中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-24页 |
1.正反交遗传 | 第14-15页 |
·伴性遗传 | 第14页 |
·家蚕伴性遗传 | 第14-15页 |
·细胞质遗传 | 第15页 |
2.基因差异表达研究技术 | 第15-24页 |
·mRNA 差异显示及其应用 | 第15-17页 |
·mRNA 差异显示简介 | 第15-16页 |
·mRNA 差异显示技术在昆虫学研究中的应用 | 第16-17页 |
·消减杂交技术及研究进展 | 第17-20页 |
·消减杂交技术的应用 | 第18-19页 |
·消减杂交技术在药物研发中的应用 | 第19页 |
·SSH 技术在性别发育及肌肉品质研究中的应用 | 第19-20页 |
·SSH 技术在环境胁迫及生物修复研究中的应用 | 第20页 |
·基因表达系列分析(SAGE)技术 | 第20-24页 |
·基因表达系列分析(SAGE)概念及原理 | 第20页 |
·SAGE 技术的发展 | 第20-21页 |
·SAGE 技术的数据分析 | 第21-22页 |
·SAGE 在家蚕研究中的应用 | 第22-24页 |
第二章 研究方案 | 第24-26页 |
1 研究目的与意义 | 第24页 |
2 研究内容 | 第24-25页 |
3 技术路线 | 第25-26页 |
第三章 基本实验方法 | 第26-32页 |
1 常用材料与试剂 | 第26-28页 |
·蚕品种与菌种 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26页 |
·培养基 | 第26-27页 |
·缓冲液和常用溶液 | 第27页 |
·核酸电泳相关试剂 | 第27-28页 |
·生物信息学资源及分析软件 | 第28页 |
2 主要仪器设备 | 第28-29页 |
3 基本实验方法 | 第29-32页 |
·总 RNA 的抽提 | 第29页 |
·RNA 反转录 | 第29页 |
·PCR 扩增反应程序及扩增体系 | 第29页 |
·PCR 产物的回收与连接 | 第29-30页 |
·感受态细胞制备 | 第30页 |
·连接产物的转化 | 第30页 |
·重组质粒的筛选 | 第30页 |
·碱裂解法少量制备质粒 DNA | 第30-31页 |
·酶切反应 | 第31-32页 |
第四章 家蚕正反交 F1 代 SAGE 文库的构建与分析 | 第32-45页 |
1 材料与方法 | 第32-36页 |
·生物材料与仪器 | 第32页 |
·RNA 的抽提及 mRNA 的分离 | 第32页 |
·SAGE 文库的构建 | 第32-34页 |
·标签分析和注释 | 第34页 |
·差异基因的鉴定和功能分析 | 第34-35页 |
·差异基因的功能分析 | 第35-36页 |
2 结果与分析 | 第36-42页 |
·家蚕正反交 F1 代的 SAGE 文库基本信息 | 第36-38页 |
·家蚕正反交 F1代差异基因分析 | 第38页 |
·家蚕正反交 F1代显著性差异基因的功能分析 | 第38-40页 |
·家蚕正反交 F1代显著性差异基因的 Pathway 分析 | 第40-42页 |
3 讨论 | 第42-45页 |
第五章 差异基因的时空表达研究 | 第45-62页 |
1 材料和方法 | 第46页 |
·试验取材 | 第46页 |
·所用引物 | 第46页 |
2 结果与分析 | 第46-60页 |
·高温条件下线粒体硫氧还蛋白 2(BGIBMGA012029)的时空表达 | 第46-48页 |
·高温条件下谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)(BGIBMGA011438)的时空表达 | 第48-50页 |
·高温条件下家蚕素 E-1 前体(BGIBMGA000667)时空表达 | 第50-51页 |
·高温条件下抗菌肽(BGIBMGA000023)时空表达 | 第51-53页 |
·高温条件下假设蛋白(BGIBMGA003920)时空表达 | 第53-54页 |
·三个组织中 5 个基因在高温和常温下的表达分析 | 第54-60页 |
·高温和常温下 5 个基因在脂肪体中的表达分析 | 第54-56页 |
·高温和常温下 5 个基因在中肠中的表达分析 | 第56-58页 |
·丝腺中 5 个基因高温和常温下的表达分析 | 第58-60页 |
3 讨论 | 第60-62页 |
第六章 家蚕正反交 SAGE 文库中部分标签延长 | 第62-73页 |
1 材料与方法 | 第62-65页 |
·材料 | 第62页 |
·生物材料 | 第62页 |
·标签延伸 | 第62页 |
·方法 | 第62-65页 |
·双链 DNA 的合成原理 | 第62-63页 |
·双链 DNA 的合成过程 | 第63-64页 |
·标签(CATG 识别位点)酶切 | 第64页 |
·磁珠吸附 | 第64-65页 |
·加 Adapter A 接头 | 第65页 |
·PCR 扩增 | 第65页 |
·DNA 克隆、鉴定及测序 | 第65页 |
·序列分析 | 第65页 |
2 结果与分析 | 第65-71页 |
·RNA 的提取及质量测定 | 第65-66页 |
·双链 cDNA 合成及酶切 | 第66-67页 |
·GLGI 扩增结果 | 第67页 |
·序列分析 | 第67-71页 |
3 结论与讨论 | 第71-73页 |
第七章 综合结论 | 第73-75页 |
1 基于 SAGE 文库的正反交差异表达基因的比较及筛选 | 第73页 |
2 反交子代大多数基因的上调与其对环境适应能力较高有关 | 第73页 |
3 正反交差异基因的时空表达谱 | 第73-74页 |
4 无注释信息的差异性 tag 标签 GLGI 扩增延长 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-82页 |
研究生期间发表的文章、专利 | 第82-83页 |
致谢 | 第83-84页 |