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多粘类芽孢杆菌中抗菌物质的分离纯化及沙门氏菌毒性因子启动子库的构建与应用

中文摘要第1-5页
ABSTRACT第5-7页
目录第7-10页
图目录第10-11页
表目录第11-12页
缩略用语第12-13页
第一章 绪论第13-25页
   ·多粘类芽孢杆菌中抗金黄色葡萄球菌物质第13-19页
     ·研究背景第13页
     ·多粘类芽孢杆菌简介第13-14页
     ·国外多粘类芽孢杆菌的研究现状第14页
     ·国内多粘类芽孢杆菌的研究现状第14-15页
     ·金黄色葡萄球菌的耐药性第15页
     ·金黄色葡萄球菌的治疗第15-17页
     ·生物体中活性物质提取的常规方法第17-19页
   ·沙门氏菌第19-22页
     ·沙门氏菌的简介及研究现状第19-20页
     ·沙门氏菌的毒性因子第20-21页
     ·本实验所用沙门氏菌LT2研究情况第21-22页
   ·基因表达启动子-报告子检测法第22-24页
   ·本论文研究内容与意义第24-25页
第二章 实验材料第25-33页
   ·实验材料第25-33页
     ·菌株质粒第25页
     ·培养基及常用试剂的配制第25-27页
     ·试剂第27页
     ·仪器第27页
     ·扩增毒性因子启动子用到的PCR引物第27-33页
第三章 多粘类芽孢杆菌中抗性物质的分离纯化第33-46页
   ·实验方法第33-37页
     ·多粘类芽孢杆菌的固、液体规模培养第33页
     ·样品的提取和浓缩第33-34页
     ·受试菌的处理第34页
     ·活性检测及多粘菌素(polymyxin)的排除第34-35页
     ·浓缩粗提物CS柱层析分离纯化第35-36页
     ·活性物质的理化处理第36页
     ·抑菌谱检测第36页
     ·活性物质作用方式的研究第36-37页
     ·柱层析产物S1高效液相(HPLC)分离第37页
     ·质谱与核磁分析第37页
   ·实验结果第37-46页
     ·固、液培养结果第37-38页
     ·发酵活性粗提物与多粘菌素(polymyxin)的对照第38-39页
     ·浓缩粗提物CS硅胶柱层析结果第39-40页
     ·柱层析活性物质抑菌谱检测第40-41页
     ·活性物质对金黄色葡萄球菌的作用方式第41页
     ·活性物质的理化处理结果第41-42页
     ·高效液相分析结果第42-43页
     ·质谱分析结果第43-44页
     ·核磁共振结果第44-46页
第四章 沙门氏菌毒性因子启动子库的构建与筛选第46-56页
   ·实验方法第46-52页
     ·质粒的小量提取第46-47页
     ·沙门氏菌全基因组的提取第47页
     ·PCR扩增启动子序列第47-48页
     ·DNA片段的纯化回收第48页
     ·DNA凝胶电泳第48页
     ·感受态细胞的制备第48-49页
     ·DNA的双酶切与连接第49页
     ·电转化第49-50页
     ·启动子库的具体构建方法第50-51页
     ·多粘类芽孢杆菌提取物对启动子的筛选第51-52页
   ·实验结果第52-56页
     ·启动子序列的PCR扩增第52-53页
     ·载体双酶切结果第53-54页
     ·启动子库的构建情况第54页
     ·多粘菌抗·性提取物筛选启动子库第54-56页
第五章 讨论第56-58页
   ·抗性物质的分离纯化第56页
   ·启动子库的构建及筛选第56-58页
参考文献第58-66页
致谢第66页

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