| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 目录 | 第12-15页 |
| 第一章 研究背景 | 第15-31页 |
| 1 冠状病毒的生物学特性 | 第16-20页 |
| ·冠状病毒的基因组结构 | 第16页 |
| ·冠状病毒的蛋白组结构 | 第16-18页 |
| ·冠状病毒的分类 | 第18-19页 |
| ·目前研究较多的冠状病毒 | 第19-20页 |
| 2 病毒引发的免疫反应类型及机理 | 第20-23页 |
| ·先天性天然免疫反应 | 第21-22页 |
| ·病毒抵抗先天性天然免疫反应的机制 | 第22-23页 |
| ·宿主先天性天然免疫与冠状病毒 | 第23页 |
| 3 疫苗的研发 | 第23-27页 |
| ·灭活疫苗 | 第23-24页 |
| ·减毒活疫苗 | 第24页 |
| ·重组病毒疫苗 | 第24-26页 |
| ·多肽疫苗 | 第26页 |
| ·基因疫苗 | 第26-27页 |
| 4 抗病毒抗体治疗 | 第27-29页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第27页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第27-28页 |
| ·抗体针对疾病的治疗机制 | 第28-29页 |
| 5 本论文的研究技术路线及目的与意义 | 第29-31页 |
| ·研究技术路线 | 第29-30页 |
| ·疫苗的研究 | 第30页 |
| ·抗体的研究 | 第30-31页 |
| 第二章 材料与方法 | 第31-56页 |
| 1 实验材料 | 第31-36页 |
| ·病毒株 | 第31页 |
| ·细胞株 | 第31-32页 |
| ·菌株 | 第32页 |
| ·质粒载体 | 第32页 |
| ·实验动物 | 第32页 |
| ·产品及服务 | 第32-34页 |
| ·主要溶液及其具体配制方法 | 第34-36页 |
| 2 实验方法 | 第36-56页 |
| ·病毒总RNA的抽提 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR | 第37-39页 |
| ·PCR反应产物回收纯化 | 第39-40页 |
| ·质粒构建 | 第40-42页 |
| ·质粒DNA小量制备方法 | 第42页 |
| ·DH5 α 感受态细胞的制备和转化 | 第42-43页 |
| ·大肠杆菌重组蛋白诱导表达及纯化 | 第43-46页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第46-47页 |
| ·免疫印迹反应 | 第47-48页 |
| ·酶联免疫吸附试验 | 第48-49页 |
| ·免疫共沉淀 | 第49页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第49-53页 |
| ·病毒的培养及滴定 | 第53-56页 |
| 第三章 冠状病毒非结构蛋白Nsp1的生物学机理研究 | 第56-75页 |
| 1 结果 | 第59-71页 |
| ·SARS-CoV非结构蛋白Nsp1~(13-128)和第一类冠状病毒非结构蛋白Nsp1有相似的结构 | 第59-61页 |
| ·非结构蛋Nsp1与核糖体40S小亚基之间的关系 | 第61-62页 |
| ·非结构蛋白Nsp1不阻止干扰素调控因子IRF3的磷酸化 | 第62-63页 |
| ·非结构蛋Nsp1对人类干扰素-β(IFN-β)和荧光素酶(Luciferase)mRNA转录的抑制 | 第63-64页 |
| ·非结构蛋白Nsp1对干扰素-β(IFN-β)和荧光素酶(Luciferase)蛋白合成的抑制 | 第64-67页 |
| ·第一类冠状病毒HCoV-229E免疫原性的研究 | 第67-71页 |
| 2 讨论 | 第71-74页 |
| 3 结论 | 第74-75页 |
| 第四章 冠状病毒Heptide Repeat2(HR2)片段的抗体中和活性的研究 | 第75-88页 |
| 1 结果 | 第77-84页 |
| ·获得针对五种人类冠状病毒的HR2片段的多克隆抗体 | 第77-78页 |
| ·针对HR2片段的多克隆抗体在病毒转染或感染后细胞中的检测 | 第78-79页 |
| ·五种人类冠状病毒抗HR2片段的多克隆抗体的交叉中和活性检测 | 第79-81页 |
| ·猪肠道病毒(TGEV)HR2片段的多克隆抗体与第一类冠状病毒的抗体中和活性检测0 | 第81-84页 |
| 2 讨论 | 第84-87页 |
| 3 结论 | 第87-88页 |
| 附录 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
