1 引言 | 第1-13页 |
2 材料和方法 | 第13-21页 |
·材料 | 第13-15页 |
·植物材料及菌株 | 第13页 |
·试剂、培养基、Northern杂交液的配制 | 第13-14页 |
·引物 | 第14页 |
·探针 | 第14-15页 |
·主要仪器和设备 | 第15页 |
·实验方法 | 第15-21页 |
·菌种繁育、玉米幼苗培养及接种 | 第15页 |
·RNA提取及检测 | 第15-17页 |
·引物的配制及逆转录 | 第17页 |
·DDRT-PCR扩增 | 第17-18页 |
·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染 | 第18页 |
·差异条带回收及二次扩增 | 第18-19页 |
·反式Northern杂交检测获得的差异表达基因片段 | 第19页 |
·病程相关蛋白基因检测 | 第19页 |
·阳性条带的克隆测序 | 第19-21页 |
3 结果与分析 | 第21-39页 |
·玉米RNA提取和第一链cDNA合成 | 第21页 |
·DDRT-PCR扩增 | 第21-25页 |
·一步扩增法与两步扩增法的比较 | 第21-22页 |
·引物筛选 | 第22-24页 |
·差异条带的筛选 | 第24-25页 |
·差异条带的回收及二次扩增 | 第25-26页 |
·反式Northern杂交检测差异表达基因片段 | 第26-27页 |
·病程相关蛋白基因检测 | 第27页 |
·阳性cDNA片段的克隆测序 | 第27-32页 |
·同源性分析 | 第32-39页 |
4 讨论 | 第39-41页 |
·mRNA差异显示技术的优化 | 第39页 |
·假阳性率的克服 | 第39-40页 |
·差异显示条带与抗病相关基因的关系 | 第40页 |
·利用DDRT-PCR方法克隆玉米抗病基因的可能性及应用前景 | 第40-41页 |
5 结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
在读期间发表的学术论文 | 第47-54页 |
作者简历 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |