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EDSV京911株五邻体优势抗原表位的筛选及鉴定

摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1 引言第13-20页
   ·减蛋综合征概述第13页
     ·流行病学第13页
     ·症状及病变第13页
   ·减蛋综合征病毒概述第13-18页
     ·减蛋综合征病毒的生物学特性第13-15页
     ·减蛋综合征病毒的基因组特点第15-18页
   ·EDSV诊断方法的研究进展第18-19页
   ·鸭感染EDSV的危害第19页
   ·研究的目的与意义第19-20页
2 材料与方法第20-33页
   ·试验材料第20-21页
     ·病毒、质粒、载体、菌种第20页
     ·实验动物第20页
     ·工具酶第20页
     ·分子生物学试剂第20页
     ·生化试剂第20页
     ·化学试剂第20页
     ·血清及酶标抗体第20-21页
     ·主要实验仪器设备第21页
   ·试验方法第21-33页
     ·鸭源抗EDSV血清的制备及抗体消长规律的初步测定第21页
     ·EDSV五邻体蛋白抗原表位的初步筛选第21-25页
     ·EDSV五邻体蛋白抗原表位的第二轮筛选第25-26页
     ·EDSV五邻体蛋白抗原表位的第三轮筛选第26-28页
     ·EDSV五邻体蛋白抗原表位的第四轮筛选第28-29页
     ·EDSV五邻体蛋白抗原表位的第五轮筛选第29-31页
     ·EDSV五邻体蛋白抗原表位的第六轮筛选第31-32页
     ·抗原表位的进一步鉴定第32-33页
3 结果与分析第33-48页
   ·鸭减蛋综合征抗体消长规律测定结果第33-34页
     ·免疫前鸭只的检测结果第33页
     ·血清抗体消长规律的测定结果第33-34页
   ·EDSV五邻体蛋白抗原表位的初步筛选第34-36页
     ·PA~PF基因的PCR扩增结果第34页
     ·原核表达载体pET-30a-EDSV-PA~PF的构建第34-35页
     ·EDSV-PA~PF基因在大肠杆菌中的诱导表达及纯化第35页
     ·EDSV-PA~PF基因表达蛋白的抗原性分析第35-36页
   ·EDSV五邻体蛋白抗原表位的第二轮筛选第36-38页
     ·PA-1~4基因的PCR扩增结果第36-37页
     ·原核表达载体pET-32a-EDSV-PA-1~4的构建第37页
     ·EDSV-PA-1~4基因在大肠杆菌中的诱导表达及纯化第37-38页
     ·EDSV-PA-1~4基因表达蛋白的抗原性分析第38页
   ·EDSV五邻体蛋白抗原表位的第三轮筛选第38-40页
     ·原核表达载体pET-32a-H-1~8的构建第38-39页
     ·EDSV-H-1~8基因在大肠杆菌中的诱导表达及纯化第39页
     ·EDSV-H-1~8基因表达蛋白的抗原性分析第39-40页
   ·EDSV五邻体蛋白抗原表位的第四轮筛选第40-42页
     ·原核表达载体pET-32a-H-1.1~1.3、pET-32a-H-8.1~8.3的构建第40-41页
     ·EDSV-H.1.1~1.3、EDSV-H-8.1~8.3基因在大肠杆菌中的诱导表达及纯化第41页
     ·EDSV-H.1.1.1.3,8.1~8.3基因表达蛋白的抗原性分析第41-42页
   ·EDSV五邻体蛋白抗原表位的第五轮筛选第42-44页
     ·原核表达载体pET-32a-F-1~7的构建第42-43页
     ·EDSV-F-1~7基因在大肠杆菌中的诱导表达及纯化第43页
     ·EDSV-F-1~7基因表达蛋白的抗原性分析第43-44页
   ·EDSV五邻体蛋白抗原表位的第六轮筛选第44-46页
     ·原核表达载体pET-32a-S-1~9的构建第44-45页
     ·EDSV-S-1~9基因在大肠杆菌中的诱导表达及纯化第45-46页
     ·EDSV-S-1~9基因表达蛋白的抗原性分析第46页
   ·抗原表位的进一步鉴定第46-48页
     ·抗原表位不同种阳性血清的反应性鉴定第46-47页
     ·抗原表位的ELISA分析第47-48页
4 讨论第48-51页
   ·选择减蛋综合征病毒五邻体蛋白作为表位筛选对象的依据第48页
   ·基因的克隆策略第48页
   ·融合蛋白纯化方法的选择第48-49页
   ·鸭感染EDSV的防制第49页
   ·本研究中所遇问题的解决方法第49-50页
   ·减蛋综合征病毒五邻体蛋白抗原表位的筛选第50-51页
5 结论第51-52页
致谢第52-53页
参考文献第53-57页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第57页

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