| 中文摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-18页 |
| 常用词语缩写 | 第18-19页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-36页 |
| 1 奶牛乳房炎的研究进展 | 第19-23页 |
| ·奶牛乳房炎的概述 | 第19页 |
| ·奶牛乳房炎的发生 | 第19-20页 |
| ·奶牛乳房炎的分类 | 第20页 |
| ·乳房炎的诊断 | 第20-22页 |
| ·奶牛乳房炎的预防与治疗 | 第22-23页 |
| ·奶牛乳房炎遗传学研究 | 第23页 |
| 2 奶牛乳房炎抗性相关候选基因的研究进展 | 第23-30页 |
| ·白介素-8及其受体基因的研究进展 | 第23-26页 |
| ·TLR4基因的研究进展 | 第26-27页 |
| ·溶菌酶(Lysozyme)基因的研究进展 | 第27-28页 |
| ·乳铁蛋白(Lactoferrin)基因的研究进展 | 第28-30页 |
| 3 乳房炎抗性选择的主要方法 | 第30-32页 |
| ·分子标记法 | 第30-31页 |
| ·候选基因法 | 第31-32页 |
| 4 多基因聚合在家畜抗病育种中的应用 | 第32-33页 |
| 5 实时荧光定量PCR技术 | 第33-34页 |
| 6 本研究的目的和意义 | 第34-36页 |
| 第二章 奶牛隐性乳房炎主要病原菌的分离鉴定 | 第36-45页 |
| 1 材料 | 第37-38页 |
| ·待检奶牛及乳样 | 第37-38页 |
| ·培养基 | 第38页 |
| ·主要仪器设备 | 第38页 |
| ·试剂 | 第38页 |
| 2 方法 | 第38-40页 |
| ·BMT法检测隐性乳房炎 | 第38-39页 |
| ·乳样的采集 | 第39页 |
| ·主要病原菌分离培养 | 第39页 |
| ·革兰氏染色及镜检 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-42页 |
| ·隐性乳房炎检测结果 | 第40页 |
| ·主要病原菌的分离鉴定结果 | 第40-41页 |
| ·病原菌混合感染情况 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| ·隐性乳房炎发生情况分析 | 第42-43页 |
| ·主要病原菌感染情况分析 | 第43页 |
| ·主要病原菌混合感染情况分析 | 第43-45页 |
| 第三章 奶牛乳腺细胞在主要病原菌刺激下相关基因表达规律的研究 | 第45-60页 |
| 1 材料与方法 | 第45-51页 |
| ·细胞来源 | 第45页 |
| ·试剂与器材 | 第45-46页 |
| ·用试剂及细胞培养液成分的配制 | 第46页 |
| ·细胞的复苏、传代和冻存 | 第46-48页 |
| ·细胞活力测定 | 第48页 |
| ·细胞计数 | 第48页 |
| ·细菌的培养与灭活 | 第48页 |
| ·细菌刺激乳腺上皮细胞 | 第48页 |
| ·细胞中RNA的提取和检测 | 第48-49页 |
| ·总RNA中DNA的消除 | 第49页 |
| ·引物设计和PCR扩增 | 第49页 |
| ·RI-PCR | 第49-50页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第50-51页 |
| ·统计软件和方法 | 第51页 |
| 2 结果分析 | 第51-57页 |
| ·RNA的提取 | 第51-52页 |
| ·各检测基因在不同菌种刺激下的表达分析 | 第52-57页 |
| 3 讨论 | 第57-60页 |
| 第四章 IL8、CXCR1、TLR4、LYZ和LF基因的多态性与泌乳性状及体细胞评分的关联分析 | 第60-102页 |
| 第一节 IL8基因的多态性与泌乳性状及体细胞评分的关联分析 | 第60-75页 |
| 1 引言 | 第60-61页 |
| 2 材料与方法 | 第61-68页 |
| ·实验材料 | 第61-63页 |
| ·实验方法 | 第63-68页 |
| 3 结果与分析 | 第68-72页 |
| ·SSCP引物基因组DNA的PCR扩增 | 第68页 |
| ·IL8基因多态性检测 | 第68-72页 |
| ·IL8基因多态性与荷斯坦牛泌乳性状及SCS的关联分析 | 第72页 |
| 4 讨论 | 第72-75页 |
| ·IL8基因的多态性 | 第72-73页 |
| ·IL8基因与泌乳性状及SCS的关系 | 第73-75页 |
| 第二节 CXCR1基因的多态性与泌乳性状及体细胞评分的关联分析 | 第75-83页 |
| 1 引言 | 第75-76页 |
| 2 材料与方法 | 第76-77页 |
| 3 结果与分析 | 第77-81页 |
| ·对引物的PCR扩增结果 | 第77页 |
| ·CXCR1基因多态性检测 | 第77-79页 |
| ·基因型频率与等位基因频率 | 第79页 |
| ·CXCR1基因单位点基因型与SCS的关联分析 | 第79-81页 |
| 4 讨论 | 第81-83页 |
| 第三节 LYZ基因的多态性与泌乳性状及SCS的关联分析 | 第83-88页 |
| 1 引言 | 第83-84页 |
| 2 材料与方法 | 第84页 |
| 3 结果与分析 | 第84-87页 |
| ·SSCP引物基因组DNA的PCR扩增 | 第84-86页 |
| ·基因型频率、等位基因频率及遗传特性 | 第86页 |
| ·中国荷斯坦牛LYZ基因多态性与泌乳性状和SCS的相关性分析 | 第86-87页 |
| 4 讨论 | 第87-88页 |
| 第四节 TLR4基因的多态性泌乳性状及SCS的关联分析 | 第88-95页 |
| 1 引言 | 第88-89页 |
| 2 材料与方法 | 第89-90页 |
| 3 结果与分析 | 第90-94页 |
| ·TLR4基因多态性检测 | 第90-91页 |
| ·基因型频率、等位基因频率及遗传特性 | 第91-93页 |
| ·中国荷斯坦牛TLR4基因多态性与泌乳性状及SCS相关性分析 | 第93-94页 |
| 4 讨论 | 第94-95页 |
| 第五节 LF基因多态性与泌乳性状及SCS的关联分析 | 第95-102页 |
| 1 引言 | 第95-96页 |
| 2 材料与方法 | 第96页 |
| 3 结果与分析 | 第96-100页 |
| ·LF基因多态性检测 | 第96-98页 |
| ·基因型频率、等位基因频率及遗传特性 | 第98-99页 |
| ·LF基因多态性与荷斯坦牛泌乳性状及SCS的关联分析 | 第99-100页 |
| 4 讨论 | 第100-102页 |
| 第五章 多基因聚合模型的构建和应用 | 第102-113页 |
| 1 引言 | 第102-104页 |
| 2 统计分析 | 第104-105页 |
| 3 结果 | 第105-109页 |
| ·该牛场乳房炎易感性 | 第105页 |
| ·基连锁不平衡分析 | 第105页 |
| ·Logistic回归分析 | 第105-106页 |
| ·MDR分析 | 第106-107页 |
| ·MPVA分析 | 第107-109页 |
| 4 讨论 | 第109-113页 |
| ·MDR、logistic和MPVA回归的比较分析 | 第109-110页 |
| ·CXCR1和IL8多态性与乳房炎易感性的关联 | 第110-111页 |
| ·MDR和MPVA方法在动物遗传育种中的应用前景 | 第111-113页 |
| 第六章 CXCR1和IL8基因表达规律的研究 | 第113-122页 |
| 1 材料和方法 | 第113-114页 |
| ·实验动物 | 第113-114页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第114页 |
| ·血液中RNA的提取和检测 | 第114页 |
| 2 结果与分析 | 第114-119页 |
| ·RNA的提取 | 第114-115页 |
| ·目的基因和内参基因的溶解曲线 | 第115-116页 |
| ·IL8基因不同突变位点3种基因的相对定量表达分析 | 第116-118页 |
| ·CXCR1基因-1768(T>A)突变位点3种基因的相对定量表达分析 | 第118-119页 |
| ·IL8基因和CXCR1基因的表达变化 | 第119页 |
| 3 讨论 | 第119-122页 |
| ·IL8基因的表达 | 第119-120页 |
| ·CXCR1基因的表达 | 第120页 |
| ·IL8基因和CXCR1基因的协同表达 | 第120-122页 |
| 全文结论 | 第122-124页 |
| 创新之处 | 第124-125页 |
| 参考文献 | 第125-145页 |
| 致谢 | 第145-146页 |
| 攻读学位期间发表学术论文 | 第146-148页 |
