中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
前言 | 第10-13页 |
材料与方法 | 第13-37页 |
一、 材料 | 第13-15页 |
(一) 供试蚊 | 第13页 |
(二) 细胞株 | 第13页 |
(三) 主要试剂 | 第13-14页 |
(四) 主要仪器设备 | 第14-15页 |
二、 方法 | 第15-37页 |
(一) 淡色库蚊 arrestin 基因全长克隆 | 第15-22页 |
(二) 生物信息学分析 | 第22页 |
(三) 实时荧光定量 PCR 分析 arrestin 在蚊抗性、敏感品系不同发育阶段的表达 | 第22-24页 |
(四) 高表达 arrestin 对蚊细胞溴氰菊酯敏感性的影响 | 第24-33页 |
(五) 抗性蚊细胞 arrestin 低表达对蚊溴氰菊酯敏感性的影响 | 第33-36页 |
(六) 统计分析 | 第36-37页 |
结果 | 第37-51页 |
一、 淡色库蚊 arrestin 基因克隆 | 第37-39页 |
(一) arrestin 基因 ORF 序列扩增 | 第37-38页 |
(二) arrestin 基因 5′端序列和 3′端序列的扩增 | 第38-39页 |
二、 生物信息学分析 | 第39-42页 |
(一) arrestin 基因及其编码氨基酸的序列分析 | 第39-40页 |
(二) arrestin 基因编码氨基酸同源性和分子进化分析 | 第40-42页 |
三、 实时荧光定量 PCR 分析 arrestin 在蚊抗性、敏感品系不同发育阶段的表达 | 第42-43页 |
四、 高表达 arrestin 对蚊细胞溴氰菊酯敏感性的影响 | 第43-48页 |
(一) 昆虫表达载体构建及重组质粒的抽提 | 第43-45页 |
(二) 实时荧光定量 PCR 验证瞬转效率 | 第45-46页 |
(三) Western blotting 鉴定 arrestin 的表达 | 第46-47页 |
(四) 高表达 arrestin 对蚊细胞溴氰菊酯敏感性的影响 | 第47页 |
(五) 实时定量 PCR 检测 CYP6A1 和 opsin 在各组细胞中的表达 | 第47-48页 |
五、 低表达 arrestin 对蚊细胞溴氰菊酯敏感性的影响 | 第48-51页 |
(一) 蚊细胞 arrestin 片段的克隆 | 第48-49页 |
(二) siRNA 干涉效率验证 | 第49页 |
(三) 低表达 arrestin 对蚊细胞溴氰菊酯敏感性的影响 | 第49-50页 |
(四) 实时定量 PCR 检测 CYP6A1 和 opsin 在各组细胞中的表达 | 第50-51页 |
讨论 | 第51-56页 |
一、 淡色库蚊 arrestin 全长基因克隆分析 | 第51-52页 |
二、 淡色库蚊 arrestin 与抗药性的关系及其机制探讨 | 第52-55页 |
三、 实验中的相关技术讨论 | 第55-56页 |
小结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-65页 |
综述 | 第65-78页 |
参考文献 | 第72-78页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第78-79页 |
附录 | 第79-81页 |
致谢 | 第81页 |