羊传染性脓疱病毒VIR基因的序列分析及PCR检测方法的研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-20页 |
| ·羊传染性脓疱概述 | 第9页 |
| ·病原学 | 第9-12页 |
| ·形态结构 | 第9-10页 |
| ·理化特性 | 第10页 |
| ·培养特性 | 第10-11页 |
| ·抗原性 | 第11页 |
| ·分子生物学特性 | 第11-12页 |
| ·流行病学 | 第12-13页 |
| ·传染源及传播途径 | 第12-13页 |
| ·易感动物 | 第13页 |
| ·流行特征 | 第13页 |
| ·发病机理 | 第13页 |
| ·临床症状 | 第13-14页 |
| ·唇型 | 第14页 |
| ·蹄型 | 第14页 |
| ·外阴型 | 第14页 |
| ·病理变化 | 第14-15页 |
| ·诊断方法 | 第15-17页 |
| ·电子显微镜检查 | 第15页 |
| ·病毒分离 | 第15-16页 |
| ·动物接种试验 | 第16页 |
| ·免疫学方法诊断 | 第16页 |
| ·中和试验 | 第16页 |
| ·酶联免疫吸附试验 | 第16页 |
| ·对流免疫电泳 | 第16页 |
| ·分子生物学诊断 | 第16-17页 |
| ·PCR检测技术 | 第16-17页 |
| ·核酸探针检测技术 | 第17页 |
| ·免疫特性 | 第17-18页 |
| ·高度嗜上皮性 | 第17页 |
| ·局部免疫特性 | 第17页 |
| ·细胞免疫为主 | 第17-18页 |
| ·体液免疫抗体水平低 | 第18页 |
| ·防制 | 第18页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-26页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·试验病毒 | 第20页 |
| ·参考毒株 | 第20页 |
| ·菌株、载体及主要试剂 | 第20页 |
| ·培养基和抗生素 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| ·引物 | 第21页 |
| ·试验方法 | 第21-26页 |
| ·OV/nm-05病毒株总DNA的提取 | 第21-22页 |
| ·OV/nm-05株VIR基因的克隆与序列分析 | 第22-25页 |
| ·VIR基因的PCR扩增 | 第22页 |
| ·PCR产物的纯化回收 | 第22-23页 |
| ·重组质粒的构建 | 第23页 |
| ·重组质粒的转化 | 第23页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第23-24页 |
| ·重组质粒的提取 | 第24页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第24-25页 |
| ·核苷酸序列测定 | 第25页 |
| ·序列比较分析 | 第25页 |
| ·PCR检测方法的研究 | 第25-26页 |
| ·PCR退火温度的优化筛选 | 第25页 |
| ·PCR特异性试验 | 第25-26页 |
| ·PCR敏感性试验 | 第26页 |
| 3 结果 | 第26-36页 |
| ·VIR基因的PCR扩增结果 | 第26页 |
| ·重组质粒鉴定结果 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定结果 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定结果 | 第27页 |
| ·基因序列测定结果 | 第27-29页 |
| ·VIR基因核苷酸序列比较分析 | 第29-33页 |
| ·PCR退火温度的优化筛选结果 | 第33-34页 |
| ·PCR特异性试验结果 | 第34页 |
| ·PCR敏感性试验结果 | 第34-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| ·VIR基因 | 第36页 |
| ·PCR技术要点 | 第36-37页 |
| ·PCR的特异性与敏感性 | 第37-38页 |
| 5 结论 | 第38-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-45页 |
| 作者简介 | 第45页 |
