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hMIC-1抗体的研制、鉴定及胰腺癌患者血清中MIC-1升高的临床价值

缩略语表第1-8页
第一部分摘要第8-10页
 中文摘要第8-9页
 英文摘要第9-10页
第二部分摘要第10-12页
 中文摘要第10-11页
 英文摘要第11-12页
第一部分:hMIC-1抗体的研制、鉴定第12-51页
 前言第13-16页
 实验流程第16-17页
 材料与方法第17-34页
  一、实验材料第17页
  二、主要试剂第17-21页
  三、主要仪器第21-22页
  四、实验方法第22-34页
   1 抗原准备第22页
   2 单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立第22-31页
   ·免疫方案第22-23页
   ·融合前小鼠免疫效果监测第23-24页
     ·筛选抗体的ELISA方法的建立第23页
     ·小鼠免疫血清效价测定第23-24页
   ·细胞融合、筛选及克隆第24-26页
     ·NS1细胞的准备第24页
     ·饲养层细胞的制备第24页
     ·脾细胞的制备第24-25页
     ·细胞融合第25页
     ·融合细胞的选择性培养第25页
     ·阳性杂交瘤细胞的克隆化培养第25-26页
     ·杂交瘤细胞的冻存和复苏第26页
   ·单克隆抗体的制备第26-27页
     ·细胞接种第26页
     ·抗体纯化第26-27页
   ·杂交瘤细胞株及分泌的单克隆抗体的鉴定第27-30页
     ·单克隆抗体免疫球蛋白类型与亚型的鉴定第27页
     ·单克隆抗体腹水效价测定第27页
     ·单克隆抗体特异性鉴定第27-29页
     ·单克隆抗体亲和力的测定第29-30页
     ·单克隆抗体抗原结合位点测定第30页
     ·单克隆抗体稳定性实验第30页
   ·免疫组化化学方法第30-31页
   3 hMIC-1兔多克隆抗体的制备第31-34页
   ·实验动物第31页
   ·免疫方案第31-32页
     ·抗原乳剂的制备第31-32页
     ·免疫途径、剂量和免疫周期第32页
   ·血清抗体效价的检测第32-33页
     ·双向免疫扩散法第32页
     ·ELISA法第32-33页
   ·抗血清的纯化第33页
   ·兔多抗特异性的测定第33-34页
   ·夹心ELISA方法的建立第34页
     ·抗体的生物素化标记第34页
     ·夹心ELISA方法的建立第34页
 结果第34-43页
  1 小鼠免疫血清效价及特异性检测第34-35页
  2 细胞融合、筛选及克隆第35-36页
  3 2G7抗体制备与纯化第36-37页
  4 单抗鉴定第37-41页
   ·抗体亚型测定第37页
   ·2G7抗体特异性鉴定第37-38页
   ·单克隆抗体亲和力的测定第38-39页
     ·包被抗原及酶标抗体浓度的选择第38页
     ·亲和力测定第38-39页
   ·单克隆抗体稳定性的测定第39-40页
     ·酸碱稳定性第39页
     ·热稳定性第39-40页
     ·杂交瘤细胞稳定性鉴定第40页
   ·单抗相加实验第40页
   ·2G7抗体在免疫组织化学中的应用第40-41页
  5 hMIC-1兔多克隆抗体的制备与鉴定第41-43页
   ·血清抗体效价的检测及抗体纯化第41-42页
   ·免多抗特异性的测定第42-43页
   ·夹心ELISA法的建立第43页
 讨论第43-46页
 结论第46-47页
 参考文献第47-51页
第二部分 胰腺癌患者血清中MIC-1升高的临床价值第51-62页
 前言第52页
 材料和方法第52-55页
  一 实验材料第52-54页
   1 样本采集第52页
   2 病例资料第52-53页
   3 主要试剂第53页
   4主要仪器第53页
   5主要溶液的配制第53-54页
  二 实验方法第54-55页
 结果第55-57页
  1 胰腺癌患者血清中MIC-1表达水平第55页
  2 MIC-1与CA199在胰腺癌临床诊断中的比较第55-56页
  3 胰腺癌患者血清中MIC-1表达水平与胰腺癌临床病理各参数的相关性分析第56-57页
 讨论第57-59页
 结论第59-60页
 参考文献第60-62页
综述第62-77页
 参考文献第70-77页
致谢第77页

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