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β-磷酸三钙对成骨细胞基因表达的影响及骨粘连蛋白的纯化

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
第1章 绪论第9-16页
   ·生物骨的组成第9页
   ·钙磷降解材料研究的意义第9-10页
   ·钙磷降解材料降解机理及细胞的作用第10-11页
   ·成骨细胞在骨构建和修复中的作用第11-12页
   ·成骨细胞非胶原蛋白在骨修复和构建中的作用第12-13页
   ·生命大分子在生物矿化中的作用第13-14页
   ·论文设计思路和路线第14-16页
第2章 成骨细胞的分离、培养及纯化第16-28页
   ·实验部分第16-18页
     ·仪器与试剂第16-18页
   ·实验方法第18-21页
     ·成骨细胞的分离和原代培养第18-19页
     ·成骨细胞的纯化和传代第19页
     ·植块法分离、培养和纯化成骨细胞第19页
     ·连续植块法分离成骨细胞第19-20页
     ·成骨细胞生物学特性分析第20-21页
   ·实验结果第21-24页
     ·形态学观察第21-23页
     ·成骨细胞生长曲线第23页
     ·化学染色第23-24页
   ·讨论第24-27页
   ·本章小结第27-28页
第3章 成骨细胞与材料的相互作用第28-41页
   ·仪器和试剂第28-29页
     ·实验仪器第28-29页
     ·试剂第29页
   ·实验方法第29-31页
     ·成骨细胞和钙磷材料的体外培养第29页
     ·成骨细胞和材料作用后的MTT测试第29页
     ·与材料作用后成骨细胞的镜下观察第29-30页
     ·材料作用后的成骨细胞中基因体外扩增第30-31页
   ·实验结果第31-36页
     ·体外培养后形态学观察第31-32页
     ·成骨细胞MTT分析第32页
     ·材料作用后成骨细胞相关基因RT-PCR分析第32-36页
   ·讨论第36-40页
     ·β-TCP和成骨细胞的相互作用第37页
     ·β-TCP对成骨细胞相关基因mRNA表达水平的影响第37-39页
     ·影响总RNA提取的因素第39-40页
   ·小结第40-41页
第4章 大鼠骨粘连蛋白的体外诱导、表达及纯化第41-57页
   ·实验器材与试剂第41-43页
     ·实验器材第41-42页
     ·试剂第42-43页
   ·实验方法第43-46页
     ·大鼠骨粘连蛋白表达质粒pHX201/ON的构建与鉴定第43-44页
     ·重组蛋白的诱导和表达第44页
     ·重组蛋白条件优化第44页
     ·蛋白质的提取和纯化第44-46页
     ·蛋白染色,脱色条件的优化第46页
   ·实验结果第46-53页
     ·pHX201/ON表达载体的构建与鉴定第46-47页
     ·细菌IPTG诱导生长曲线绘制第47-48页
     ·诱导条件的优化第48-49页
     ·蛋白的提取和纯化第49-51页
     ·染色和脱色条件优化第51-53页
   ·讨论第53-57页
第5章 结论与展望第57-59页
参考文献第59-65页
附录 攻读硕土期间发表的论文第65-66页
致谢第66页

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