| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 图表目录 | 第9-10页 |
| 论文中常用中英文缩写词 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-18页 |
| 引言 | 第18-20页 |
| 1 材料与方法 | 第20-32页 |
| ·质粒和菌株 | 第20页 |
| ·酶类、主要试剂和培养基 | 第20页 |
| ·实验动物 | 第20页 |
| ·主要试剂和溶液配制 | 第20-24页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳所用试剂 | 第20页 |
| ·制备感受态细胞所用试剂 | 第20-21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·SDS-PAGE 电泳所需溶液 | 第21-22页 |
| ·蛋白诱导表达所需溶液 | 第22-23页 |
| ·Ni 柱纯化蛋白所用试剂 | 第23页 |
| ·Western-blot 试验所用溶液 | 第23-24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·兔抗拟态弧菌抗体的制备 | 第24页 |
| ·细菌培养与浓度测定 | 第24页 |
| ·免疫原制备与实验兔免疫 | 第24页 |
| ·血清抗体效价测定 | 第24页 |
| ·重组表达质粒 pET-32a-OmpU 的构建与鉴定 | 第24-28页 |
| ·拟态弧菌基因组 DNA 的提取 | 第24-25页 |
| ·OmpU 基因的 PCR 扩增 | 第25-27页 |
| ·重组表达质粒的转化与鉴定 | 第27-28页 |
| ·重组蛋白的可溶性表达与纯化 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的诱导表达与鉴定 | 第28页 |
| ·可溶性表达条件的优化 | 第28页 |
| ·重组融合蛋白的大量表达 | 第28-29页 |
| ·重组融合蛋白的纯化 | 第29页 |
| ·重组融合蛋白对锦鲤的免疫保护作用 | 第29-32页 |
| ·免疫原制备 | 第29页 |
| ·实验鱼的免疫 | 第29-30页 |
| ·免疫鱼血清中 IgM 含量的测定 | 第30-31页 |
| ·免疫鱼的人工感染试验 | 第31-32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-40页 |
| ·兔抗拟态弧菌抗体的效价 | 第32页 |
| ·OmpU 基因序列的信号肽、疏水性和不稳定指数分析 | 第32-34页 |
| ·重组表达质粒的构建与鉴定 | 第34页 |
| ·重组蛋白 pET-32a-OmpU 的诱导表达与鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组融合蛋白的表达形式分析 | 第35-36页 |
| ·可溶性表达条件的优化 | 第36-38页 |
| ·重组融合蛋白的纯化 | 第38-39页 |
| ·锦鲤免疫血清中 IgM 的含量 | 第39页 |
| ·重组蛋白对免疫鱼的免疫保护作用 | 第39-40页 |
| 3 讨论 | 第40-42页 |
| ·信号肽对拟态弧菌 OmpU 基因表达的影响 | 第40页 |
| ·拟态弧菌 OmpU 基因可溶性表达的条件的优化 | 第40-41页 |
| ·重组融合蛋白对锦鲤的免疫保护作用 | 第41-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 附录 | 第47-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |
