| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 缩写词英汉对照 | 第13-14页 |
| 第一部分 水稻cDNA芯片中转录因子筛选及功能初步探讨 | 第14-69页 |
| 第一章 植物转录因子与发育调控 | 第15-28页 |
| 1． 转录因子的功能结构域 | 第15-19页 |
| 1． 1 植物转录因子的一般特点 | 第15-16页 |
| 1． 2 DNA结合区 | 第16-17页 |
| 1． 3 转录调控区 | 第17页 |
| 1． 4 寡聚化位点 | 第17-18页 |
| 1． 5 核定位信号 | 第18-19页 |
| 2． 植物中的锌指蛋白 | 第19-23页 |
| 2． 1 TFIIIA类锌指蛋白 | 第19-20页 |
| 2． 2 WRKY家族 | 第20-21页 |
| 2． 3 LIM家族 | 第21-22页 |
| 2． 4 Ring finger家族 | 第22-23页 |
| 2． 5 Dof家族 | 第23页 |
| 3． 同源异型盒基因 | 第23-25页 |
| 4． MADS盒基因 | 第25-26页 |
| 5． 结束语 | 第26-28页 |
| 第二章 水稻cDNA芯片中的转录因子筛选及功能初步探讨 | 第28-62页 |
| 第一节 材料与方法 | 第28-39页 |
| 1． 实验材料 | 第28页 |
| 2． 实验方法 | 第28-39页 |
| 2． 1 相关基本分子生物学操作 | 第28-32页 |
| 2． 2 重组法载体构建 | 第32-34页 |
| 2． 3 总cDNA合成 | 第34-36页 |
| 2． 4 总cDNA合成探针的同位素随机标记 | 第36页 |
| 2． 5 点杂交 | 第36-37页 |
| 2． 6 农杆菌介导水稻转化 | 第37-39页 |
| 第二节 实验结果与讨论 | 第39-62页 |
| 1． 从水稻10 K cDNA芯片EST数据库中筛选转录因子基因 | 第39-44页 |
| 1． 1 转录因子保守序列特征 | 第39-40页 |
| 1． 2 转录因子的筛选 | 第40-44页 |
| 2． 转录因子器官表达特异性研究 | 第44-54页 |
| 2． 1 表达特异性基因筛选 | 第44-46页 |
| 2． 2 具器官表达特异性的基因序列分析 | 第46-54页 |
| 3． 转基因表达载体的构建及表型观察 | 第54-60页 |
| 3． 1 重组法构建体系的建立 | 第54-56页 |
| 3． 2 植物表达载体构建 | 第56页 |
| 3． 3 部分转基因植株表型观察 | 第56-60页 |
| 4． 讨论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 第二部分 OaAGAP在水稻中的生理功能研究 | 第69-142页 |
| 第一章 生长素极性运输的研究进展 | 第70-82页 |
| 1． 生长素输出载体复合物 | 第71-73页 |
| 1． 1 生长素输出载体 | 第71-72页 |
| 1． 2 NPA结合蛋白 | 第72-73页 |
| 2． 生长素输入载体 | 第73-75页 |
| 3． 细胞极性与生长素极性运输 | 第75-77页 |
| 3． 1 细胞极性与生长素运输 | 第75页 |
| 3． 2 囊跑运输与PIN1循环 | 第75-77页 |
| 3． 3 细胞极性与AUX1 | 第77页 |
| 4． 生长素极性运输在植物生长发育中的作用 | 第77-80页 |
| 4． 1 维管组织发育 | 第77-78页 |
| 4． 2 胚胎发育 | 第78页 |
| 4． 3 侧根发育 | 第78-79页 |
| 4． 4 根的向地性 | 第79-80页 |
| 5． 结束语 | 第80-82页 |
| 前言 | 第82-84页 |
| 第二章 水稻OsAGAP生化特征 | 第84-100页 |
| 第一节 材料与方法 | 第84-90页 |
| 1． 实验材料 | 第84页 |
| 2． 实验方法 | 第84-90页 |
| 2． 1 水稻基因组DNA的提取 | 第84-85页 |
| 2． 2 RT-PCR | 第85页 |
| 2． 3 Arf cDNA的克隆及原核表达载体的构建 | 第85-86页 |
| 2． 4 OsAGAP的原核表达载体的构建 | 第86页 |
| 2． 5 GST融合蛋白的表达纯化 | 第86-87页 |
| 2． 6 OsAGAP蛋白的GTPase激活活性测定 | 第87页 |
| 2． 7 酵母感受态制备及转化 | 第87-88页 |
| 2． 8 酵母ArfGAP突变体透射电镜观察 | 第88-90页 |
| 第二节 结果与分析 | 第90-100页 |
| 1． OsAGAP基因表达序列分析 | 第90-93页 |
| 2． OsAGAP基因表达对IAA的响应 | 第93-94页 |
| 3． OsAGAP编码蛋白的生化功能研究 | 第94-100页 |
| 3． 1 OsAGAP GTPase活性测定 | 第94-98页 |
| 3． 2 酵母ArfGAP突变体功能互补实验 | 第98-100页 |
| 第三章 OsAGAP在水稻中表达模式分析 | 第100-113页 |
| 第一节 材料与方法 | 第100-107页 |
| 1． 实验材料 | 第100页 |
| 2． 实验方法 | 第100-107页 |
| 2． 1 OsAGAP的Northern杂交 | 第100-101页 |
| 2． 2 OsAGAPmRNA原位杂交 | 第101-104页 |
| 2． 3 OsAGAP瞬时表达载体构建 | 第104-105页 |
| 2． 4 基因枪轰击洋葱表皮观察GFP瞬时表达 | 第105-107页 |
| 第二节 实验结果 | 第107-110页 |
| 1． 基因OsAGAP在水稻各组织中表达 | 第107-108页 |
| 2． OsAGAP在mRNA水平的表达模式分析 | 第108-110页 |
| 3． OsAGAP基因的亚细胞定位 | 第110-113页 |
| 第四章 水稻OsAGAP生理功能研究 | 第113-130页 |
| 第一节 材料与方法 | 第113-116页 |
| 1． 实验材料 | 第113页 |
| 2． 实验方法 | 第113-116页 |
| 2． 1 OsAGAP在水稻中正义及反义表达载体的构建 | 第113页 |
| 2． 2 转基因水稻的培养 | 第113-114页 |
| 2． 3 激素及TIBA处理转基因水稻 | 第114页 |
| 2． 4 根部向地性分析 | 第114页 |
| 2． 5 生长素极性运输的测定 | 第114-115页 |
| 2． 6 生长素含量的测定 | 第115页 |
| 2． 7 PI染色观察根细胞 | 第115页 |
| 2． 8 FM1-43染色观察 | 第115-116页 |
| 第二节 结果与分析 | 第116-130页 |
| 1． OsAGAP基因正反义载体的构建 | 第116页 |
| 2． 转基因水稻表型观察 | 第116-120页 |
| 3． OsAGAP超表达水稻的生理分析 | 第120-125页 |
| 4． OsAGAP超表达水稻向地性研究 | 第125-126页 |
| 5． OsAGAP超表达水稻IAA含量测定 | 第126-127页 |
| 6． OsAGAP超表达水稻囊泡运输研究 | 第127-128页 |
| 7． OsAGAP超表达水稻根部细胞超微结构观察 | 第128-130页 |
| 第五章 讨论 | 第130-142页 |
| 1． OsAGAP编码水稻中的一个ArfGAP | 第130页 |
| 2． OsAGAP参与水稻生长素极性运输调控 | 第130-133页 |
| 3． OsAGAP调节细胞内的囊泡运输 | 第133-134页 |
| 4． ArfGAP在生长素极性运输中起着重要作用 | 第134-142页 |
| 第三部分 OsAGAP在拟南芥中的生理功能研究 | 第142-158页 |
| 第一节 材料与方法 | 第143-147页 |
| 1． 实验材料 | 第143页 |
| 2． 实验方法 | 第143-147页 |
| 2． 1 OsAGAP在拟南芥中正义表达载体的构建 | 第143页 |
| 2． 2 农杆菌介导的真空抽旅法拟南芥转化 | 第143-144页 |
| 2． 3 拟南芥阳性苗筛选 | 第144页 |
| 2． 4 组织PCR | 第144页 |
| 2． 5 Southern杂交 | 第144-145页 |
| 2． 6 扫描电镜观察 | 第145-146页 |
| 2． 7 转基因拟南芥生理试验 | 第146-147页 |
| 第二节 结果与分析 | 第147-155页 |
| 1． OsAGAP转基因拟南芥鉴定 | 第147-149页 |
| 1． 1 超表达载体构建 | 第147页 |
| 1． 2 转基因拟南芥分子生物学鉴定 | 第147-149页 |
| 2． 转基因拟南芥表型观察 | 第149-151页 |
| 3． OsAGAP转基因拟南芥生理分析 | 第151-153页 |
| 3． 1 OsAGAP转基因拟南芥对TIBA地反应 | 第152-153页 |
| 3． 2 OsAGAP转基因拟南芥对IAA敏感性分析 | 第153页 |
| 3． 3 拟南芥幼苗含量测定 | 第153页 |
| 4． 拟南芥去顶实验 | 第153-155页 |
| 第三节 讨论 | 第155-157页 |
| 参考文献 | 第157-158页 |
| 论文结论 | 第158-159页 |
| 附录Ⅰ | 第159-165页 |
| 附录Ⅱ | 第165-168页 |
| 致谢 | 第168-170页 |
| 个人简介 | 第170页 |
