致谢 | 第1-4页 |
摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-23页 |
1 前言 | 第9页 |
2 DNA 分子标记概述 | 第9-11页 |
·DNA 分子标记的优点 | 第9-10页 |
·DNA 分子标记分类 | 第10-11页 |
3 微卫星标记 | 第11-21页 |
·微卫星标记技术的基本原理 | 第11-12页 |
·微卫星标记的特点 | 第12页 |
·微卫星分子标记技术在植物遗传育种中的运用 | 第12-14页 |
·获得微卫星标记的方法 | 第14-21页 |
4 马尾松分子标记的研究进展 | 第21页 |
5 研究的目的和意义 | 第21-23页 |
第二章 构建基因库开发微卫星引物 | 第23-40页 |
1 材料 | 第23页 |
2 方法 | 第23-29页 |
·DNA 提取、纯化 | 第23页 |
·DNA 的酶切、回收 | 第23-24页 |
·DNA 和Sau3A I 接头的连接,扩增 | 第24-25页 |
·目的DNA 扩增 | 第25页 |
·从微卫星富集文库中筛选微卫星 | 第25-27页 |
·克隆微卫星文库 | 第27-28页 |
·筛选含有微卫星序列的阳性克隆 | 第28-29页 |
·测序 | 第29页 |
·序列分析及引物设计 | 第29页 |
3 结果与分析 | 第29-34页 |
·马尾松DNA 提取方法的改进和完善 | 第29-30页 |
·酶切、连接结果分析 | 第30-32页 |
·磁珠富集微卫星文库 | 第32-33页 |
·马尾松微卫星特异引物设计 | 第33-34页 |
4 讨论 | 第34-40页 |
·构建微卫星文库方法的选择 | 第34-35页 |
·酶切片段的大小及酶的种类 | 第35-36页 |
·生物素探针的选择 | 第36页 |
·影响微卫星富集文库的因素 | 第36-37页 |
·克隆 | 第37页 |
·阳性克隆的挑选 | 第37-38页 |
·微卫星的特点 | 第38页 |
·微卫星富集文库的特点 | 第38-40页 |
第三章 从数据库中挖掘微卫星序列 | 第40-47页 |
1 方法 | 第41-43页 |
·方法 | 第41-42页 |
·数据库中挖掘微卫星重复 | 第42-43页 |
2 结果与分析 | 第43-45页 |
3 讨论 | 第45-47页 |
第四章 通用性及多态性位点检测 | 第47-55页 |
1 材料和方法 | 第47-49页 |
·材料 | 第47页 |
·方法 | 第47-49页 |
2 结果与分析 | 第49-53页 |
·SSR-PCR 体系的优化 | 第49-50页 |
·马尾松微卫星引物检测 | 第50-52页 |
·松属微卫星引物检测结果 | 第52-53页 |
·微卫星引物检测结果总结 | 第53页 |
3 讨论 | 第53-55页 |
第五章 主要结论及展望 | 第55-57页 |
1 主要结论 | 第55页 |
2 展望 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
附表 1 Genbank 中火炬松含微卫星重复情况及相应的序列登陆号 | 第62-63页 |
附表 2 开发出来的马尾松序列 | 第63-68页 |
详细摘要 | 第68-71页 |