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采后荔枝果皮衰老过程中生理变化与基因差异表达分析

中文摘要第1-6页
Abstract第6-13页
1 前言第13-52页
   ·荔枝产业概述第13-14页
   ·荔枝采后生物学概述第14-38页
     ·荔枝果实概述第14-15页
     ·荔枝果实的呼吸作用与乙烯释放规律第15-16页
     ·采后荔枝果皮褐变机理第16-27页
     ·采后荔枝果肉品质的变化第27-28页
     ·荔枝采后保鲜贮运技术第28-37页
     ·荔枝采后生物学研究的问题与展望第37-38页
   ·荔枝采后分子生物学研究进展第38-44页
     ·组织培养再生体系的研究进展第38-41页
     ·荔枝重要功能基因的克隆与表达分析第41-42页
     ·荔枝遗传转化研究进展第42-43页
     ·研究展望第43-44页
   ·抑制差减杂交技术及其在植物研究中的应用第44-48页
     ·抑制差减杂交技术的原理第44-46页
     ·抑制差减杂交技术的应用第46-48页
   ·cDNA 微阵列技术及其在植物研究中的应用第48-50页
     ·cDNA 微阵列技术的原理及其特点第48页
     ·cDNA 微阵列技术的应用第48-50页
   ·本研究的目的、意义及技术路线第50-52页
2 采后荔枝果皮衰老过程中一些生理变化的研究第52-68页
   ·材料与方法第52-56页
     ·材料第52页
     ·测定指标及方法第52-56页
   ·结果与分析第56-65页
     ·果皮褐变指数与好果率的变化第56页
     ·果皮水分含量变化第56-57页
     ·果皮色素及总酚含量变化第57-58页
     ·果皮pH 值的变化第58页
     ·果皮丙二醛含量和相对电导率的变化第58页
     ·果皮PPO 与POD 活性的变化第58-59页
     ·果皮LOX 活性的变化第59页
     ·果皮Vc 与GSH 含量的变化第59页
     ·果皮APX、CAT、GR 及SOD 活性的变化第59-60页
     ·果皮褐变相关指标的相关分析第60-64页
     ·褐变相关因素的逐步回归分析与通径分析第64页
     ·果皮衰老阶段的聚类分析第64-65页
   ·讨论第65-67页
   ·本章小结第67-68页
3 成熟荔枝果实的果皮总RNA 的提取及cDNA 文库的构建第68-81页
   ·材料与方法第68-75页
     ·材料第68页
     ·主要试剂第68页
     ·实验方法第68-75页
   ·结果与分析第75-78页
     ·RNA 提取第75-77页
     ·双链cDNA 合成的最佳循环数的确定及ds-cDNA 的分部回收第77页
     ·cDNA 文库的滴度第77-78页
     ·cDNA 文库的插入片段大小第78页
   ·讨论第78-80页
   ·本章小结第80-81页
4 cDNA 微阵列技术检测采后荔枝果皮衰老过程中差异表达基因及荔枝组织特异性表达基因第81-130页
   ·材料与方法第81-91页
     ·材料第81页
     ·方法第81-91页
   ·结果分析与讨论第91-128页
     ·cDNA 微阵列杂交信号及数据质量分析第91-93页
     ·芯片杂交分析结果第93页
     ·差异表达基因的EST 序列分析第93-95页
     ·荔枝果皮采后衰老过程中差异表达基因分析第95-127页
     ·用cDNA 微阵列筛选组织特异性表达基因第127-128页
   ·本章小结第128-130页
5 用抑制差减杂交技术克隆采后荔枝果皮衰老相关基因第130-145页
   ·材料与方法第130-137页
     ·材料第130页
     ·主要试剂第130页
     ·方法第130-137页
   ·结果与分析第137-143页
     ·RNA 的质量第137-138页
     ·LD-PCR 循环数的确定第138页
     ·抑制差减杂交的PCR 扩增结果第138-139页
     ·抑制差减文库的构建及其插入片段的大小第139页
     ·序列处理与拼接第139页
     ·用cDNA 微阵列筛选抑制差减杂交文库中的差异表达基因第139-140页
     ·抑制差减杂交文库中差异表达的基因及其表达第140-142页
     ·抑制差减杂交文库筛选结果与cDNA 文库筛选结果比较第142-143页
   ·讨论第143页
   ·本章小结第143-145页
6 总的讨论第145-147页
   ·关于采后荔枝果皮衰老的进程第145-146页
   ·关于荔枝影响荔枝果皮衰老的重要基因和代谢途径的探讨第146页
   ·下一步的研究计划第146-147页
7 结论第147-148页
参考文献第148-161页
附录Ⅰ 引物及比对结果第161-202页
 附表1 RT-PCR 检测一些基因表达时的引物序列第161-162页
 附表2 在采后荔枝果皮衰老过程中差异表达的已知功能基因的Blastx 结果及其表达第162-192页
 附表3 RT-PCR 检测一些SSH 文库基因表达时的引物序列第192-193页
 附表4 采后0h 与32h 荔枝果皮的抑制差减杂交文库测序获得的基因第193-202页
附录Ⅱ 一些基因片段的cDNA 序列第202-205页
附录Ⅲ 在读博士期间承担的与本研究有关的课题与发表的论文第205-206页
致谢第206页

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