中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-24页 |
1 高温与昆虫的关系 | 第12-16页 |
·高温对昆虫生长发育的影响 | 第12-13页 |
·高温对昆虫影响的内在机理 | 第13-14页 |
·研究高温与昆虫关系的意义 | 第14-15页 |
·研究家蚕耐高温机理的意义 | 第15-16页 |
2 基因差异表达谱及家蚕 SAGE 研究进展 | 第16-24页 |
·差异基因表达谱分析技术概述 | 第17页 |
·高通量基因表达谱技术举例 | 第17-24页 |
第二章 研究目的与内容 | 第24-26页 |
1 研究目的与意义 | 第24页 |
2 研究内容 | 第24-25页 |
3 技术路线 | 第25-26页 |
第三章 常用实验材料与技术 | 第26-36页 |
1 常用材料与试剂 | 第26-29页 |
·实验材料 | 第26页 |
·高温处理方法及取材 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26页 |
·培养基 | 第26-27页 |
·缓冲液和常用溶液 | 第27-28页 |
·核酸电泳相关试剂 | 第28页 |
·主要数据库及软件 | 第28-29页 |
2 主要仪器设备 | 第29-30页 |
3 基本实验方法 | 第30-36页 |
·总 RNA 的抽提 | 第30页 |
·总 RNA 消化步骤及加样体系 | 第30-31页 |
·RNA 反转录 | 第31页 |
·PCR 扩增反应程序及加样体系 | 第31-32页 |
·DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第32-33页 |
·PCR 产物的回收与连接 | 第33页 |
·感受态细胞制备 | 第33页 |
·连接产物的转化 | 第33-34页 |
·重组质粒的筛选 | 第34页 |
·质粒 DNA 的提取 | 第34-36页 |
第四章 家蚕幼虫雌性高温处理前后 SAGE 文库的构建与分析 | 第36-57页 |
1 材料与方法 | 第36-41页 |
·材料处理及取材 | 第36-37页 |
·主要试剂和仪器 | 第37页 |
·总 RNA 的提取 | 第37页 |
·SAGE 库的构建 | 第37页 |
·数据分析 | 第37-40页 |
·SAGE 文库结果的验证 | 第40-41页 |
2 结果与分析 | 第41-55页 |
·两个家蚕 SAGE 文库中的清洁标签表达分布 | 第41-42页 |
·标签的基因注释、标准化和基因表达水平分析 | 第42-44页 |
·不同温度下家蚕 SAGE 文库中的基因表达水平变化分析 | 第44-48页 |
·两个家蚕 SAGE 文库中的 GO 功能显著性富集分析 | 第48-50页 |
·两个家蚕 SAGE 文库中差异显著基因的 KEGG pathway 分析 | 第50-52页 |
·SAGE 标签表达水平的验证 | 第52-55页 |
3 讨论 | 第55-57页 |
第五章 家蚕 BmsHSP27.4 基因的克隆和序列分析 | 第57-69页 |
1 材料与方法 | 第57-59页 |
·实验动物 | 第57页 |
·总 RNA 的提取及第一链 cDNA 的合成 | 第57-58页 |
·引物设计 | 第58页 |
·家蚕 BmsHSP27.4 基因全长 cDNA 的克隆 | 第58-59页 |
·家蚕 BmsHSP27.4 基因序列分析 | 第59页 |
·家蚕 BmsHSP27.4 基因 EST 表达谱和芯片表达分析 | 第59页 |
2 结果与分析 | 第59-67页 |
·雌雄文库中热激蛋白(HSP)的筛选和比较 | 第59-62页 |
·家蚕 BmsHSP27.4 基因全长 cDNA 的克隆 | 第62-63页 |
·家蚕 BmsHSP27.4 基因的染色体定位 | 第63页 |
·分子进化分析 | 第63-65页 |
·家蚕 BmsHSP27.4 基因的 EST 表达谱分析 | 第65-66页 |
·家蚕 BmsHSP27.4 基因的芯片表达谱分析 | 第66-67页 |
3 讨论 | 第67-69页 |
第六章 家蚕 BmsHSP27.4 基因时空表达分析 | 第69-81页 |
1 材料与方法 | 第69-70页 |
·实验材料与取材 | 第69页 |
·总 RNA 的提取及第一链 cDNA 的合成 | 第69页 |
·引物设计 | 第69-70页 |
·家蚕 BmsHSP27.4 基因的时空表达分析 | 第70页 |
2 结果与分析 | 第70-80页 |
·家蚕 BmsHSP27.4 基因的时空表达差异 | 第70-77页 |
·家蚕 BmsHSP27.4 的性别表达差异 | 第77-80页 |
3 讨论 | 第80-81页 |
小结与展望 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-95页 |
研究生期间发表的文章、专利 | 第95-96页 |
附录 | 第96-116页 |
致谢 | 第116-117页 |