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水稻WRKY转录因子OsWRKY13的功能鉴定和调控机理研究

缩略词表第1-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-38页
   ·抗病反应的基本概念第12-13页
   ·植物抗病反应的信号途径第13-19页
     ·R基因介导的抗病信号途径第14-16页
     ·植物水杨酸的合成代谢及其介导的系统性获得抗性第16-17页
     ·植物茉莉酸与乙烯的合成代谢及其介导的抗病反应研究第17-19页
   ·植物抗病信号途径的复杂性第19页
   ·水稻抗病研究进展第19-20页
   ·WRKY类转录因子研究进展第20-31页
     ·WRKY类转录因子结构与分类第21-23页
     ·WRKY类转录因子起源与进化第23-24页
     ·WRKY类转录因子的生物学功能第24-28页
     ·WRKY转录因子的调控方式第28-30页
     ·水稻WRKY类转录因子研究概况第30-31页
   ·植物抗病信号途径及WRKY转录因子的研究手段第31-37页
     ·功能获得与缺失第32-33页
     ·突变体技术第33页
     ·蛋白质/蛋白质及蛋白质/DNA互作研究技术第33-34页
     ·串联亲和纯化标签技术第34-35页
     ·染色质免疫共沉淀第35页
     ·芯片技术与生物信息学第35-37页
   ·研究目的和意义第37-38页
2 材料与方法第38-55页
   ·水稻材料与基因来源第38-40页
     ·水稻材料与来源第38页
     ·基因OsWRKY13的克隆与分离第38页
     ·其它病程相关蛋白基因第38-40页
   ·载体构建及农杆菌介导的遗传转化第40-42页
     ·OsWRKY13超量表达载体构建第40页
     ·OsWRKY13反义抑制表达载体构建第40-42页
     ·农杆菌介导的遗传转化第42页
   ·病原物接种及病情调查第42-43页
     ·白叶枯病接种与调查第42页
     ·稻瘟病接种与调查第42-43页
   ·外源信号分子与非生物胁迫处理第43页
     ·水稻材料准备第43页
     ·胁迫处理第43页
   ·核酸操作及分子杂交分析第43-48页
     ·DNA抽提与Southern杂交分析第43-44页
     ·RNA抽提与Northern杂交分析第44页
     ·RT-PCR和定量RT-PCR分析第44-48页
   ·基因枪介导的瞬时表达分析即亚细胞定位第48页
   ·酵母单杂交转录激活实验第48-51页
   ·核蛋白抽提与原核重组蛋白表达第51页
   ·凝胶阻滞和蛋白质去磷酸化实验第51-52页
   ·内源水杨酸和茉莉酸测定第52页
   ·DNA序列测定与分析第52-53页
   ·水稻全基因组芯片分析第53-54页
   ·启动子区域顺式调控元件分析和预测第54-55页
3 结果与分析第55-98页
   ·OsWRKY13基因结构与特性第55-56页
     ·基因结构分析第55-56页
     ·不同组织中基因表达模式第56页
   ·OsWRKY13介导水稻对白叶枯病和稻瘟病的抗性第56-61页
     ·OsWRKY13介导水稻对白叶枯病的抗性第56-60页
     ·超量表达OsWRKY13增强水稻对稻瘟病的抗性第60-61页
   ·OsWRKY13对不同病程相关蛋白基因表达的影响第61-65页
     ·OsWRKY13转基因植株中病程相关蛋白基因的表达分析第61-63页
     ·OsWRKY13转基因植株中其它抗病相关基因的表达分析第63-65页
   ·OsWRKY13亚细胞定位和转录激活实验第65-69页
     ·OsWRKY13定位于细胞核第65页
     ·OsWRKY13具有转录激活功能第65-67页
     ·OsWRKY13能与不同类型的W-盒结合第67-69页
   ·转基因植株内源水杨酸和茉莉酸含量分析第69-70页
   ·不同信号分子处理和非生物胁迫下OsWRKY13表达分析第70-71页
     ·抗病信号分子对OsWRKY13的诱导表达第70-71页
     ·OsWRKY13的表达受负调控因子调控第71页
     ·多种非生物胁迫对OsWRKY13表达的影响第71页
   ·OsWRKY13超量表达植株水稻全基因组芯片分析第71-98页
     ·差异表达基因与功能分类第72-86页
     ·超量表达OsWRKY13植株中差异表达的转录因子第86-87页
     ·差异表达基因启动子区域已知顺式调控元件的分析第87-90页
     ·差异表达基因启动子区域保守模体的预测第90-92页
     ·芯片中WRKY基因家族成员的分析以及与拟南芥AtWRKY70转基因植株表达谱的比较分析第92-98页
4 讨论第98-108页
   ·OsWRKY13抗病反应调控机理的探讨第98-104页
     ·OsWRKY13存在两种形态调控下游抗病相关基因的表达第98-99页
     ·OsWRKY13参与两个相互拮抗的信号途径的传导第99-102页
     ·OsWRKY13转录调控的多样性第102-103页
     ·OsWRKY13与顺式调控元件的关系第103-104页
   ·OsWRKY13与其它WRKY成员的关系第104-105页
     ·OsWRKY13与水稻WRKY成员间的关系第104-105页
     ·OsWRKY13与拟南芥AtWRKY70调控途径的比较第105页
   ·OsWRKY13在水稻抗病理论研究和育种实践中的应用第105-107页
     ·水稻系统获得性抗性原理的初探第105-106页
     ·育种实践的应用第106-107页
   ·关于OsWRKY13基因功能深入研究的设想第107-108页
5 参考文献第108-124页
致谢第124-125页
附录第125-129页

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