摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-21页 |
·玉米纹枯病简介 | 第10页 |
·病原菌胁迫下植物抗性途径 | 第10-12页 |
·植物信号传导途径 | 第10-11页 |
·活性氧代谢途径 | 第11-12页 |
·泛素降解途径 | 第12页 |
·植物miRNA简介 | 第12-20页 |
·植物miRNA的加工机制 | 第13页 |
·植物miRNA的作用机制 | 第13-14页 |
·植物miRNA的获得方法 | 第14-15页 |
·植物miRNA的检测方法 | 第15-16页 |
·杂交技术检测植物miRNA的表达 | 第15页 |
·PCR技术检测植物miRNA的表达 | 第15-16页 |
·植物miRNA功能分析方法 | 第16-18页 |
·靶基因的预测 | 第16-17页 |
·靶基因的验证 | 第17-18页 |
·植物miRNA逆境胁迫响应及其机理 | 第18-20页 |
·植物miRNA响应生物胁迫 | 第18-19页 |
·植物miRNA响应非生物胁迫 | 第19-20页 |
·实验室前期研究基础 | 第20-21页 |
·研究目的和意义 | 第21页 |
第二部分 材料与方法 | 第21-31页 |
·实验材料 | 第21-24页 |
·供试玉米材料 | 第21页 |
·玉米纹枯病病菌 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21-22页 |
·试剂盒 | 第21-22页 |
·酶及相关试剂 | 第22页 |
·培养基配方 | 第22页 |
·PCR引物 | 第22-23页 |
·实时荧光定量PCR引物 | 第22-23页 |
·靶基因半定量RT-PCR引物 | 第23页 |
·实验使用的数据库及软件 | 第23-24页 |
·实验室主要仪器设备 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-31页 |
·材料的处理 | 第24页 |
·总RNA的提取 | 第24-25页 |
·候选miRNA的验证及表达分析 | 第25-28页 |
·miRNA模板的逆转录反应 | 第25-26页 |
·miRNA真实性验证的PCR扩增与电泳检测 | 第26-27页 |
·实时荧光定量PCR检测miRNA的表达量 | 第27-28页 |
·候选miRNA的靶基因预测 | 第28页 |
·候选miRNA靶基因的半定量RT-PCR表达分析 | 第28-31页 |
·总RNA的逆转录 | 第28-29页 |
·利用内参基因18s rRNA调适cDNA浓度 | 第29-30页 |
·miRNA靶基因的半定量检测 | 第30-31页 |
第三部分 结果与分析 | 第31-48页 |
·总RNA提取的结果 | 第31页 |
·miRNA的真实性验证结果 | 第31-32页 |
·候选miRNA的荧光定量PCR分析 | 第32-41页 |
·候选miRNA标准曲线的制作图 | 第32-33页 |
·候选miRNA的熔解曲线图 | 第33-34页 |
·候选miRNA的表达趋势分析 | 第34-41页 |
·候选miRNA靶基因分析 | 第41-48页 |
·候选miRNA靶基因在线预测结果 | 第41-45页 |
·候选miRNA靶基因的半定量检测分析 | 第45-48页 |
·内参基因18s rRNA模板均一化结果 | 第45页 |
·候选miRNA靶基因的半定量检测结果 | 第45-48页 |
第四部分 讨论与结论 | 第48-58页 |
·讨论 | 第48-56页 |
·纹枯病胁迫下miRNA的表达分析 | 第48-50页 |
·候选miRNA靶基因预测 | 第50-51页 |
·两个玉米新miRNA的分析 | 第51-53页 |
·zma-miR10 | 第51-52页 |
·zma-miR49 | 第52-53页 |
·候选miRNA调控靶基因在纹枯病胁迫下的作用机理 | 第53-55页 |
·纹枯病胁迫下miRNA调控网络 | 第55-56页 |
·结论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-67页 |
致谢 | 第67-68页 |