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无胶筛分毛细管电泳检测基因突变的方法学研究及其在胃癌中的应用

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 毛细管电泳在基因突变及多态性分析中的研究背景第12-33页
 第一节 胃癌发生相关基因及其检测方法研究进展第12-16页
     ·p53基因第13-14页
     ·ras基因第14-15页
     ·其它基因第15页
     ·基因异常检测方法简介第15-16页
 第二节 无胶筛分毛细管电泳技术研究进展第16-22页
     ·筛分机理第16-19页
       ·高分子溶液理论第17页
       ·DNA在无胶筛分介质(高分子溶液)中的分离理论第17-19页
     ·筛分介质第19-21页
     ·毛细管涂层技术第21-22页
     ·其他因素第22页
 第三节 NGS-CE在基因突变及多态性分析中的应用第22-27页
     ·限制性片段长度多态性分析第23页
     ·单链构象多态性分析第23-24页
     ·高效毛细管电泳-限制性内切酶指纹(CE-REF)分析法第24页
     ·其他基因分析方法第24页
     ·NGS-CE与各种基因突变检测技术联用在肿瘤相关基因研究中的应用第24-25页
     ·结语第25-27页
 参考文献第27-33页
第二章 毛细管无胶筛分电泳中不同筛分介质对DNA分离的方法学研究第33-69页
 第一节 共价涂层下甲基纤维素对不同DNA片段的分离研究第33-47页
     ·前言第33-34页
     ·实验部分第34-35页
       ·主要仪器设备及试剂第34页
       ·毛细管柱的涂层第34页
       ·电渗流第34-35页
       ·NGS-CE分离DNA Marker的电泳条件第35页
       ·分离度定义第35页
     ·结果与讨论第35-47页
       ·电渗流第35-36页
       ·MC分离pUC19 DNA/Msp Ⅰ(HpaⅡ)DNA Marker第36-44页
       ·MC对PBR322/BsuRI DNA Marker分离的影响第44-45页
       ·MC对FastRuler~(TM)DNA Ladder分离的影响第45-46页
       ·结论第46-47页
 第二节 动态涂层下聚乙烯吡咯烷酮(PVP)对不同DNA片段的分离研究第47-57页
     ·前言第47页
     ·实验部分第47页
       ·主要仪器设备及试剂第47页
       ·毛细管动态涂层方法第47页
       ·NGS-CE分离DNA Marker的电泳条件和分离度定义第47页
     ·结果与讨论第47-57页
       ·PVP分离FastRuler~(TM)DNA Ladder第47-54页
       ·PVP对pUC19 DNA/Msp Ⅰ(Hpa Ⅱ)DNA Marker和PBR322/BsuR Ⅰ(HaeⅢ)DNA Marker分离的影响第54-56页
       ·结论第56-57页
 第三节 动态涂层下聚环氧已烷(PEO)对分离不同DNA片段的研究第57-67页
     ·前言第57页
     ·实验部分第57页
       ·主要仪器设备及试剂第57页
       ·毛细管动态涂层方法第57页
       ·NGS-CE分离DNA Marker的电泳条件和分离度定义第57页
     ·结果与讨论第57-67页
       ·PEO对pUC19 DNA/Msp Ⅰ(HpaⅡ)DNA Marker分离的影响第58-64页
       ·PEO对PBR322/BsuR Ⅰ(HaeⅢ)DNA Marker分离的影响第64-65页
       ·PEO对FastRuler~(TM)DNA Ladder分离的影响第65-66页
       ·结论第66-67页
 本章小结第67-68页
 参考文献第68-69页
第三章 NGS-CE-RFLP检测胃癌组织中p53基因和ras基因点突变第69-85页
   ·实验部分第69-75页
     ·主要仪器与试剂第69-70页
     ·实验方法第70-75页
       ·组织基因组DNA的提取第70页
       ·PCR扩增引物设计第70-72页
       ·PCR扩增第72页
       ·PCR产物的平板凝胶电泳检测第72-73页
       ·PCR扩增产物的纯化第73页
       ·PCR产物的限制性酶切第73-75页
       ·毛细管柱的涂层第75页
       ·NGS-CE-RFLP分析p53和ras基因酶切产物第75页
       ·统计学处理第75页
   ·结果和讨论第75-83页
     ·基因组DNA提取结果分析第75-76页
     ·PCR扩增结果第76页
     ·PCR扩增产物纯化结果第76-77页
     ·p53基因突变检测第77-79页
     ·ras基因突变检测第79-81页
     ·p53和ras基因在胃癌中的突变率第81-82页
     ·不同部位胃癌的p53和ras基因突变率第82-83页
 本章小结第83-84页
 参考文献第84-85页
论文总结第85-87页
缩略词表第87-88页
在学期间研究成果第88-89页
致谢第89页

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