中文摘要(Abstract in Chinese) | 第1-6页 |
英文摘要(Abstract in English) | 第6-7页 |
前言(Introduction) | 第7-8页 |
第一部分 GPO菌株的形态特征和16S rDNA基因序列分析鉴定(The idenfication of Enterococcus SP. for Glycerophosphate Oxidase) | 第8-16页 |
1.材料方法(Material and method) | 第8-11页 |
·材料(Material) | 第8-9页 |
·主要仪器和试剂(Main instrument and reagent) | 第8页 |
·菌株(Strain) | 第8页 |
·培养基(Culture) | 第8页 |
·实验所需溶液(Main solution in experiment) | 第8-9页 |
·实验方法(Method) | 第9-11页 |
·菌株培养(Culturing of strain) | 第9页 |
·革兰氏染色法(Gram stain) | 第9-10页 |
·KOH法(KOH method) | 第10页 |
·16S rDNA基因序列分析方法(16S rDNA gene sequence) | 第10-11页 |
2.结果与讨论(Result and discusion) | 第11-14页 |
·菌株鉴定(Identification) | 第11-14页 |
·形态特征(Characteristics of Morphology) | 第11-12页 |
·细菌总DNA提取和16S rDNA基因扩增(Preparation of total DNA and amplification of 16S rDNA gene) | 第12页 |
·16S rDNA基因测序(Sequencing of 16S rDNA gene) | 第12-13页 |
·16S rDNA序列在genebank比对(Comparion of 16S rDNA gene with gene sequence in genebank) | 第13-14页 |
3.结论(Sumerization) | 第14-16页 |
第二部分 GPO的分离纯化(Isolation and purification of GPO) | 第16-33页 |
1.材料和方法(Material and method) | 第16-26页 |
·材料(Material) | 第16-19页 |
·主要仪器和试剂(Main solution in experiment) | 第16页 |
·菌种(Strain) | 第16页 |
·培养基(Culture) | 第16-17页 |
·实验所需溶液(Solution in experiment) | 第17-19页 |
·实验方法(Method) | 第19-26页 |
·GPO活力测定(Assay of GPO activity) | 第19-20页 |
·污染酶的测定(Analysis of contaminative enzyme activity) | 第20页 |
·蛋白质浓度测定(Determination of protein content) | 第20-21页 |
·GPO菌株扩大化培养(Scale-up culturing of GPO strain) | 第21-22页 |
·无细胞粗酶液的提取(Preparation of extract-free cells) | 第22页 |
·硫酸铵分级分离(Fractionation of ammonia sulphate) | 第22-23页 |
·双水相萃取(Extraction with double water phase) | 第23页 |
·Q-Sepharose F·F离子交换层析(Q-Sepharose F·F ion-exchange chromatography) | 第23-24页 |
·FAD-agarose CL-4B亲和层析(FAD-agarose CL-4B affinity chromatography) | 第24页 |
·Affi-Gel Blue Gel(Cibacron Blue F3GA Sepharose)亲和层析 | 第24页 |
·Phenyl-Sepharose CL-4B层析(Phenyl-Sepharose CL-4B hydrophobic chromatography) | 第24页 |
·Chelating Sepharose F·F层析(Chelating Sepharose F·F chromatography) | 第24页 |
·Sephacryl S-200HR层析(Sephacryl S-200HR Gel filtration) | 第24-25页 |
·GPO的纯度及分子量测定(Purity analysis and molecular weight determination of GPO) | 第25-26页 |
2.结果与讨论(Result and discusion) | 第26-31页 |
·GPO分离纯化(Isolation and purification of GPO)和纯化步骤优化组合(Optimum scheme of purification process) | 第26-30页 |
·GPO 的纯度鉴定和基本性质(Purity analysis and general properties of GPO) | 第30-31页 |
·GPO的PAGE活性染色(Analysis of activity on PAGE) | 第31页 |
3.结论(Summerization) | 第31-33页 |
第三部分 GPO的酶学性质(Kinetic analysis of GPO) | 第33-41页 |
1.材料和方法(Material and method) | 第33-38页 |
·材料(Material) | 第33-34页 |
·主要仪器和试剂(Main instrument and reagent) | 第33页 |
·磷酸甘油氧化酶(GPO) | 第33页 |
·实验所需溶液(Solution in experiment) | 第33-34页 |
·实验方法(Method) | 第34-38页 |
·GPO的最适pH分析(Analysis of opimum pH) | 第34-35页 |
·GPO的酸碱稳定性分析(Analysis of pH stability) | 第35-36页 |
·GPO的最适反应温度分析(Analysis of optimum temperature) | 第36页 |
·GPO的热稳定性分析(Analysis of thermostability) | 第36-37页 |
·GPO的米氏常数Km的测定(Determination of Michaelis menten constant) | 第37页 |
·部分金属离子对GPO活性的影响(Effect of metal ions in changes on GPO activity) | 第37-38页 |
2.结果与讨论(Result and discussion) | 第38-40页 |
·pH对GPO反应速度的影响(Effect of pH in changes on GPO reaction rate) | 第38页 |
·温度对GPO反应速度的影响(Effect of temperature in changes on GPO reaction rate) | 第38-39页 |
·GPO的米氏常数Km的测定(Effect of substrate concentration in changes on GPO reaction rate) | 第39页 |
·部分金属离子对GPO活性的影响(Effect of metal ions in changes on GPO activity) | 第39-40页 |
3.结论(Summerization) | 第40-41页 |
第四部分 综述(Review) | 第41-48页 |
参考文献(Referance) | 第48-51页 |
致谢(Express my thanks to) | 第51-52页 |
在读期间所发表文章目录(Publication) | 第52-53页 |