| 第1章 综述 | 第1-20页 |
| ·植酸与植酸酶 | 第8-9页 |
| ·植酸 | 第8页 |
| ·植酸酶 | 第8-9页 |
| ·植酸酶的分类和作用机理 | 第9页 |
| ·植酸酶的酶学性质 | 第9-10页 |
| ·植酸酶的分子量 | 第9页 |
| ·植酸酶的最适温度 | 第9页 |
| ·植酸酶的最适pH | 第9-10页 |
| ·植酸酶的抑制剂和活化剂 | 第10页 |
| ·植酸酶的研究进展 | 第10-13页 |
| ·植酸酶的来源 | 第10-12页 |
| ·植酸酶的分子生物学与基因工程 | 第12-13页 |
| ·植酸酶结晶与高级结构 | 第13-14页 |
| ·蛋白质结晶 | 第13-14页 |
| ·植酸酶高级结构 | 第14页 |
| ·糖基化研究进展 | 第14-16页 |
| ·糖生物学 | 第14-15页 |
| ·糖链的生物学功能 | 第15-16页 |
| ·植酸酶糖基化研究进展 | 第16页 |
| ·植酸酶活力测定 | 第16-17页 |
| ·植酸酶的应用 | 第17-19页 |
| ·植酸酶在食品工业上的应用 | 第17-18页 |
| ·植酸酶在饲料工业上的应用 | 第18页 |
| ·植酸酶在环境保护中的应用 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 第2章 材料与方法 | 第20-37页 |
| ·重组毕赤酵母(Pichia pastoris)发酵液中植酸酶的分离纯化 | 第20-22页 |
| ·离子交换色谱法原理(IEC) | 第20-21页 |
| ·两种植酸酶的分离纯化 | 第21-22页 |
| ·植酸酶组分分析方法 | 第22-27页 |
| ·十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第22-25页 |
| ·蛋白质含量测定-Folin-酚法 | 第25-27页 |
| ·植酸酶的表征 | 第27-30页 |
| ·植酸酶活力测定 | 第27-28页 |
| ·分子量标定 | 第28页 |
| ·N－末端氨基酸序列测定 | 第28-29页 |
| ·植酸酶的酶反应动力学 | 第29-30页 |
| ·植酸酶N-糖基化分析 | 第30-31页 |
| ·去N-糖基化酶Endo H | 第30-31页 |
| ·典型反应条件 | 第31页 |
| ·相对含糖量测定 | 第31页 |
| ·植酸酶结晶实验 | 第31-34页 |
| ·蛋白质结晶基本过程 | 第31-32页 |
| ·结晶方法 | 第32-33页 |
| ·材料与仪器 | 第33页 |
| ·实验步骤 | 第33-34页 |
| ·对比染色法与两种植酸酶的变性复性 | 第34-36页 |
| ·SDS-PAGE对比染色法(硫酸亚铁－钼蓝法)原理 | 第34页 |
| ·蛋白质变性与复性 | 第34-35页 |
| ·仪器与试剂 | 第35页 |
| ·实验步骤 | 第35-36页 |
| ·本课题的实验流程 | 第36-37页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第37-57页 |
| ·两种植酸酶的分离与纯化 | 第37-39页 |
| ·两种植酸酶的酶学性质表征及比较 | 第39-45页 |
| ·纯度鉴定和分子量标定 | 第39-41页 |
| ·两种植酸酶酶反应动力学分析 | 第41-45页 |
| ·温度对两种酶酶活力的影响 | 第41页 |
| ·pH对两种酶酶活力的影响 | 第41-42页 |
| ·两种酶的热稳定性分析 | 第42-43页 |
| ·底物浓度对两种酶酶活力的影响 | 第43页 |
| ·两种植酸酶米氏常数(Km)的测定 | 第43-44页 |
| ·金属离子对两种酶酶活力的影响 | 第44-45页 |
| ·两种植酸酶糖基化分析 | 第45-47页 |
| ·失活去糖基 | 第45-46页 |
| ·非失活去糖基 | 第46-47页 |
| ·两种植酸酶酶学性质及糖基化小结 | 第47-48页 |
| ·两种植酸酶结晶实验 | 第48-51页 |
| ·结晶方案设计 | 第48-50页 |
| ·结晶结果 | 第50-51页 |
| ·对比染色法与两种植酸酶变性－复性 | 第51-57页 |
| ·氯化钴－钼酸铵/钒酸铵染色法 | 第51-52页 |
| ·硫酸亚铁－钼酸铵/SDS-PAGE染色法的建立 | 第52-53页 |
| ·两种植酸酶的变性－复性 | 第53-57页 |
| ·两种植酸酶的复性实验 | 第53-54页 |
| ·植酸酶复性染色机理分析 | 第54-57页 |
| 第4章 总结与展望 | 第57-59页 |
| ·总结 | 第57-58页 |
| ·展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 附录98种结晶条件 | 第63-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
