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猪DGAT2基因3-UTR区的多态性鉴定及功能初步分析

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
1 文献综述第11-27页
   ·DGAT2 基因的研究进展第11-16页
     ·DGAT2 基因的发现第11-12页
     ·DGAT2 基因的定位和结构第12-13页
     ·DGAT2 蛋白特性及表达第13页
     ·DGAT2 的生理功能第13-14页
     ·DGAT 与瘦素和胰岛素的关系第14-15页
     ·DGAT2 的多态性研究第15-16页
       ·牛DGAT2 基因的研究第15-16页
       ·禽DGAT2 基因的研究第16页
   ·其它影响脂肪沉积的基因研究进展第16-26页
     ·参与脂肪代谢的基因第17-19页
       ·FABP 家族蛋白第17-18页
       ·苹果酸酶1(ME1)基因第18-19页
       ·激素敏感脂酶(hormone-sensitive lipase, HSL)基因第19页
       ·脂蛋白酶(lipoprotein lipase , LPL)基因第19页
     ·调节脂肪生成的基因第19-21页
       ·过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Peroxisome proliferator activated receptor γ, PPARγ)第20页
       ·固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1c)第20页
       ·瘦素基因(Leptin)第20-21页
     ·3′-UTR 功能研究概述第21页
     ·调节转录本的稳定性第21-22页
       ·AREs 介导的mRNA 降解第21-22页
       ·通过保护断裂位点(cleavage site)而稳定mRNA第22页
     ·翻译调控第22-23页
     ·控制mRNA 的亚细胞定位第23-24页
     ·编码功能的调控第24页
     ·与疾病的关系第24-25页
     ·与微小RNA(microRNA,miRNA)的相互作用第25-26页
   ·目的与意义第26-27页
2 材料与方法第27-41页
   ·试验材料第27-31页
     ·试验动物和样品采集第27页
     ·主要仪器第27-28页
     ·酶和试剂第28页
     ·主要数据库及生物软件第28-29页
     ·培养基、缓冲液与常用试剂的配制第29-31页
   ·试验方法第31-41页
     ·试验中用到的所有引物序列第31页
     ·猪DGAT2 基因3′-UTR 区多态位点寻找第31-32页
       ·确定DGAT2 基因3′-UTR 的范围第31页
       ·克隆测序法寻找潜在多态位点第31-32页
     ·DGAT2 基因 PS905 位点基因多态性群体检测第32-33页
     ·DGAT2 基因3′-UTR PS905 位点13bp 插入/缺失多态与背膘厚等性状的关联分析第33-34页
       ·军牧一号猪的基因型检测第33页
       ·15%PAGE 胶鉴定DGAT2 基因3′-UTR 位点PS905 基因型第33-34页
       ·与生产数据关联分析第34页
     ·不同基因型3′-UTR 载体的克隆转化测序第34-36页
       ·PCR 扩增第34页
       ·将目的片段连入pGL3-promoter 载体第34-36页
     ·猪DGAT2 基因3′-UTR 2 种载体的去内毒素处理第36-38页
       ·去内毒素质粒的提取第36-38页
       ·提取质粒浓度和质量鉴定第38页
     ·细胞转染及荧光素酶活性的测定第38-40页
       ·小鼠3T3-L1 细胞系的培养及诱导分化第38-39页
       ·用构建的2 种单倍型载体转染小鼠3T3-L1 细胞第39页
       ·双荧光素酶活性的测定第39-40页
     ·不同类型3′-UTR 的生物信息学分析第40-41页
3 结果与分析第41-51页
   ·DGAT2 基因3′-UTR 区的PCR 扩增及加A 位点确定第41页
   ·猪DGAT2 基因3′-UTR 区克隆测序寻找多态位点结果第41-42页
   ·猪DGAT2 基因3′-UTR 区PS905 位点多态群体检测结果第42-44页
   ·猪DGAT2 基因3′-UTR 区PS905 位点多态与军牧一号猪种生产性状的关联分析第44-46页
     ·军牧一号猪基因组提取第44页
     ·军牧一号生产数据处理结果第44-45页
       ·数据校正第44-45页
       ·表型数据分析第45页
     ·基因型与性状关联分析第45-46页
   ·不同类型3′-UTR 载体构建及细胞转染结果第46-48页
     ·不同类型基因3′-UTR 的PCR 扩增与回收第46页
     ·猪DGAT2 基因3′-UTR 区2 种载体的鉴定结果第46-47页
     ·不同载体转染效率的比较第47-48页
   ·不同3′-UTR 生物信息学分析第48-51页
4 讨论第51-53页
   ·DGAT2 基因3′-UTR 多态与生产性状关系的研究第51-52页
     ·DGAT2 基因与脂肪沉积的关系第51页
     ·DGAT2 基因多态的研究第51-52页
     ·DGAT2 基因3′-UTR 区多态分布分析第52页
   ·下一步的工作第52-53页
5 结论第53-54页
参考文献第54-62页
致谢第62-63页
硕士学位论文内容简介及自评第63页

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