中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 前言 | 第12-30页 |
1 植物寄生线虫的危害及主要类群 | 第12页 |
2 植物寄生线虫的防治及存在问题 | 第12-13页 |
3 植物寄生线虫的生物防治研究 | 第13-21页 |
4 新秀丽小杆线虫的研究概况 | 第21-27页 |
5 本研究的目的和意义 | 第27-30页 |
第二章 新秀丽小杆线虫(C.elegans)的饲养和生物测定 | 第30-43页 |
1 材料与方法 | 第30-36页 |
2 结果与分析 | 第36-41页 |
·线虫的扩大培养 | 第36页 |
·生物测定 | 第36-38页 |
·虫体感染形态观测 | 第38-40页 |
·不同菌株伴孢晶体毒素对线虫的半致死终浓度LC_(50) | 第40-41页 |
3 讨论 | 第41-43页 |
第三章 Bt 010的最适培养基筛选与基因鉴定 | 第43-51页 |
1 材料与方法 | 第43-47页 |
2 结果与分析 | 第47-50页 |
·培养基筛选 | 第47-48页 |
·总DNA电泳检测 | 第48页 |
·Bt 010中cry 1Ia鉴定 | 第48-50页 |
3 讨论 | 第50-51页 |
第四章 cry 1Ia基因克隆表达和活性测定 | 第51-62页 |
1 材料与方法 | 第51-58页 |
2 结果与分析 | 第58-61页 |
·cry 1Ia基因在E.coli中的表达 | 第58-59页 |
·表达产物cry 1Ia蛋白的杀线虫活性 | 第59-60页 |
·油镜观测结果 | 第60-61页 |
3 讨论 | 第61-62页 |
第五章 活性蛋白纯化、肽谱分析以及线虫超微结构的观测 | 第62-74页 |
1 材料与方法 | 第62-68页 |
2 结果与分析 | 第68-72页 |
·毒素蛋白的纯化结果 | 第68-69页 |
·蛋白测定结果 | 第69-71页 |
·Bt 010总蛋白作用后线虫超微形态的观测 | 第71-72页 |
3 讨论 | 第72-74页 |
第六章 几丁质酶基因的克隆、表达和活性测定 | 第74-83页 |
1 材料与方法 | 第74-77页 |
2 结果与分析 | 第77-82页 |
·克隆质粒的单双酶切 | 第77-78页 |
·测序结果 | 第78-79页 |
·蛋白质表达SDS-PAGE图谱 | 第79-80页 |
·生物测定 | 第80-81页 |
·几丁质活性测定 | 第81-82页 |
3 讨论 | 第82-83页 |
第七章 根结线虫的生物测定和安全性检测 | 第83-88页 |
1 材料与方法 | 第83-85页 |
2 结果与分析 | 第85-86页 |
·Bt chitinase对根结线虫的作用 | 第85-86页 |
·DNA Ladder检测 | 第86页 |
3 讨论 | 第86-88页 |
参考文献 | 第88-98页 |
附录1 论文中使用的缩写词及中英文对照 | 第98-99页 |
附录2 实验中使用的贮存液、缓冲液、培养基配制 | 第99-101页 |
附录3 分子设计辅助软件和网上资源 | 第101页 |
附录4 实验中常用的核酸、蛋白质换算(参照TaKaRa) | 第101-102页 |
附录5 调整硫酸铵溶液饱和度计算表(25℃) | 第102-103页 |
附录6 本论文中使用的基因工程菌株、载体特性及克隆、表达载体的酶切图谱 | 第103-105页 |
附录7 在NCBI上登录的序列以及质谱图 | 第105-125页 |
附录8 读博期间发表、撰写的学术论文和申请的发明专利 | 第125-127页 |
致谢 | 第127页 |