 |
| ·实验结果 | 第37-47页 |
| ·rHBCK的分离与纯化 | 第37-38页 |
| ·大分子拥挤试剂对天然rHBCK活性和结构的影响 | 第38-39页 |
| ·单一大分子拥挤体系对GdnHCl诱导的rHBCK去折叠的影响 | 第39-42页 |
| ·混合大分子拥挤体系对GdnHCl诱导的rHBCK去折叠的影响 | 第42-44页 |
| ·大分子拥挤试剂对rHBCK去折叠内源荧光光谱的影响 | 第44-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| ·本章小结 | 第49-51页 |
| 3 大分子拥挤体系对重组人脑型肌酸激酶重折叠的影响 | 第51-67页 |
| ·引言 | 第51-52页 |
| ·实验材料与方法 | 第52-53页 |
| ·实验材料 | 第52页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第52页 |
| ·人脑型肌酸激酶的分离与纯化 | 第52页 |
| ·rHBCK的变性与复性 | 第52页 |
| ·酶活性与聚沉的测定 | 第52-53页 |
| ·rHBCK重折叠速率的测定 | 第53页 |
| ·实验结果 | 第53-63页 |
| ·单一大分子拥挤体系对rHBCK重折叠的影响 | 第53-55页 |
| ·混合大分子拥挤体系对rHBCK重折叠的影响 | 第55-56页 |
| ·大分子拥挤体系对rHBCK重折叠动力学的影响 | 第56-60页 |
| ·大分子拥挤体系对rHBCK重折叠过程中聚沉的影响 | 第60-63页 |
| ·讨论 | 第63-66页 |
| ·本章小结 | 第66-67页 |
| 4 rHBCK在含有渗透剂的大分子拥挤体系中的去折叠机制 | 第67-87页 |
| ·引言 | 第67-68页 |
| ·实验材料与方法 | 第68-69页 |
| ·实验材料 | 第68页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第68页 |
| ·人脑型肌酸激酶的分离与纯化 | 第68页 |
| ·低浓度盐酸胍诱导的rHBCK去折叠 | 第68页 |
| ·rHBCK酶活力检测 | 第68页 |
| ·rHBCK内源荧光光谱的测定 | 第68-69页 |
| ·rHBCK去折叠的动力学参数测定 | 第69页 |
| ·rHBCK与盐酸胍和渗透剂间的分子对接模拟 | 第69页 |
| ·实验结果 | 第69-83页 |
| ·不同渗透剂对天然rHBCK酶活的影响 | 第69-70页 |
| ·大分子拥挤体系中渗透剂对rHBCK变性的影响 | 第70-71页 |
| ·两种体系下渗透剂对rHBCK去折叠动力学的影响 | 第71-75页 |
| ·两种体系下渗透剂对rHBCK内源荧光光谱的影响 | 第75-78页 |
| ·渗透剂和变性剂GdnHCl与rHBCK的分子对接模拟 | 第78-83页 |
| ·讨论 | 第83-86页 |
| ·本章小结 | 第86-87页 |
| 5 rHBCK在含有渗透剂的大分子拥挤体系中的重折叠机制 | 第87-106页 |
| ·引言 | 第87-88页 |
| ·实验材料与方法 | 第88-89页 |
| ·实验材料 | 第88页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第88页 |
| ·人脑型肌酸激酶的分离与纯化 | 第88页 |
| ·完全变性rHBCK的重折叠 | 第88页 |
| ·酶活性与聚沉的测定 | 第88-89页 |
| ·rHBCK重折叠速率的测定 | 第89页 |
| ·实验结果 | 第89-101页 |
| ·不同的渗透剂对天然rHBCK酶活的影响 | 第89页 |
| ·不同的渗透剂对rHBCK复性的影响 | 第89-92页 |
| ·两种体系下渗透剂对rHBCK重折叠动力学的影响 | 第92-98页 |
| ·两种体系下渗透剂对rHBCK重折叠过程中聚沉的影响 | 第98-101页 |
| ·讨论 | 第101-105页 |
| ·本章小结 | 第105-106页 |
| 6 结论与展望 | 第106-108页 |
| ·结论 | 第106-107页 |
| ·展望 | 第107-108页 |
| 创新点摘要 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-123页 |
| 附录A 缩略词 | 第123-124页 |
| 附录B 常用仪器一览表 | 第124-125页 |
| 附录C 常用试剂一览表 | 第125-126页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文情况 | 第126-127页 |
| 致谢 | 第127-128页 |
| 作者简介 | 第128-129页 |
