| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-10页 |
| 图表目录 | 第10-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 文献综述 | 第12-30页 |
| 1 Ii链的研究概况 | 第12-20页 |
| ·Ii链的分子结构 | 第12-14页 |
| ·Ii链 的表达与调控 | 第14页 |
| ·Ii链的功能 | 第14-19页 |
| ·Ii链在MHCⅡ分子抗原提呈中的作用 | 第14-17页 |
| ·Ii链胞浆尾部信号调控MHC-Ⅱ-Ii复合物的分选/内化 | 第17-19页 |
| ·Ii链与疾病的关系 | 第19-20页 |
| 2 新城疫病毒的研究概况 | 第20-27页 |
| ·NDV分子生物学特征 | 第21-22页 |
| ·NDV的至病性及其分子基础 | 第22-23页 |
| ·NDV的抗原性与基因型 | 第23页 |
| ·ND的分子流行病学研究及防制 | 第23-24页 |
| ·F蛋白的研究 | 第24-27页 |
| ·F蛋白的基本结构 | 第24-25页 |
| ·F蛋白的抗原表位 | 第25-26页 |
| ·F蛋白基因工程疫苗研究现状 | 第26页 |
| ·F蛋白表位疫苗的开发和应用 | 第26-27页 |
| 3 国内外研究现状 | 第27-28页 |
| 4 研究的目的与意义 | 第28-30页 |
| 引言 | 第30-32页 |
| 正文 | 第32-84页 |
| 第一章 Ii链胞浆区定点突变及其定位检测 | 第32-55页 |
| 1 材料与方法 | 第32-45页 |
| ·实验材料 | 第32-35页 |
| ·实验方法 | 第35-45页 |
| ·鸡Ii链胞浆区氨基酸定点突变 | 第35-41页 |
| ·截短的野生型Ii(1-83aa)真核表达载体构建 | 第41-42页 |
| ·突变Ii基因的定位检测 | 第42-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-50页 |
| ·胞浆区基因突变 | 第45-46页 |
| ·两个亮氨酸是鸡Ii链细胞内定位所必须的 | 第46-47页 |
| ·两个亮氨酸邻近的特定氨基酸在鸡Ii分子细胞内定位中的作用也是必需的 | 第47-48页 |
| ·第19位的脯氨酸可能是维持鸡Ii分子结构完整性的重要残基 | 第48-50页 |
| 3 讨论 | 第50-54页 |
| ·利用大引物PCR进行高效快速定点诱变 | 第50页 |
| ·定位基元周围氨基酸的作用 | 第50-54页 |
| 4 结论 | 第54-55页 |
| 第二章 鸡Ii链跨膜区氨基酸的定点突变及其功能检测 | 第55-67页 |
| 1 材料和方法 | 第55-62页 |
| ·实验材料 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55-62页 |
| ·真核表达质粒的构建 | 第55-56页 |
| ·突变载体的构建 | 第56-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-64页 |
| ·重组质粒的构建与鉴定 | 第62页 |
| ·跨膜区段基因突变 | 第62-63页 |
| ·Ii链与MHCⅡ分子的相互作用 | 第63-64页 |
| 3 讨论 | 第64-66页 |
| ·改进的大引物突变法 | 第64页 |
| ·载体的选择 | 第64页 |
| ·跨膜区段对形成三聚体的影响 | 第64-66页 |
| 4 结论 | 第66-67页 |
| 第三章 NDVF343抗原表位替代Ii链CLIP的内源性靶向DNA疫苗的构建及免疫应答研究 | 第67-84页 |
| 1 材料和方法 | 第67-77页 |
| ·实验材料 | 第67页 |
| ·实验方法 | 第67-77页 |
| ·缺失CLIP区段的Ii基因片段真核表达质粒的构建 | 第67-69页 |
| ·NDV-F343蛋白抗原表位非靶向DNA疫苗的构建 | 第69-70页 |
| ·NDV-F343蛋白抗原表位替代Ii-CLIP的内源性靶向DNA疫苗构建 | 第70-73页 |
| ·大量超纯质粒的制备:免疫小鼠用 | 第73-74页 |
| ·NDV-F343蛋白抗原表位替代Ii-CLIP内源性靶向DNA疫苗免疫应答研究 | 第74-77页 |
| 2 结果与分析 | 第77-80页 |
| ·构建缺失CLIP区段的Ii基因片段真核表达质粒 | 第77页 |
| ·构建NDV-F343蛋白抗原表位非靶向DNA疫苗 | 第77页 |
| ·构建NDV-F343蛋白抗原表位替代Ii链CLIP的内源性靶向DNA疫苗 | 第77页 |
| ·鼠抗F343蛋白多克隆抗体效价测定 | 第77-78页 |
| ·Westemblot分析抗体的特异性 | 第78-80页 |
| 3 讨论 | 第80-83页 |
| ·重叠延伸产生特异位点突变 | 第80-81页 |
| ·去磷酸化处理 | 第81页 |
| ·Ii基因在疫苗设计中的应用 | 第81-83页 |
| 4 结论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-95页 |
| 致谢 | 第95-97页 |
| 作者简介 | 第97-98页 |
| 已发论文 | 第98-117页 |
