| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-28页 |
| 第一章 转基因动物以其动物检测方法研究进展 | 第13-23页 |
| 1 转基因动物研究进展 | 第13-19页 |
| ·转基因动物的研究与应用 | 第13-15页 |
| ·转基因动物在基础理论上的研究 | 第13-14页 |
| ·转基因动物育种 | 第14页 |
| ·人异种器官移植 | 第14页 |
| ·动物生物反应器 | 第14-15页 |
| ·转基因动物的制作方法 | 第15-19页 |
| ·电转法 | 第15页 |
| ·显微注射法 | 第15-16页 |
| ·脂质体转染 | 第16页 |
| ·胚胎干细胞介导法 | 第16-17页 |
| ·精子载体法 | 第17页 |
| ·体细胞核移植转基因法 | 第17页 |
| ·腺病毒感染法 | 第17-18页 |
| ·逆转录病毒感染法 | 第18-19页 |
| 2 RNAi在转基因动物中的应用 | 第19-20页 |
| ·RNAi的作用机制与基因功能中的应用 | 第19页 |
| ·慢病毒介导的RNAi的转基因动物 | 第19-20页 |
| 3 转基因动物检测方法研究进展 | 第20-22页 |
| ·核酸水平上的检测方法 | 第20-21页 |
| ·PCR扩增 | 第20-21页 |
| ·定量PCR | 第21页 |
| ·核酸印记法 | 第21页 |
| ·核酸杂交技术 | 第21页 |
| ·转基因成分蛋白水平上的检测方法 | 第21-22页 |
| 4 研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 第二章 转基因动物安全性评定指标与方法学研究进展 | 第23-28页 |
| 1 转基因动物安全性评价原则 | 第23-24页 |
| ·实质等同性原则(Substantial equivalence) | 第23页 |
| ·预防原则 | 第23页 |
| ·递进原则 | 第23页 |
| ·个案分析原则 | 第23-24页 |
| ·科学评价原则 | 第24页 |
| 2 转基因动物安全性评价 | 第24-26页 |
| ·环境安全性及拟解决方案 | 第24-25页 |
| ·转基因动物本身的健康安全问题及拟解决方案 | 第25页 |
| ·转基因动物产品的安全性及拟解决方案 | 第25-26页 |
| 3 重组慢病毒载体系统生物安全性研究进展 | 第26-27页 |
| 4 研究的目的与意义 | 第27-28页 |
| 第二部分 试验研究 | 第28-51页 |
| 第三章 慢病毒介导的RNAi转基因羊鉴定方法建立与优化 | 第28-44页 |
| 1 前言 | 第28页 |
| 2 试验材料 | 第28-31页 |
| ·小羊组织样 | 第28页 |
| ·主要酶、试剂以及试剂盒 | 第28-29页 |
| ·其他溶液的配制 | 第29-30页 |
| ·主要的仪器设备 | 第30-31页 |
| 3 试验方法 | 第31-37页 |
| ·组织DNA的提取 | 第31-33页 |
| ·CTAB法提取组织DNA | 第31-32页 |
| ·DNA快速提取试剂盒提取组织DNA | 第32-33页 |
| ·外源基因片段的扩增与测序 | 第33-34页 |
| ·Southern Blot假阳性检测 | 第34-37页 |
| ·标记基因探针的制备与检测 | 第34-35页 |
| ·组织DNA的转移与固定 | 第35-36页 |
| ·预杂交与杂交 | 第36页 |
| ·显色 | 第36-37页 |
| 4 实验结果 | 第37-42页 |
| ·提取的组织DNA | 第37页 |
| ·外源基因片段的扩增与测序 | 第37-39页 |
| ·琼脂糖电泳检测 | 第37-38页 |
| ·测序结果 | 第38-39页 |
| ·Southern Blot假阳性检测 | 第39-42页 |
| ·标记基因探针效率检测 | 第39-40页 |
| ·基因组DNA酶切琼脂糖电泳检测 | 第40-41页 |
| ·基因组DNA的转膜固定 | 第41页 |
| ·杂交与显色 | 第41-42页 |
| 5 讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 卵巢注射慢病毒母羊安全性初步检测 | 第44-51页 |
| 1 前言 | 第44页 |
| 2 试验材料 | 第44-45页 |
| ·慢病毒颗粒 | 第44页 |
| ·试验动物 | 第44页 |
| ·主要酶、试剂及试剂盒 | 第44-45页 |
| ·其他溶液的配制 | 第45页 |
| ·主要仪器设备 | 第45页 |
| 3 试验方法 | 第45-47页 |
| ·实验分组 | 第45-46页 |
| ·母羊卵巢注射慢病毒 | 第46页 |
| ·血样的采集与血常规检测 | 第46页 |
| ·血液DNA的提取与检测 | 第46-47页 |
| ·外源BSD基因的扩增 | 第47页 |
| 4 结果与分析 | 第47-49页 |
| ·血液学指标变化 | 第47-48页 |
| ·外源基因扩增结果 | 第48-49页 |
| 5 讨论 | 第49-51页 |
| 全文小结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58页 |