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Enterococcus faecalis磷酸甘油氧化酶基本性质的研究

中文摘要(Abstract in Chinese)第1-6页
英文摘要(Abstract in English)第6-7页
前言(Introduction)第7-8页
第一部分 GPO菌株的形态特征和16S rDNA基因序列分析鉴定(The idenfication of Enterococcus SP. for Glycerophosphate Oxidase)第8-16页
 1.材料方法(Material and method)第8-11页
   ·材料(Material)第8-9页
     ·主要仪器和试剂(Main instrument and reagent)第8页
     ·菌株(Strain)第8页
     ·培养基(Culture)第8页
     ·实验所需溶液(Main solution in experiment)第8-9页
   ·实验方法(Method)第9-11页
     ·菌株培养(Culturing of strain)第9页
     ·革兰氏染色法(Gram stain)第9-10页
     ·KOH法(KOH method)第10页
     ·16S rDNA基因序列分析方法(16S rDNA gene sequence)第10-11页
 2.结果与讨论(Result and discusion)第11-14页
   ·菌株鉴定(Identification)第11-14页
     ·形态特征(Characteristics of Morphology)第11-12页
     ·细菌总DNA提取和16S rDNA基因扩增(Preparation of total DNA and amplification of 16S rDNA gene)第12页
     ·16S rDNA基因测序(Sequencing of 16S rDNA gene)第12-13页
     ·16S rDNA序列在genebank比对(Comparion of 16S rDNA gene with gene sequence in genebank)第13-14页
 3.结论(Sumerization)第14-16页
第二部分 GPO的分离纯化(Isolation and purification of GPO)第16-33页
 1.材料和方法(Material and method)第16-26页
   ·材料(Material)第16-19页
     ·主要仪器和试剂(Main solution in experiment)第16页
     ·菌种(Strain)第16页
     ·培养基(Culture)第16-17页
     ·实验所需溶液(Solution in experiment)第17-19页
   ·实验方法(Method)第19-26页
     ·GPO活力测定(Assay of GPO activity)第19-20页
     ·污染酶的测定(Analysis of contaminative enzyme activity)第20页
     ·蛋白质浓度测定(Determination of protein content)第20-21页
     ·GPO菌株扩大化培养(Scale-up culturing of GPO strain)第21-22页
     ·无细胞粗酶液的提取(Preparation of extract-free cells)第22页
     ·硫酸铵分级分离(Fractionation of ammonia sulphate)第22-23页
     ·双水相萃取(Extraction with double water phase)第23页
     ·Q-Sepharose F·F离子交换层析(Q-Sepharose F·F ion-exchange chromatography)第23-24页
     ·FAD-agarose CL-4B亲和层析(FAD-agarose CL-4B affinity chromatography)第24页
     ·Affi-Gel Blue Gel(Cibacron Blue F3GA Sepharose)亲和层析第24页
     ·Phenyl-Sepharose CL-4B层析(Phenyl-Sepharose CL-4B hydrophobic chromatography)第24页
     ·Chelating Sepharose F·F层析(Chelating Sepharose F·F chromatography)第24页
     ·Sephacryl S-200HR层析(Sephacryl S-200HR Gel filtration)第24-25页
     ·GPO的纯度及分子量测定(Purity analysis and molecular weight determination of GPO)第25-26页
 2.结果与讨论(Result and discusion)第26-31页
   ·GPO分离纯化(Isolation and purification of GPO)和纯化步骤优化组合(Optimum scheme of purification process)第26-30页
   ·GPO 的纯度鉴定和基本性质(Purity analysis and general properties of GPO)第30-31页
   ·GPO的PAGE活性染色(Analysis of activity on PAGE)第31页
 3.结论(Summerization)第31-33页
第三部分 GPO的酶学性质(Kinetic analysis of GPO)第33-41页
 1.材料和方法(Material and method)第33-38页
   ·材料(Material)第33-34页
     ·主要仪器和试剂(Main instrument and reagent)第33页
     ·磷酸甘油氧化酶(GPO)第33页
     ·实验所需溶液(Solution in experiment)第33-34页
   ·实验方法(Method)第34-38页
     ·GPO的最适pH分析(Analysis of opimum pH)第34-35页
     ·GPO的酸碱稳定性分析(Analysis of pH stability)第35-36页
     ·GPO的最适反应温度分析(Analysis of optimum temperature)第36页
     ·GPO的热稳定性分析(Analysis of thermostability)第36-37页
     ·GPO的米氏常数Km的测定(Determination of Michaelis menten constant)第37页
     ·部分金属离子对GPO活性的影响(Effect of metal ions in changes on GPO activity)第37-38页
 2.结果与讨论(Result and discussion)第38-40页
   ·pH对GPO反应速度的影响(Effect of pH in changes on GPO reaction rate)第38页
   ·温度对GPO反应速度的影响(Effect of temperature in changes on GPO reaction rate)第38-39页
   ·GPO的米氏常数Km的测定(Effect of substrate concentration in changes on GPO reaction rate)第39页
   ·部分金属离子对GPO活性的影响(Effect of metal ions in changes on GPO activity)第39-40页
 3.结论(Summerization)第40-41页
第四部分 综述(Review)第41-48页
参考文献(Referance)第48-51页
致谢(Express my thanks to)第51-52页
在读期间所发表文章目录(Publication)第52-53页

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