缩略语表 | 第1-8页 |
第一部分摘要 | 第8-10页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
第二部分摘要 | 第10-12页 |
中文摘要 | 第10-11页 |
英文摘要 | 第11-12页 |
第一部分:hMIC-1抗体的研制、鉴定 | 第12-51页 |
前言 | 第13-16页 |
实验流程 | 第16-17页 |
材料与方法 | 第17-34页 |
一、实验材料 | 第17页 |
二、主要试剂 | 第17-21页 |
三、主要仪器 | 第21-22页 |
四、实验方法 | 第22-34页 |
1 抗原准备 | 第22页 |
2 单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 | 第22-31页 |
·免疫方案 | 第22-23页 |
·融合前小鼠免疫效果监测 | 第23-24页 |
·筛选抗体的ELISA方法的建立 | 第23页 |
·小鼠免疫血清效价测定 | 第23-24页 |
·细胞融合、筛选及克隆 | 第24-26页 |
·NS1细胞的准备 | 第24页 |
·饲养层细胞的制备 | 第24页 |
·脾细胞的制备 | 第24-25页 |
·细胞融合 | 第25页 |
·融合细胞的选择性培养 | 第25页 |
·阳性杂交瘤细胞的克隆化培养 | 第25-26页 |
·杂交瘤细胞的冻存和复苏 | 第26页 |
·单克隆抗体的制备 | 第26-27页 |
·细胞接种 | 第26页 |
·抗体纯化 | 第26-27页 |
·杂交瘤细胞株及分泌的单克隆抗体的鉴定 | 第27-30页 |
·单克隆抗体免疫球蛋白类型与亚型的鉴定 | 第27页 |
·单克隆抗体腹水效价测定 | 第27页 |
·单克隆抗体特异性鉴定 | 第27-29页 |
·单克隆抗体亲和力的测定 | 第29-30页 |
·单克隆抗体抗原结合位点测定 | 第30页 |
·单克隆抗体稳定性实验 | 第30页 |
·免疫组化化学方法 | 第30-31页 |
3 hMIC-1兔多克隆抗体的制备 | 第31-34页 |
·实验动物 | 第31页 |
·免疫方案 | 第31-32页 |
·抗原乳剂的制备 | 第31-32页 |
·免疫途径、剂量和免疫周期 | 第32页 |
·血清抗体效价的检测 | 第32-33页 |
·双向免疫扩散法 | 第32页 |
·ELISA法 | 第32-33页 |
·抗血清的纯化 | 第33页 |
·兔多抗特异性的测定 | 第33-34页 |
·夹心ELISA方法的建立 | 第34页 |
·抗体的生物素化标记 | 第34页 |
·夹心ELISA方法的建立 | 第34页 |
结果 | 第34-43页 |
1 小鼠免疫血清效价及特异性检测 | 第34-35页 |
2 细胞融合、筛选及克隆 | 第35-36页 |
3 2G7抗体制备与纯化 | 第36-37页 |
4 单抗鉴定 | 第37-41页 |
·抗体亚型测定 | 第37页 |
·2G7抗体特异性鉴定 | 第37-38页 |
·单克隆抗体亲和力的测定 | 第38-39页 |
·包被抗原及酶标抗体浓度的选择 | 第38页 |
·亲和力测定 | 第38-39页 |
·单克隆抗体稳定性的测定 | 第39-40页 |
·酸碱稳定性 | 第39页 |
·热稳定性 | 第39-40页 |
·杂交瘤细胞稳定性鉴定 | 第40页 |
·单抗相加实验 | 第40页 |
·2G7抗体在免疫组织化学中的应用 | 第40-41页 |
5 hMIC-1兔多克隆抗体的制备与鉴定 | 第41-43页 |
·血清抗体效价的检测及抗体纯化 | 第41-42页 |
·免多抗特异性的测定 | 第42-43页 |
·夹心ELISA法的建立 | 第43页 |
讨论 | 第43-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
第二部分 胰腺癌患者血清中MIC-1升高的临床价值 | 第51-62页 |
前言 | 第52页 |
材料和方法 | 第52-55页 |
一 实验材料 | 第52-54页 |
1 样本采集 | 第52页 |
2 病例资料 | 第52-53页 |
3 主要试剂 | 第53页 |
4主要仪器 | 第53页 |
5主要溶液的配制 | 第53-54页 |
二 实验方法 | 第54-55页 |
结果 | 第55-57页 |
1 胰腺癌患者血清中MIC-1表达水平 | 第55页 |
2 MIC-1与CA199在胰腺癌临床诊断中的比较 | 第55-56页 |
3 胰腺癌患者血清中MIC-1表达水平与胰腺癌临床病理各参数的相关性分析 | 第56-57页 |
讨论 | 第57-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-62页 |
综述 | 第62-77页 |
参考文献 | 第70-77页 |
致谢 | 第77页 |