中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
缩写词 | 第8-10页 |
第一章 木质素生物合成途径及其调控的研究进展(文献综述) | 第10-31页 |
第一节 木质素的组成与分布 | 第11-14页 |
第二节 木质素的生物合成途径 | 第14-22页 |
第三节 木质素基因工程的研究进展 | 第22-26页 |
第四节 展望 | 第26-29页 |
本研究的立题依据和技术路线 | 第29-31页 |
第二章 CCoAOMT & 4CL基因对木质素生物合成调控的研究 | 第31-62页 |
第一节 前言 | 第31-33页 |
第二节 材料与方法 | 第33-48页 |
1 实验材料和试剂 | 第33-34页 |
2 实验方法 | 第34-48页 |
·农杆菌介导的普通毛白杨的转化 | 第34-35页 |
·转化植株的分子检测 | 第35-46页 |
·转基因杨树的Wiesner反应 | 第46页 |
·转基因杨树Klason木质素及综纤维素含量的测定 | 第46-48页 |
第三节 结果与分析 | 第48-57页 |
1 转基因毛白杨遗传转化体系的优化 | 第48-49页 |
2 转基因毛白杨的获得 | 第49-51页 |
3 转基因毛白杨的RT-PCR检测 | 第51-52页 |
4 转基因毛白杨的Western印迹杂交 | 第52-53页 |
5 转基因毛白杨的Klason木质素与综纤维素含量测定 | 第53-54页 |
6 转基因毛白杨的茎秆颜色变化及Wiesner反应 | 第54-56页 |
7 转基因毛白杨的性状观察 | 第56-57页 |
第四节 讨论 | 第57-61页 |
第五节 小结 | 第61-62页 |
第三章 木质素合成相关酶基因C4H启动子的分离与功能分析 | 第62-90页 |
第一节 前言 | 第62-63页 |
第二节 材料与方法 | 第63-75页 |
1 材料与试剂 | 第63页 |
2 实验方法 | 第63-75页 |
·C4H启动子的分离及序列分析 | 第63-65页 |
·双元表达载体pC4H-GUS和pC4H-COA的构建 | 第65-68页 |
·冻融法转化农杆菌及烟草转化 | 第68-70页 |
·转化烟草的PCR及RT-PCR检测 | 第70-71页 |
·转基因烟草的移栽 | 第71页 |
·转C4H-GUS基因烟草GUS基因表达分析 | 第71-74页 |
·组织化学分析 | 第74页 |
·转基因烟草的木质素和纤维素的含量测定 | 第74-75页 |
第三节 结果与分析 | 第75-88页 |
1 C4H启动子的分离及序列分析 | 第75-76页 |
2 双元表达载体pC4H-GUS和pC4H-COA的分子鉴定及烟草转化 | 第76-80页 |
·PCR及酶切鉴定植物表达载体pC4H-GUS | 第76-77页 |
·PCR及酶切鉴定植物表达载体pC4H-CoA | 第77-78页 |
·转化烟草的获得 | 第78-80页 |
3 转pC4H-COA烟草的RT-PCR检测 | 第80-81页 |
4 转基因烟草的移栽、管理与生长情况观察 | 第81-82页 |
5 转基因烟草中C4H-GUS融合基因表达的时空特异性分析 | 第82-85页 |
6 C4H-GUS基因的受伤诱导特异性表达 | 第85页 |
7 转pC4H-COA烟草的Klason木质素和综纤维素含量测定 | 第85-88页 |
第四节 讨论 | 第88-89页 |
第五节 小结 | 第89-90页 |
总结与展望 | 第90-92页 |
参考文献 | 第92-101页 |
硕士在读期间发表文章及申请专利 | 第101-102页 |
致谢 | 第102页 |