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外源反-10,顺-12共轭亚油酸对牛乳腺上皮细胞脂肪合成的影响及其分子机制

中文摘要第1-10页
Abstract第10-12页
前言第12-24页
 1 研究背景第12-14页
   ·共轭亚油酸概述第12页
   ·牛乳中CLA的来源第12-14页
 2 反刍动物乳脂合成及调控模式第14-18页
   ·乳中FA的组成和来源第14-16页
     ·乳中FA的组成第14-15页
     ·乳脂的来源与合成第15-16页
   ·乳脂降低学说的机制第16-18页
     ·乙酸/β-羟丁酸不足学说第16-17页
     ·VB_(12)/甲基丙二酸不足学说第17页
     ·葡萄糖/胰岛素学说第17页
     ·反式脂肪酸理论第17-18页
 3 SREBPs概论第18-22页
   ·SREBPs的结构第18页
   ·SREBPs的组织分布和功能第18-19页
   ·SREBPs的合成调节第19-21页
     ·转录水平的调节第19-20页
     ·转录后水平的调节第20-21页
   ·SREBPs与乳脂合成的关系第21-22页
 4 研究目的与意义第22页
 5 研究内容与技术路线第22-24页
试验研究第24-58页
 1 材料与方法第24-35页
   ·试验材料第24-26页
     ·试验器材第24页
     ·试验试剂第24-26页
   ·试验方法第26-34页
     ·乳腺组织的取样与乳腺细胞的培养第26页
     ·细胞记数第26-28页
     ·免疫细胞化学法第28页
     ·Western-Blotting第28页
     ·细胞总RNA的提取与荧光定量PCR第28-29页
     ·油红染色第29页
     ·试验设计与方法——MTT第29-30页
     ·细胞内甘油三酯的提取和测定第30页
     ·细胞内脂肪的提取与脂肪酸分析第30-32页
     ·细胞总RNA的提取与荧光定量PCR第32-34页
     ·细胞总蛋白质的提取、定量与Western-Blotting第34页
   ·试验设计第34-35页
   ·数据统计第35页
 2 结果与分析第35-49页
   ·牛乳腺上皮细胞的体外培养与形态学第35-38页
   ·牛乳腺上皮细胞生长曲线第38-39页
   ·牛乳腺上皮的鉴定第39-42页
     ·上皮细胞定性——免疫细胞化学结果第39页
     ·牛乳腺上皮细胞功能鉴定第39-41页
     ·乳腺上皮细胞内的脂肪滴分布第41页
     ·牛乳腺上皮细胞超微结构观察第41-42页
   ·细胞成活率第42-43页
   ·T10c12 CLA对乳腺上皮细胞内甘油三酯含量的影响第43-44页
   ·T10c12 CLA对乳脂中脂肪酸组成的影响第44-45页
   ·T10c12 CLA对甘油三酯合成相关酶基因表达的影响第45-46页
   ·T10c12 CLA对脂肪酸合成相关酶基因表达的影响第46-47页
   ·SREBP-1及参与pSREBP-1加工相关因子的基因表达第47页
   ·pSREBP与nSREBP蛋白的表达量第47-49页
 3 讨论第49-57页
   ·牛乳腺上皮细胞的体外培养第49-50页
   ·牛乳腺上皮细胞生长曲线第50页
   ·免疫细胞化学鉴定上皮细胞角蛋白18第50-51页
   ·牛乳腺上皮细胞合成乳蛋白的功能第51-53页
   ·牛乳腺上皮细胞分泌乳脂的功能第53页
   ·T10c12 CLA对乳腺上皮细胞增殖的影响第53-54页
   ·T10c12 CLA对乳腺上皮细胞内甘油三酯含量的影响第54页
   ·T10c12 CLA对乳脂中脂肪酸组成的影响第54-55页
   ·T10c12 CLA对甘油三酯合成相关酶基因表达的影响第55页
   ·T10c12 CLA对脂肪酸合成相关酶基因表达的影响第55-56页
   ·T10c12 CLA对SREBP-1和参与SREBP-1蛋白质加工相关因子基因表达的影响第56页
   ·T10c12 CLA对pSREBP与nSREBP蛋白的表达量的影响第56-57页
 4 小结第57-58页
总体结论与展望第58-60页
 1 试验结论第58页
 2 课题创新点第58页
 3 有待解决的问题第58页
 4 展望第58-60页
参考文献第60-70页
致谢第70-71页
攻读学位期间发表的论文情况第71页

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