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玉米纹枯病胁迫响应相关miRNA的功能研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第一部分 文献综述第10-21页
   ·玉米纹枯病简介第10页
   ·病原菌胁迫下植物抗性途径第10-12页
     ·植物信号传导途径第10-11页
     ·活性氧代谢途径第11-12页
     ·泛素降解途径第12页
   ·植物miRNA简介第12-20页
     ·植物miRNA的加工机制第13页
     ·植物miRNA的作用机制第13-14页
     ·植物miRNA的获得方法第14-15页
     ·植物miRNA的检测方法第15-16页
       ·杂交技术检测植物miRNA的表达第15页
       ·PCR技术检测植物miRNA的表达第15-16页
     ·植物miRNA功能分析方法第16-18页
       ·靶基因的预测第16-17页
       ·靶基因的验证第17-18页
     ·植物miRNA逆境胁迫响应及其机理第18-20页
       ·植物miRNA响应生物胁迫第18-19页
       ·植物miRNA响应非生物胁迫第19-20页
   ·实验室前期研究基础第20-21页
   ·研究目的和意义第21页
第二部分 材料与方法第21-31页
   ·实验材料第21-24页
     ·供试玉米材料第21页
     ·玉米纹枯病病菌第21页
     ·主要试剂第21-22页
       ·试剂盒第21-22页
       ·酶及相关试剂第22页
       ·培养基配方第22页
     ·PCR引物第22-23页
       ·实时荧光定量PCR引物第22-23页
       ·靶基因半定量RT-PCR引物第23页
     ·实验使用的数据库及软件第23-24页
     ·实验室主要仪器设备第24页
   ·实验方法第24-31页
     ·材料的处理第24页
     ·总RNA的提取第24-25页
     ·候选miRNA的验证及表达分析第25-28页
       ·miRNA模板的逆转录反应第25-26页
       ·miRNA真实性验证的PCR扩增与电泳检测第26-27页
       ·实时荧光定量PCR检测miRNA的表达量第27-28页
     ·候选miRNA的靶基因预测第28页
     ·候选miRNA靶基因的半定量RT-PCR表达分析第28-31页
       ·总RNA的逆转录第28-29页
       ·利用内参基因18s rRNA调适cDNA浓度第29-30页
       ·miRNA靶基因的半定量检测第30-31页
第三部分 结果与分析第31-48页
   ·总RNA提取的结果第31页
   ·miRNA的真实性验证结果第31-32页
   ·候选miRNA的荧光定量PCR分析第32-41页
     ·候选miRNA标准曲线的制作图第32-33页
     ·候选miRNA的熔解曲线图第33-34页
     ·候选miRNA的表达趋势分析第34-41页
   ·候选miRNA靶基因分析第41-48页
     ·候选miRNA靶基因在线预测结果第41-45页
     ·候选miRNA靶基因的半定量检测分析第45-48页
       ·内参基因18s rRNA模板均一化结果第45页
       ·候选miRNA靶基因的半定量检测结果第45-48页
第四部分 讨论与结论第48-58页
   ·讨论第48-56页
     ·纹枯病胁迫下miRNA的表达分析第48-50页
     ·候选miRNA靶基因预测第50-51页
     ·两个玉米新miRNA的分析第51-53页
       ·zma-miR10第51-52页
       ·zma-miR49第52-53页
     ·候选miRNA调控靶基因在纹枯病胁迫下的作用机理第53-55页
     ·纹枯病胁迫下miRNA调控网络第55-56页
   ·结论第56-58页
参考文献第58-67页
致谢第67-68页

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