中文摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-16页 |
第一篇 文献综述 | 第16-43页 |
第一章 热休克蛋白(HSPs)研究进展 | 第17-31页 |
1 HSPs的分类和命名 | 第17-18页 |
2 HSPs的基因特点和转录调控 | 第18-19页 |
·热休克元件(heat shock element,HSE) | 第18页 |
·热休克因子(heat shock factor,HSF) | 第18-19页 |
·HSPs的转录调控 | 第19页 |
3 HSPs mRNA与翻译 | 第19-20页 |
4 序列与功能 | 第20-21页 |
·HSPs序列特点 | 第20-21页 |
·蛋白质序列与功能 | 第21页 |
5 HSPs与细胞凋亡 | 第21-23页 |
·HSPs对线粒体通路介导细胞凋亡的调控作用 | 第21-22页 |
·HSPs对死亡受体通路介导细胞凋亡的调控作用 | 第22页 |
·HSPs对细胞内抗凋亡及促凋亡信号转导通路的调控作用 | 第22-23页 |
6 HSPs的生物学功能 | 第23-28页 |
·分子伴侣功能 | 第23-24页 |
·HSPs与免疫 | 第24页 |
·HSPs维持细胞或生物体的动态平衡,保护它们免遭各种应激因素的损害 | 第24-25页 |
·HSPs保护细胞内重要遗传物质DNA及对生物生长、发育和分化的作用 | 第25页 |
·HSPs参与体内许多调节过程 | 第25页 |
·HSPs对脑的保护作用 | 第25-26页 |
·HSPs作为细胞间的信号分子 | 第26-27页 |
·HSPs向细胞外的分泌作用 | 第27页 |
·细胞因子功能 | 第27-28页 |
7 HSPs与疾病 | 第28-31页 |
·HSPs与肿瘤 | 第28-29页 |
·HSPs的自身免疫反应和抗炎症活性 | 第29-30页 |
·HSPs与心血管疾病 | 第30页 |
·HSPs与病毒性疾病 | 第30-31页 |
8 生物标识物 | 第31页 |
参考文献 | 第31-43页 |
第二篇 试验研究 | 第43-113页 |
第二章 长途运输应激对猪组织的应激性损伤 | 第44-55页 |
1 材料与方法 | 第45-46页 |
·试验动物及试验设计 | 第45页 |
·主要试验材料 | 第45页 |
·试验方法 | 第45-46页 |
2 结果与分析 | 第46-49页 |
·运输应激猪血液中相关酶含量的变化 | 第46-48页 |
·受试猪组织的组织病理变化 | 第48-49页 |
3 讨论 | 第49-55页 |
第三章 HSPs在长途运输猪组织细胞中的分布 | 第55-67页 |
1 材料与方法 | 第56-57页 |
·试验动物及试验设计 | 第56页 |
·主要试验材料 | 第56页 |
·免疫组织化学 | 第56-57页 |
2 结果与分析 | 第57-64页 |
·HSPs在运输应激猪肺组织中的定位和分布 | 第57-58页 |
·HSPs在运输应激猪心肌中的定位和分布 | 第58-59页 |
·HSPs在运输应激猪肝脏中的定位和分布 | 第59-60页 |
·HSPs在运输应激猪脾脏中的定位和分布 | 第60-61页 |
·HSPs在运输应激猪背最长肌中的定位和分布 | 第61-62页 |
·HSPs在运输应激猪淋巴结中的定位和分布 | 第62-63页 |
·HSPs在运输应激猪肾脏中的定位和分布 | 第63-64页 |
3 讨论 | 第64-67页 |
第四章 原位杂交法检测HSP70 MRNA和HSP90 MRNA在运输应激猪组织细胞中的分布 | 第67-82页 |
1 材料与方法 | 第67-72页 |
·仪器和材料 | 第67-68页 |
·方法 | 第68-72页 |
2 试验结果 | 第72-79页 |
·重组质粒的提取和线性化 | 第72-73页 |
·阳性质粒的鉴定 | 第73-75页 |
·斑点杂交试验结果 | 第75页 |
·原位杂交结果 | 第75-79页 |
3 讨论 | 第79-82页 |
第五章 运输应激猪HSPS MRNA转录水平荧光定量RT-PCR方法的建立 | 第82-95页 |
1 材料与方法 | 第82-84页 |
·仪器和材料 | 第82-83页 |
·方法 | 第83-84页 |
2 结果与分析 | 第84-93页 |
·重组质粒的提取和线性化 | 第84页 |
·阳性质粒的鉴定及体外转录RNA | 第84-86页 |
·荧光定量RT-PCR标准曲线 | 第86-88页 |
·荧光定量RT-PCR方法的特异性 | 第88-90页 |
·荧光定量RT-PCR方法的敏感性 | 第90-93页 |
3 讨论 | 第93-95页 |
第六章 长途运输应激对猪组织细胞中HSP MRNA转录水平的影响 | 第95-102页 |
1 材料与方法 | 第96-97页 |
·试验动物及试验设计 | 第96页 |
·仪器和材料 | 第96页 |
·试验方法 | 第96-97页 |
2 结果与分析 | 第97-99页 |
·运输应激对心脏和肝脏中hsp70 mRNA和hsp90 mRNA转录水平的影响 | 第97-98页 |
·运输应激对肺脏和淋巴结中hsp70 mRNA和hsp90 mRNA转录水平的影响 | 第98-99页 |
·运输应激对肾脏和背最长肌中hsp70 mRNA和hsp90 mRNA转录水平的影响 | 第99页 |
3 讨论 | 第99-102页 |
第七章 运输应激猪HSPs定量方法探讨 | 第102-107页 |
1 材料与方法 | 第102-104页 |
·仪器和材料 | 第102页 |
·组织样品的处理 | 第102-103页 |
·Western blotting | 第103-104页 |
·Dot blotting | 第104页 |
2 结果与分析 | 第104-105页 |
·丽春红S染色结果 | 第104-105页 |
·Western blotting结果 | 第105页 |
·Dot blotting结果 | 第105页 |
3 讨论 | 第105-107页 |
参考文献 | 第107-113页 |
热应激对SH-SY5Y细胞中PRP MRNA及HSP90 MRNA转录水平的影响 | 第113-124页 |
1 材料与方法 | 第114-116页 |
·试验设计 | 第114页 |
·仪器和材料 | 第114页 |
·试验方法 | 第114-116页 |
2 结果与分析 | 第116-119页 |
·阳性质粒和体外转录RNA的鉴定 | 第116-117页 |
·FQ RT-PCR标准曲线和标准方程 | 第117-118页 |
·HSP和PrP mRNA转录水平的变化 | 第118-119页 |
3 讨论 | 第119-122页 |
参考文献: | 第122-124页 |
试剂的配制 | 第124-131页 |
1 免疫组织化学常用试剂的配制 | 第124-126页 |
2 原位杂交常用试剂的配制 | 第126-127页 |
3 蛋白质定量常用试剂的配制 | 第127-131页 |
全文总结 | 第131-132页 |
致谢 | 第132-133页 |
论文发表情况 | 第133页 |