| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 1 酵母絮凝研究进展 | 第14-30页 |
| ·酵母絮凝及影响因素 | 第14-18页 |
| ·酵母絮凝 | 第14-15页 |
| ·酵母絮凝的分子基础 | 第15-16页 |
| ·影响酵母絮凝的理化因素 | 第16-18页 |
| ·絮凝酵母与燃料乙醇生产 | 第18-19页 |
| ·燃料乙醇生产节能技术 | 第19页 |
| ·木质纤维素生产燃料乙醇 | 第19页 |
| ·絮凝酵母在燃料乙醇生产中的应用 | 第19页 |
| ·酵母絮凝基因及其功能 | 第19-28页 |
| ·酵母絮凝基因 | 第19-22页 |
| ·絮凝基因的结构及功能 | 第22-25页 |
| ·絮凝基因的克隆表达 | 第25-27页 |
| ·絮凝基因的调控 | 第27-28页 |
| ·论文的选题依据和研究内容 | 第28-30页 |
| 2 絮凝酵母SPSC01基因组文库的构建及絮凝基因FLO1的分离 | 第30-48页 |
| ·引言 | 第30页 |
| ·材料与方法 | 第30-39页 |
| ·菌株 | 第30页 |
| ·质粒 | 第30-31页 |
| ·试剂及溶液 | 第31-32页 |
| ·培养基 | 第32页 |
| ·培养方法 | 第32页 |
| ·碱裂解法提取质粒 | 第32-33页 |
| ·构建基因组文库 | 第33-36页 |
| ·基因组文库的筛选 | 第36-39页 |
| ·絮凝基因FLO1的序列分析 | 第39页 |
| ·结果与讨论 | 第39-47页 |
| ·高质量基因组DNA插入片段的获得 | 第39-42页 |
| ·文库的品质鉴定 | 第42-43页 |
| ·基因组文库的保存 | 第43页 |
| ·絮凝基因FLO1的筛选 | 第43-44页 |
| ·SPSC01 FLO1基因的序列分析 | 第44-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 3 絮凝酵母SPSC01絮凝基因FLO1的敲除和表达 | 第48-71页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·材料与方法 | 第48-59页 |
| ·菌株 | 第48-49页 |
| ·质粒 | 第49页 |
| ·试剂及溶液 | 第49页 |
| ·培养基 | 第49页 |
| ·培养方法 | 第49-50页 |
| ·酵母菌G418抗性分析 | 第50页 |
| ·酵母基因组DNA的提取 | 第50页 |
| ·E. coli DH5α感受态细胞的制备和转化 | 第50-51页 |
| ·构建基因敲除组件 | 第51-52页 |
| ·构建整合表达载体 | 第52-56页 |
| ·酵母电感受态细胞的制备和转化 | 第56-57页 |
| ·酵母转化子的验证 | 第57-59页 |
| ·结果与讨论 | 第59-70页 |
| ·确定G418的筛选浓度 | 第59页 |
| ·絮凝酵母SPSC01 FLO1基因的敲除 | 第59-63页 |
| ·絮凝酵母SPSC01 FLO1基因的表达 | 第63-70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| 4 絮凝酵母SPSC01絮凝基因FLO9、FLO10和FLO11的克隆表达 | 第71-95页 |
| ·引言 | 第71页 |
| ·材料与方法 | 第71-75页 |
| ·菌株 | 第71页 |
| ·质粒 | 第71-72页 |
| ·试剂及溶液 | 第72页 |
| ·培养基 | 第72页 |
| ·培养方法 | 第72页 |
| ·构建整合表达载体 | 第72-74页 |
| ·电击转化酵母细胞 | 第74页 |
| ·酵母转化子的验证 | 第74-75页 |
| ·结果与讨论 | 第75-93页 |
| ·絮凝酵母SPSC01 FLO9基因的表达 | 第75-81页 |
| ·絮凝酵母SPSC01 FLO10基因的表达 | 第81-87页 |
| ·絮凝酵母SPSC01 FLO11基因的表达 | 第87-93页 |
| ·小结 | 第93-95页 |
| 5 絮凝酵母SPSC01絮凝基因转化子的发酵实验 | 第95-110页 |
| ·引言 | 第95页 |
| ·材料与方法 | 第95-96页 |
| ·菌株 | 第95页 |
| ·试剂及溶液 | 第95页 |
| ·培养基 | 第95页 |
| ·培养与发酵方法 | 第95-96页 |
| ·转化子传代稳定性实验 | 第96页 |
| ·物理化学因素对转化子絮凝的影响 | 第96页 |
| ·分析方法 | 第96页 |
| ·结果与讨论 | 第96-108页 |
| ·转化子絮凝测试 | 第96-97页 |
| ·转化子传代稳定性 | 第97-99页 |
| ·物理化学因素对6525 FLO1絮凝的影响 | 第99-102页 |
| ·物理化学因素对6525 FLO1O絮凝的影响 | 第102-105页 |
| ·转化子乙醇发酵 | 第105-108页 |
| ·小结 | 第108-110页 |
| 结论及展望 | 第110-111页 |
| 创新点摘要 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-118页 |
| 附录A 基因序列 | 第118-129页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文情况 | 第129-130页 |
| 攻读博士学位期间专利申请情况 | 第130-131页 |
| 致谢 | 第131-132页 |
| 作者简介 | 第132-133页 |
