| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语 | 第8-11页 |
| 第一部分 绪论 | 第11-28页 |
| 1 补体系统 | 第11-12页 |
| ·补体系统的组成 | 第11页 |
| ·补体系统的活化 | 第11页 |
| ·补体系统的生物学作用 | 第11-12页 |
| 2 C1与C1INH | 第12-13页 |
| 3 内毒素血症与内毒素休克 | 第13-16页 |
| ·内毒素血症和内毒素性休克威胁影响人类健康和生命 | 第13页 |
| ·C1INH有助于防治内毒素血症和内毒素性休克 | 第13-14页 |
| ·LPS的生物学研究 | 第14页 |
| ·LPS损伤血管内皮细胞 | 第14-15页 |
| ·C1INH抗LPS感染研究 | 第15-16页 |
| ·短肽与LPS | 第16页 |
| 4 长效重组蛋白药物 | 第16-17页 |
| ·长效制剂 | 第17页 |
| 5 酵母表达系统 | 第17-20页 |
| ·啤酒酵母表达系统 | 第18页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第18-19页 |
| ·外源基因在酵母中表达产物的分泌 | 第19页 |
| ·酵母表达系统的优缺点 | 第19-20页 |
| 6 Ig概述 | 第20-28页 |
| ·Ig的发现和命名 | 第20页 |
| ·抗体的基本结构和生物学功能 | 第20-25页 |
| ·抗体的分类 | 第20-21页 |
| ·抗体分子的基本结构 | 第21-22页 |
| ·抗体分子的类型特点 | 第22-24页 |
| ·抗体分子的生物学功能 | 第24-25页 |
| ·IgG的提取与纯化 | 第25-28页 |
| ·凝胶层析 | 第26页 |
| ·亲和层析 | 第26页 |
| ·DEAE—纤维素离了交换柱层析 | 第26-27页 |
| ·硫酸铵分级法(AS) | 第27页 |
| ·有机溶剂法 | 第27-28页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第28-39页 |
| 1 蛋白表达条件的优化 | 第28-31页 |
| ·实验材料与仪器设备 | 第28-29页 |
| ·菌株、质粒 | 第28页 |
| ·主要培养基 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-31页 |
| ·诱导时间对融合表达的影响 | 第29页 |
| ·不同甲醇浓度对ClINH(14-32)-HSA表达量的影响 | 第29-30页 |
| ·SDS-PAGE 电泳检测 | 第30-31页 |
| 2 C1INH(14-32)-HSA蛋白纯化 | 第31-33页 |
| ·实验材料与仪器设备 | 第31-33页 |
| ·试剂 | 第31页 |
| ·仪器设备 | 第31-32页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第32页 |
| ·SDS-PAGE电泳检测 | 第32页 |
| ·融合蛋白分离纯化 | 第32页 |
| ·融合蛋白超滤 | 第32-33页 |
| ·融合蛋白纯度的测定 | 第33页 |
| ·融合蛋白浓度的测定 | 第33页 |
| 3 多克隆抗体的制备 | 第33-37页 |
| ·实验材料与试剂 | 第33页 |
| ·免疫方法 | 第33-34页 |
| ·Elisa测定抗体效价 | 第34-35页 |
| ·试剂 | 第34页 |
| ·实验步骤 | 第34-35页 |
| ·Western blot检测抗体的特异性 | 第35-37页 |
| ·试剂 | 第35页 |
| ·器材 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-37页 |
| 4 多克隆抗体的纯化 | 第37-39页 |
| ·多克隆抗体的层析 | 第37-38页 |
| ·材料和仪器 | 第37页 |
| ·实验步骤 | 第37-38页 |
| ·SDS-PAGE检测抗体纯度 | 第38-39页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第39-49页 |
| 1 蛋白表达条件的优化 | 第39-46页 |
| ·诱导时间对C1INH(14-32)-HSA表达量的影响 | 第39-40页 |
| ·不同甲醇浓度对C1INH(14-32)-HSA表达量的影响 | 第40-41页 |
| ·融合蛋白C1INH(14-32)-HSA的分离纯化 | 第41-45页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第41-44页 |
| ·融合蛋白分离纯化 | 第44-45页 |
| ·融合蛋白C1INH(14-32)-HSA的超滤 | 第45-46页 |
| ·融合蛋白C1INH(14-32)-HSA的浓度测定 | 第46页 |
| 2 多克降抗体的制备 | 第46-49页 |
| ·Elisa测定抗体效价 | 第46-48页 |
| ·Western blot分析抗体的特异性 | 第48页 |
| ·抗体的亲和层析 | 第48-49页 |
| ·SDS-PAGE检测抗体纯度 | 第49页 |
| 主要结论 | 第49-50页 |
| 讨论与展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
