| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-24页 |
| ·冠状病毒的历史 | 第9页 |
| ·冠状病毒分类 | 第9-13页 |
| ·SARS冠状病毒的生物学特征 | 第13-16页 |
| ·SARS冠状病毒的形态特征与理化性质 | 第13-14页 |
| ·SARS冠状病毒(SARS-CoV)的培养 | 第14页 |
| ·SARS冠状病毒的复制过程 | 第14-15页 |
| ·SARS冠状病毒的基因组结构 | 第15-16页 |
| ·冠状病毒刺突蛋白(Spike，S)的基本结构与功能 | 第16-19页 |
| ·冠状病毒与细胞受体的相互作用 | 第19-21页 |
| ·氨肽酶N | 第19-20页 |
| ·癌胚抗原细胞粘附分子(CEACAM) | 第20-21页 |
| ·唾液酸 | 第21页 |
| ·SARS冠状病毒S蛋白结构及受体 | 第21-24页 |
| ·血管紧张素转换酶2(ACE2) | 第21-22页 |
| ·CD209L(L-SIGN) | 第22-24页 |
| 2 研究目的及意义 | 第24-25页 |
| 3 实验材料与方法 | 第25-38页 |
| ·细菌、质粒及SARS阳性血清与健康人血清 | 第25页 |
| ·主要生化试剂、试剂盒及材料 | 第25页 |
| ·主要溶液的配制 | 第25-28页 |
| ·抗生素类 | 第25页 |
| ·细菌培养基 | 第25-26页 |
| ·E.coli感受态制备用试剂 | 第26页 |
| ·质粒抽提相关溶液 | 第26页 |
| ·SDS-PAGE相关溶液 | 第26页 |
| ·Western-blot相关溶液 | 第26页 |
| ·ELISA相关溶液 | 第26-27页 |
| ·包涵体提取相关溶液 | 第27页 |
| ·His.Bind Purification Kit纯化相关溶液 | 第27页 |
| ·蛋白质银染相关溶液(郭尧君，1991) | 第27页 |
| ·噬菌体展示相关溶液 | 第27-28页 |
| ·其他试剂与溶液 | 第28页 |
| ·主要实验方法 | 第28-38页 |
| ·DNA片段的快速回收 | 第28页 |
| ·感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第28-29页 |
| ·连接产物的转化 | 第29页 |
| ·质粒的制备 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第30页 |
| ·大肠杆菌BL21(DE3)的诱导表达 | 第30页 |
| ·表达蛋白的鉴定 | 第30-31页 |
| ·通过包涵体提取纯化表达蛋白 | 第31页 |
| ·用His.Bind Purification Kit重组蛋白质纯化 | 第31-32页 |
| ·兔抗S144-643高免血清的制备 | 第32页 |
| ·最佳包被浓度及血清最佳稀释倍数的确定(方阵滴定) | 第32页 |
| ·ELISA检测免疫动物的抗体水平 | 第32页 |
| ·噬菌体展示的操作流程与方法 | 第32-37页 |
| ·假病毒中和试验 | 第37-38页 |
| 4 结果与分析 | 第38-49页 |
| ·重组质粒p28b-S144-643的构建及鉴定 | 第38-40页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌中表达及可溶性分析 | 第40页 |
| ·S144-643蛋白的纯化及免疫原性分析 | 第40-42页 |
| ·ELISA检测最佳包被浓度及血清最佳稀释倍数的确定(方阵滴定) | 第42-43页 |
| ·免疫动物抗体水平的ELISA检测 | 第43-44页 |
| ·SARS S144-643蛋白与ACE2_(1-367)的结合 | 第44-45页 |
| ·噬菌体展示筛选与S144-643特异性结合多肽 | 第45-48页 |
| ·假病毒侵染阻断试验 | 第48-49页 |
| 5. 讨论 | 第49-52页 |
| ·SARS病毒S1蛋白 | 第49页 |
| ·SARS病毒受体ACE2的功能区 | 第49-50页 |
| ·SARS病毒其它受体 | 第50-51页 |
| ·关于噬菌体展示结果 | 第51-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 附录 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
