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家蚕幼虫高温处理前后SAGE文库的构建与分析及差异表达热激蛋白基因的研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 文献综述第12-24页
 1 高温与昆虫的关系第12-16页
   ·高温对昆虫生长发育的影响第12-13页
   ·高温对昆虫影响的内在机理第13-14页
   ·研究高温与昆虫关系的意义第14-15页
   ·研究家蚕耐高温机理的意义第15-16页
 2 基因差异表达谱及家蚕 SAGE 研究进展第16-24页
   ·差异基因表达谱分析技术概述第17页
   ·高通量基因表达谱技术举例第17-24页
第二章 研究目的与内容第24-26页
 1 研究目的与意义第24页
 2 研究内容第24-25页
 3 技术路线第25-26页
第三章 常用实验材料与技术第26-36页
 1 常用材料与试剂第26-29页
   ·实验材料第26页
   ·高温处理方法及取材第26页
   ·主要试剂第26页
   ·培养基第26-27页
   ·缓冲液和常用溶液第27-28页
   ·核酸电泳相关试剂第28页
   ·主要数据库及软件第28-29页
 2 主要仪器设备第29-30页
 3 基本实验方法第30-36页
   ·总 RNA 的抽提第30页
   ·总 RNA 消化步骤及加样体系第30-31页
   ·RNA 反转录第31页
   ·PCR 扩增反应程序及加样体系第31-32页
   ·DNA 琼脂糖凝胶电泳第32-33页
   ·PCR 产物的回收与连接第33页
   ·感受态细胞制备第33页
   ·连接产物的转化第33-34页
   ·重组质粒的筛选第34页
   ·质粒 DNA 的提取第34-36页
第四章 家蚕幼虫雌性高温处理前后 SAGE 文库的构建与分析第36-57页
 1 材料与方法第36-41页
   ·材料处理及取材第36-37页
   ·主要试剂和仪器第37页
   ·总 RNA 的提取第37页
   ·SAGE 库的构建第37页
   ·数据分析第37-40页
   ·SAGE 文库结果的验证第40-41页
 2 结果与分析第41-55页
   ·两个家蚕 SAGE 文库中的清洁标签表达分布第41-42页
   ·标签的基因注释、标准化和基因表达水平分析第42-44页
   ·不同温度下家蚕 SAGE 文库中的基因表达水平变化分析第44-48页
   ·两个家蚕 SAGE 文库中的 GO 功能显著性富集分析第48-50页
   ·两个家蚕 SAGE 文库中差异显著基因的 KEGG pathway 分析第50-52页
   ·SAGE 标签表达水平的验证第52-55页
 3 讨论第55-57页
第五章 家蚕 BmsHSP27.4 基因的克隆和序列分析第57-69页
 1 材料与方法第57-59页
   ·实验动物第57页
   ·总 RNA 的提取及第一链 cDNA 的合成第57-58页
   ·引物设计第58页
   ·家蚕 BmsHSP27.4 基因全长 cDNA 的克隆第58-59页
   ·家蚕 BmsHSP27.4 基因序列分析第59页
   ·家蚕 BmsHSP27.4 基因 EST 表达谱和芯片表达分析第59页
 2 结果与分析第59-67页
   ·雌雄文库中热激蛋白(HSP)的筛选和比较第59-62页
   ·家蚕 BmsHSP27.4 基因全长 cDNA 的克隆第62-63页
   ·家蚕 BmsHSP27.4 基因的染色体定位第63页
   ·分子进化分析第63-65页
   ·家蚕 BmsHSP27.4 基因的 EST 表达谱分析第65-66页
   ·家蚕 BmsHSP27.4 基因的芯片表达谱分析第66-67页
 3 讨论第67-69页
第六章 家蚕 BmsHSP27.4 基因时空表达分析第69-81页
 1 材料与方法第69-70页
   ·实验材料与取材第69页
   ·总 RNA 的提取及第一链 cDNA 的合成第69页
   ·引物设计第69-70页
   ·家蚕 BmsHSP27.4 基因的时空表达分析第70页
 2 结果与分析第70-80页
   ·家蚕 BmsHSP27.4 基因的时空表达差异第70-77页
   ·家蚕 BmsHSP27.4 的性别表达差异第77-80页
 3 讨论第80-81页
小结与展望第81-83页
参考文献第83-95页
研究生期间发表的文章、专利第95-96页
附录第96-116页
致谢第116-117页

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