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淡色库蚊arrestin基因克隆及其在抗药性中作用的初步研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-10页
前言第10-13页
材料与方法第13-37页
 一、 材料第13-15页
  (一) 供试蚊第13页
  (二) 细胞株第13页
  (三) 主要试剂第13-14页
  (四) 主要仪器设备第14-15页
 二、 方法第15-37页
  (一) 淡色库蚊 arrestin 基因全长克隆第15-22页
  (二) 生物信息学分析第22页
  (三) 实时荧光定量 PCR 分析 arrestin 在蚊抗性、敏感品系不同发育阶段的表达第22-24页
  (四) 高表达 arrestin 对蚊细胞溴氰菊酯敏感性的影响第24-33页
  (五) 抗性蚊细胞 arrestin 低表达对蚊溴氰菊酯敏感性的影响第33-36页
  (六) 统计分析第36-37页
结果第37-51页
 一、 淡色库蚊 arrestin 基因克隆第37-39页
  (一) arrestin 基因 ORF 序列扩增第37-38页
  (二) arrestin 基因 5′端序列和 3′端序列的扩增第38-39页
 二、 生物信息学分析第39-42页
  (一) arrestin 基因及其编码氨基酸的序列分析第39-40页
  (二) arrestin 基因编码氨基酸同源性和分子进化分析第40-42页
 三、 实时荧光定量 PCR 分析 arrestin 在蚊抗性、敏感品系不同发育阶段的表达第42-43页
 四、 高表达 arrestin 对蚊细胞溴氰菊酯敏感性的影响第43-48页
  (一) 昆虫表达载体构建及重组质粒的抽提第43-45页
  (二) 实时荧光定量 PCR 验证瞬转效率第45-46页
  (三) Western blotting 鉴定 arrestin 的表达第46-47页
  (四) 高表达 arrestin 对蚊细胞溴氰菊酯敏感性的影响第47页
  (五) 实时定量 PCR 检测 CYP6A1 和 opsin 在各组细胞中的表达第47-48页
 五、 低表达 arrestin 对蚊细胞溴氰菊酯敏感性的影响第48-51页
  (一) 蚊细胞 arrestin 片段的克隆第48-49页
  (二) siRNA 干涉效率验证第49页
  (三) 低表达 arrestin 对蚊细胞溴氰菊酯敏感性的影响第49-50页
  (四) 实时定量 PCR 检测 CYP6A1 和 opsin 在各组细胞中的表达第50-51页
讨论第51-56页
 一、 淡色库蚊 arrestin 全长基因克隆分析第51-52页
 二、 淡色库蚊 arrestin 与抗药性的关系及其机制探讨第52-55页
 三、 实验中的相关技术讨论第55-56页
小结第56-57页
参考文献第57-65页
综述第65-78页
 参考文献第72-78页
攻读学位期间发表文章情况第78-79页
附录第79-81页
致谢第81页

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