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玉米抗大斑病相关基因表达片段的分离和克隆

1 引言第1-13页
2 材料和方法第13-21页
   ·材料第13-15页
     ·植物材料及菌株第13页
     ·试剂、培养基、Northern杂交液的配制第13-14页
     ·引物第14页
     ·探针第14-15页
     ·主要仪器和设备第15页
   ·实验方法第15-21页
     ·菌种繁育、玉米幼苗培养及接种第15页
     ·RNA提取及检测第15-17页
     ·引物的配制及逆转录第17页
     ·DDRT-PCR扩增第17-18页
     ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染第18页
     ·差异条带回收及二次扩增第18-19页
     ·反式Northern杂交检测获得的差异表达基因片段第19页
     ·病程相关蛋白基因检测第19页
     ·阳性条带的克隆测序第19-21页
3 结果与分析第21-39页
   ·玉米RNA提取和第一链cDNA合成第21页
   ·DDRT-PCR扩增第21-25页
     ·一步扩增法与两步扩增法的比较第21-22页
     ·引物筛选第22-24页
     ·差异条带的筛选第24-25页
   ·差异条带的回收及二次扩增第25-26页
   ·反式Northern杂交检测差异表达基因片段第26-27页
   ·病程相关蛋白基因检测第27页
   ·阳性cDNA片段的克隆测序第27-32页
   ·同源性分析第32-39页
4 讨论第39-41页
   ·mRNA差异显示技术的优化第39页
   ·假阳性率的克服第39-40页
   ·差异显示条带与抗病相关基因的关系第40页
   ·利用DDRT-PCR方法克隆玉米抗病基因的可能性及应用前景第40-41页
5 结论第41-42页
参考文献第42-47页
在读期间发表的学术论文第47-54页
作者简历第54-55页
致谢第55页

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