| 第一章 文献综述 | 第1-25页 |
| 1.山羊高繁殖力机制研究进展 | 第13-14页 |
| ·多胎山羊品种 | 第13页 |
| ·羊多胎的生殖生理 | 第13页 |
| ·济宁青山羊繁殖力的研究进展 | 第13-14页 |
| 2.转化生长因子β超家族及其信号转导 | 第14-16页 |
| ·转化生长因子β超家族的功能 | 第14-15页 |
| ·转化生长因子β超家族生物合成和结构特征 | 第15页 |
| ·转化生长因子β超家族的受体 | 第15-16页 |
| 3.生长分化因子9基因研究进展 | 第16-21页 |
| ·生长分化因子9的结构、功能及调控 | 第16-17页 |
| ·GDF9基因的克隆及结构 | 第17-18页 |
| ·GDF9基因的发育性表达及作用 | 第18-19页 |
| ·GDF9基因的定位及多态性 | 第19-20页 |
| ·GDF9基因与哺乳动物繁殖性能的关系 | 第20-21页 |
| 4.Touchdown PCR | 第21-22页 |
| 5.SSCP技术的研究进展 | 第22-24页 |
| ·SSCP的建立与发展 | 第22-23页 |
| ·PCR-SSCP方法的原理 | 第23页 |
| ·PCR-SSCP的特点 | 第23-24页 |
| ·PCR-SSCP方法的应用 | 第24页 |
| 6.本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 生长分化因子9基因的多态性检测 | 第25-37页 |
| 1.实验材料 | 第25-28页 |
| ·实验山羊来源和采样方法 | 第25页 |
| ·药品和酶 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26页 |
| ·溶液试剂配制 | 第26-28页 |
| 2.分析工具软件 | 第28页 |
| 3.主要实验步骤 | 第28-33页 |
| ·血液DNA的提取 | 第28-29页 |
| ·DNA浓度和纯度检测 | 第29页 |
| ·PCR-SSCP过程 | 第29-33页 |
| ·引物设计 | 第29-30页 |
| ·Touchdown PCR条件的建立 | 第30-31页 |
| ·PCR结果的电泳检测 | 第31-32页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
| ·利用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳进行SSCP分析 | 第31-32页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶的银染 | 第32页 |
| ·基因型的判定 | 第32-33页 |
| 4.GDF9基因PCR-SSCP的结果与分析 | 第33-37页 |
| ·基因组DNA抽提结果 | 第33页 |
| ·PCR扩增结果 | 第33-35页 |
| ·引物1 PCR产物的扩增结果 | 第33-34页 |
| ·引物2 PCR产物的扩增结果 | 第34页 |
| ·引物3 PCR产物的扩增结果 | 第34页 |
| ·引物4 PCR产物的扩增结果 | 第34页 |
| ·引物5 PCR产物的扩增结果 | 第34-35页 |
| ·引物6 PCR产物的扩增结果 | 第35页 |
| ·PCR-SSCP多态性检测结果 | 第35-37页 |
| ·引物1 PCR-SSCP检测结果 | 第35页 |
| ·引物2 PCR-SSCP检测结果 | 第35-36页 |
| ·引物3 PCR-SSCP检测结果 | 第36页 |
| ·引物4 PCR-SSCP检测结果 | 第36页 |
| ·引物5 PCR-SSCP检测结果 | 第36-37页 |
| ·引物1 PCR-SSCP检测结果 | 第37页 |
| 5.SSCP检测结果基因型命名 | 第37页 |
| 第三章 生长分化因子9(CDF9)基因部分序列的克隆分析 | 第37-48页 |
| 1.引言 | 第37页 |
| 2.实验材料 | 第37-38页 |
| ·菌株和克隆载体 | 第37页 |
| ·药品和酶类 | 第37-38页 |
| 3.实验方法 | 第38-40页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·主要实验步骤 | 第38-40页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第38页 |
| ·感受态细胞的制备——氯化钙法 | 第38-39页 |
| ·连接反应 | 第39页 |
| ·转化 | 第39页 |
| ·质粒DNA的小量提取——试剂盒法 | 第39页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第39-40页 |
| 4.各引物扩增片段的克隆与分析 | 第40-48页 |
| ·阳性克隆鉴定结果 | 第40页 |
| ·生长分化因子9基因序列及其氨基酸分析 | 第40-45页 |
| ·生长分化因子9基因多态性分析 | 第45-48页 |
| 第四章 山羊GDF9基因群体遗传学分析及其与济宁青山羊高繁殖力关系的研究 | 第48-55页 |
| 1.生长分化因子9基因的群体遗传学研究 | 第48-50页 |
| ·基因频率 | 第48页 |
| ·基因型频率 | 第48页 |
| ·群体杂合度(Heterozygosity,H) | 第48页 |
| ·多态信息含量(Polymorphic information content,PIC) | 第48-49页 |
| ·基因位点Hardy-weinberg平衡状态的检验 | 第49-50页 |
| ·GDF9基因与济宁青山羊高繁殖力关系的研究 | 第50页 |
| 2.突变位点的群体遗传学研究结果 | 第50-53页 |
| ·GDF9基因频率和基因型频率分析 | 第50-52页 |
| ·遗传特性分析 | 第52-53页 |
| ·Hardy-Weinberg平衡的检验 | 第53页 |
| 3.GDF9基因多态性与济宁青山羊高繁殖性状的相关分析 | 第53-55页 |
| ·GDF9基因有多态性因物扩增片段在有产羔记录的济宁青山羊中的基因频率和基因型频率 | 第54页 |
| ·GDF9基因3对引物扩增片段与繁殖性状的关联性分析 | 第54-55页 |
| 第五章 讨论与结论 | 第55-64页 |
| 1.实验材料的选择 | 第55页 |
| 2.影响PCR扩增反应的因素 | 第55-57页 |
| ·模板的质量 | 第56页 |
| ·引物的设计 | 第56页 |
| ·引物的浓度 | 第56页 |
| ·PCR反应的温度 | 第56-57页 |
| ·镁离子的浓度 | 第57页 |
| 3.影响SSCP检测的因素 | 第57-59页 |
| ·PCR产物的质量 | 第57-58页 |
| ·DNA片段中点突变的位置对SSCP的影响 | 第58页 |
| ·PCR片段的长度 | 第58页 |
| ·非变性聚丙烯酰胺凝成分 | 第58-59页 |
| ·上样缓冲液与变性 | 第59页 |
| ·电泳条件 | 第59页 |
| ·其它因素 | 第59页 |
| 4.SSCP结果的分析 | 第59-60页 |
| 5.GDF9基因测序结果分析 | 第60-61页 |
| 6.GDF9基因群体遗传特性的分析 | 第61-62页 |
| 7.SSCP检测结果对济宁青山羊产羔数影响的分析 | 第62页 |
| 8.结论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第72页 |
