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贵州白山羊GDF9基因多态性及其与高繁殖力关系的研究

中文摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
一 前言第8-28页
   ·候选基因分析方法概述第8-12页
     ·候选基因的选择第9页
     ·引物设计及基因相应片段的扩增第9页
     ·候选基因多态位点的寻找第9-10页
     ·候选基因与表型性状间的连锁分析第10页
     ·候选基因法的优缺点第10-12页
   ·GDF9基因研究进展第12-19页
     ·GDF9的结构、功能及调控第12-13页
     ·GDF9基因在染色体的位置第13-14页
     ·GDF9基因的结构第14-15页
     ·GDF9基因的发育性表达第15页
     ·GDF9基因的多态性第15-16页
     ·GDF9基因与FSH的关系第16-17页
     ·GDF9基因与GDF-9B基因在卵巢功能中的协同作用第17-18页
     ·GDF9基因与哺乳动物繁殖性能的关系第18-19页
   ·候选基因DNA多态性检测方法第19-24页
     ·限制性内切酶片段长度多态性(Restriction Fragment Length polymorphism,RFLP)第19-22页
     ·单链构象多态性(PCR-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)第22-24页
   ·贵州白山羊第24-28页
     ·品种的形成第24-25页
     ·品种分布和产区概况第25页
     ·品种特点第25-26页
     ·生产性能第26-28页
二 研究的目的与意义第28-29页
三 材料与方法第29-42页
   ·实验材料第29-33页
     ·实验样本的来源及采样方法第29页
     ·主要试剂第29-30页
     ·实验仪器第30页
     ·提取动物基因组DNA用缓冲液和试剂第30-31页
     ·琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶电泳相关试剂第31-32页
     ·感受态细胞制备及转化相关试剂第32-33页
   ·实验方法第33-41页
     ·实验样品DNA的提取第33-35页
     ·PCR引物的选择及PCR反应条件的确定第35-36页
     ·琼脂糖凝胶电泳第36-37页
     ·GDF9基因FecG~H突变的PCR-RFLP分析第37页
     ·GDF9基因外显子2的PCR-SSCP分析第37-38页
     ·GDF9基因外显子2及其不同基因型的克隆测序第38-41页
   ·分析软件第41-42页
四 结果与分析第42-51页
   ·基因组的提取结果第42页
   ·GDF9基因外显子2扩增与分析第42-46页
     ·GDF9基因外显子2PCR扩增结果第42-43页
     ·重组质粒的构建和鉴定第43页
     ·GDF9基因外显子2的核苷酸序列测定及分析第43-46页
   ·GDF9基因FECG~H突变序列的扩增及PCR-RFLP多态性检测第46-48页
     ·GDF9基因FecG~H突变序列的PCR扩增第46-47页
     ·PCR-RFLP分析第47-48页
   ·GDF9基因外显子2成熟肽序列的扩增及PCR-SSCP多态性分析第48-51页
     ·GDF9基因外显子2成熟肽序列的PCR扩增第48页
     ·PCR-SSCP分析第48-49页
     ·GDF9不同基因型的碱基序列分析第49页
     ·GDF9不同基因型的三维结构分析第49-50页
     ·GDF9基因外显子2的基因型频率和基因频率第50-51页
五 讨论第51-56页
   ·实验材料的选择第51页
   ·贵州白山羊GDF9基因外显子2分析第51页
   ·GDF9基因的多态性分析第51-53页
   ·影响PCR-SSCP检测的因素第53-56页
     ·PCR产物的质量第53-54页
     ·DNA片段中点突变的位置对SSCP的影响第54页
     ·非变性聚丙烯酰胺凝胶成分第54页
     ·上样缓冲液与变性第54-55页
     ·电泳条件第55页
     ·其它因素第55-56页
小结第56-57页
参考文献第57-64页
附录第64-66页
 附录一第64-65页
 附录二第65-66页
致谢第66-68页

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