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利用反义RNA技术调节木质素生物合成的研究--CCoAOMT和4CL基因对木质素生物合成的调控及C4H启动子的分离与鉴定

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-8页
缩写词第8-10页
第一章 木质素生物合成途径及其调控的研究进展(文献综述)第10-31页
 第一节 木质素的组成与分布第11-14页
 第二节 木质素的生物合成途径第14-22页
 第三节 木质素基因工程的研究进展第22-26页
 第四节 展望第26-29页
 本研究的立题依据和技术路线第29-31页
第二章 CCoAOMT & 4CL基因对木质素生物合成调控的研究第31-62页
 第一节 前言第31-33页
 第二节 材料与方法第33-48页
  1 实验材料和试剂第33-34页
  2 实验方法第34-48页
   ·农杆菌介导的普通毛白杨的转化第34-35页
   ·转化植株的分子检测第35-46页
   ·转基因杨树的Wiesner反应第46页
   ·转基因杨树Klason木质素及综纤维素含量的测定第46-48页
 第三节 结果与分析第48-57页
  1 转基因毛白杨遗传转化体系的优化第48-49页
  2 转基因毛白杨的获得第49-51页
  3 转基因毛白杨的RT-PCR检测第51-52页
  4 转基因毛白杨的Western印迹杂交第52-53页
  5 转基因毛白杨的Klason木质素与综纤维素含量测定第53-54页
  6 转基因毛白杨的茎秆颜色变化及Wiesner反应第54-56页
  7 转基因毛白杨的性状观察第56-57页
 第四节 讨论第57-61页
 第五节 小结第61-62页
第三章 木质素合成相关酶基因C4H启动子的分离与功能分析第62-90页
 第一节 前言第62-63页
 第二节 材料与方法第63-75页
  1 材料与试剂第63页
  2 实验方法第63-75页
   ·C4H启动子的分离及序列分析第63-65页
   ·双元表达载体pC4H-GUS和pC4H-COA的构建第65-68页
   ·冻融法转化农杆菌及烟草转化第68-70页
   ·转化烟草的PCR及RT-PCR检测第70-71页
   ·转基因烟草的移栽第71页
   ·转C4H-GUS基因烟草GUS基因表达分析第71-74页
   ·组织化学分析第74页
   ·转基因烟草的木质素和纤维素的含量测定第74-75页
 第三节 结果与分析第75-88页
  1 C4H启动子的分离及序列分析第75-76页
  2 双元表达载体pC4H-GUS和pC4H-COA的分子鉴定及烟草转化第76-80页
   ·PCR及酶切鉴定植物表达载体pC4H-GUS第76-77页
   ·PCR及酶切鉴定植物表达载体pC4H-CoA第77-78页
   ·转化烟草的获得第78-80页
  3 转pC4H-COA烟草的RT-PCR检测第80-81页
  4 转基因烟草的移栽、管理与生长情况观察第81-82页
  5 转基因烟草中C4H-GUS融合基因表达的时空特异性分析第82-85页
  6 C4H-GUS基因的受伤诱导特异性表达第85页
  7 转pC4H-COA烟草的Klason木质素和综纤维素含量测定第85-88页
 第四节 讨论第88-89页
 第五节 小结第89-90页
总结与展望第90-92页
参考文献第92-101页
硕士在读期间发表文章及申请专利第101-102页
致谢第102页

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